Produção de uma proteína quimera usada como alvo vacinal frente à ascaridíase e transformação genética de plantas (Arabidopsis thaliana e Solanum lycopersicum cultivar Micro-Tom) com o gene vacinal
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Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Tese |
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Ricardo Toshio Fujiwarahttp://lattes.cnpq.br/7445566906318673Joni Esrom LimaAna Paula PeconickJacqueline Araújo FiúzaVitor Luis Tenório MatiRicardo Nascimento Araujohttp://lattes.cnpq.br/0500009536912790Joseane Camilla de Castro2021-05-28T19:46:57Z2021-05-28T19:46:57Z2021-04-29http://hdl.handle.net/1843/36180CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas GeraisCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorAscaris lumbricoides e Ascaris suum são parasitos causadores da ascaridíase, doença que leva a quadros de desnutrição e tem grande impacto especialmente no desenvolvimento de crianças infectadas. Ambos os parasitos são capazes de infectar humanos e são por vezes considerados uma única espécie. Estima-se que 800 milhões de pessoas estão infectadas por A. lumbricoides e as medidas profiláticas que visam o controle do mesmo são limitadas, principalmente em regiões endêmicas. Usadas há séculos, as vacinas, são uma estratégia de intervenção que possuem melhor custo- benefício, sendo as recombinantes, uma das mais promissoras contra uma gama de patógenos e tumores. A produção de vacinas em plantas tem sido estudada há algum tempo, apresentando resultados positivos e grandes vantagens. Assim sendo, o presente trabalho visou a produção de uma vacina quimera e linhagens transgênicas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e Arabidopsis thaliana expressando de forma ectópica a sequência do antígeno vacinal contra A. suum. Para tanto, foram selecionados epítopos para a construção da proteína quimera. Fêmeas de camundongos BALB/c foram imunizadas e pode- se constatar que animais imunizados com a proteína quimera juntamente com MPLA (Formulação Vacinal) apresentaram uma redução de cerca de 73,54% na carga parasitária em relação ao grupo controle imunizado com PBS. Em análise histopatológica, foi possível verificar uma redução da inflamação no pulmão e do espessamento dos septos no grupo imunizado apenas com a proteína quimera bem como no imunizado com a Formulação Vacinal. O grupo imunizado com a Formulação Vacinal apresentou, ainda, maior produção de IgG do que os demais grupos.Em ELISA foi verificado o reconhecimento da proteína quimera por soro de animais infectados com A. suum. Foi estabelecido um protocolo para a imunização de camundongos com a proteína quimera por via oral, bem como verificada a bioacessibilidade da mesma em digestão in vitro. Plantas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e Arabidopsis thaliana foram transformadas geneticamente, obtendo plantas transgênicas na geração T1, com a inserção do gene da proteína quimera, confirmada por PCR e seleção por antibiótico. Por conseguinte, pode-se inferir que a proteína quimera é um bom alvo vacinal frente à infecção por A. suum, sendo seu uso benéfico para o controle da ascaridíase e que a inserção do gene do imunógeno em plantas pode vir a ser um caminho para a produção de vacinas.porUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em ParasitologiaUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIAParasitologiaAscarisVacinasAscaris spp.Vacina recombinanteVacina oralVacina comestívelProdução de uma proteína quimera usada como alvo vacinal frente à ascaridíase e transformação genética de plantas (Arabidopsis thaliana e Solanum lycopersicum cultivar Micro-Tom) com o gene vacinalinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALTese Joseane.pdfTese Joseane.pdfapplication/pdf3179778https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/36180/3/Tese%20Joseane.pdf568aeac6934675140a91c3465c6776a8MD53LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82119https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/36180/4/license.txt34badce4be7e31e3adb4575ae96af679MD541843/361802021-05-28 16:46:57.66oai:repositorio.ufmg.br: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Repositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2021-05-28T19:46:57Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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