Taxonomia integrativa de trematódeos da superfamília Paramphistomoidea encontrados em ruminantes abatidos na cidade de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil

• Autor(a) principal: André Schultz Lopes
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/64787
• topic: paramphistomidae; balanorchiidae; pecuária; ruminantes; taxonomia; trematódeos; Parasitologia; Paramphistomatidae; Trematódeos; Taxonomia; Pecuária; Ruminantes

Apesar da importância econômica da pecuária para o Brasil, os helmintos parasitos de gado ainda persistem como agentes infecciosos que podem impactar a produção de carne, lã, leite e derivados. Entre os diferentes trematódeos que infectam ruminantes, destacam-se os representantes da superfamília Paramphistomoidea Fischoeder, 1901, os quais possuem reconhecido potencial patogênico. No Brasil, apesar de registros da ocorrência de diferentes espécies, principalmente na região Sul do país, há ainda muitas lacunas a serem preenchidas no que se refere à taxonomia e biologia desses helmintos. Assim, o presente estudo teve como objetivo identificar, através de uma abordagem integrativa, os trematódeos encontrados em rumens de bovinos e ovinos de produção provenientes da zona rural de Jaguarão, Pelotas e Rio Grande e abatidos para consumo em Pelotas, RS, entre maio e julho de 2022. Os parasitos obtidos foram separados por morfotipos, contados e fixados para estudos morfológicos e moleculares. Para as análises morfológicas, paranfístomos obtidos em cada localidade ou espécie de hospedeiro foram processados através de diferentes técnicas helmintológicas recomendadas para esse grupo zoológico, incluindo a realização de cortes histológicos, coloração e montagem de lâminas permanentes. Estas preparações foram analisadas através de microscopia de luz, sendo realizada a caracterização morfológica, análises morfométricas e o registro fotográfico. A identificação morfológica foi realizada com o auxílio de chaves taxonômicas e descrições disponíveis na literatura. Os estudos moleculares de amostras de parasitos de diferentes morfotipos, localidades e hospedeiros (n= 11), consistiram na extração de DNA, seguida de PCR e sequenciamento de regiões do gene nuclear 28S rDNA, da região ITS-2 e de duas regiões gene mitocondrial cox-1 (barcode e pós-barcode). As sequências obtidas foram comparadas com dados disponíveis no GenBank para representantes da superfamília Paramphistomoidea e utilizadas em análises filogenéticas. No total, 25 amostras de rumens apresentando parasitos foram analisadas, sendo obtido um total de 2969 trematódeos na parede interna dos órgãos. Dois morfotipos de paranfístomos foram identificados. O primeiro, presente em 100% das amostras obtidas, foi identificado como Paramphistomum leydeni Nasmark, 1937. O estudo morfológico possibilitou a visualização de estruturas diagnósticas da espécie, como a presença de papilas tegumentares em fileiras concentradas na extremidade anterior do corpo e genitália terminal do tipo leydeni. As análises moleculares realizadas com o marcador ITS-2 revelaram uma similaridade de 100% em relação a isolados de P. leydeni oriundos da Argentina, China, Turquia e Uruguai. Já com o marcador cox-1, os isolados do Brasil apresentaram divergências genéticas entre 0,19-3,21% em relação a isolados de P. leydeni da Europa, suportando a identificação morfológica. Além disso, nas análises filogenéticas realizadas para esse marcador, foi verificado o agrupamento em um clado bem suportado com P. leydeni da China, mas com valores de divergência genética maiores (5,47-6,23%). O segundo morfotipo, identificado como Balanorchis anastrophus Fischoeder, 1901, foi encontrado em cinco rumens (20%). Sua identificação morfológica se deu pela observação de características diagnósticas dos Balanorchiidae Stunkard, 1925, incluindo papilas longas e ramificadas ao redor da abertura oral, sacos faringeais extramurais, genitália terminal formando uma bolsa do cirro na porção pré-medial do corpo, útero e ovário pré-testiculares e ausência de papilas genitais. As topologias das árvores filogenéticas obtidas e as elevadas divergências genéticas verificadas para os diferentes marcadores avaliados suportaram a separação de Balanorchiidae de outros paranfístomos de ruminantes. O presente estudo confirma molecularmente a ocorrência de P. leydeni no Brasil, além de apresentar as primeiras sequências de exemplares do Brasil. Ademais, são obtidas as primeiras sequências moleculares de B. anastrophus, além de avaliar-se pela primeira vez sua posição filogenética.