Análise comparativa da produção do Vaccinia virus Ankara modificado (MVA) em dois sistemas: cultivo primário de fibroblastos de embrião de galinha versus membrana corioalantóide de ovos embrionados de galinha

• Autor(a) principal: Michelle Paula Silva
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/41549
• topic: Microbiologia; Microbiologia; Vírus Vaccinia; Vacinas

O Vaccinia virus Ankara Modificado (MVA), pertencente à família Poxviridae, foi obtido após 570 passagens em cultivo primário de células fibroblásticas de embrião de galinha (CEFs) para ser usado como vacina na campanha mundial de erradicação da varíola. Vacinas baseadas em poxvírus constituem um solo histórico de total sucesso alcançado em relação ao controle da varíola, a qual foi oficialmente declarada erradicada em 1980, após o uso de Vaccinia virus em vacinas. Atualmente há uma extensa verificação experimental que explora a possibilidade de inserção do MVA em plataformas vacinais devido a sua avirulência e segurança vacinal. Por esta razão, o objetivo deste trabalho foi determinar um sistema apropriado à multiplicação do vírus para produção de vacinas. A perspectiva foi comparar a eficiência multiplicativa do MVA em dois sistemas: cultivo primário de células fibroblásticas de embrião de galinha versus membrana corioalantóica (MCA) de ovos embrionados de galinha. Considerando ser extremamente vantajoso, do ponto de vista econômico, a multiplicação viral na MCA. Os resultados de titulação mostraram que o vírus se multiplica de maneira eficiente em ambos os sistemas de cultivo e que a obtenção de altos títulos virais é inversamente proporcional ao título de infecção. E além dos dados de titulação, a multiplicação viral na MCA foi determinada por quantificação de fluorescência através das imagens obtidas por microscopia confocal. Os resultados mostraram decréscimo na intensidade de fluorescência na medida em que ocorre aumento no tempo de infecção. Foi definido também a produtividade viral e observado a presença de pocks (lesões) entre infecções de 101 a 108 PFU na MCA. Tanto a presença de pocks quanto a obtenção de altos títulos virais foram demonstrados em infecções em até 104 PFU. Os pocks produzidos pela amostra MVA foram comparados com a produção de pocks por duas outras amostras de Vaccinia virus (VACV): Western Reserve (protótipo da família Poxviridae) e Lister (amostra mais usada em todo o mundo para produção de vacina durante o programa mundial de erradicação da varíola). A amostra VACV-WR produziu pocks grandes, enquanto que a amostra Lister produziu lesões intermediárias entre VACV-WR e MVA.