Desenvolvimento e produção de uma vacina quimérica multi-peptídica e avaliação de sua eficácia vacinal contra ascaridíase

• Autor(a) principal: Ana Clara Gazzinelli Guimarães
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/42239
• topic: Epítopos; Vacina; Quimera; Vacinologia; Ascaridíase; Parasitologia; Epitopos; Vacinas; Quimera; Ascaridíase

A ascaridíase humana é uma das doenças tropicais negligenciadas mais prevalentes no mundo, afetando cerca de 450 milhões de pessoas, principalmente crianças em idade escolar (SAC) em países em desenvolvimento. O controle da ascaridíase humana é predominantemente baseado em programas de administração de medicamentos em massa mas taxas elevadas de reinfecção são comumente observadas. O desenvolvimento de uma vacina que promova qualidade de vida, menor morbidade e proteção a longo prazo, algo ainda não comercialmente disponível, seria desejável para o controle da infecção. Previamente nosso grupo demonstrou que a imunização com antígenos brutos de Ascaris sp. em camundongos induziu uma resposta protetora mediada por IgG e redução de até 60% no número de parasitos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo identificar e caracterizar epítopos de células B de Ascaris sp., bem como outros helmintos de importância em saúde pública e avaliar suas implicações na eficácia da vacina. Para isso, foram utilizados dois métodos diferentes para a busca de uma vacina: 1seleção de epítopos-alvo de célula B selecionados pela mineração de dados por um pipeline da bioinformática, bem como, 2uso da técnica de Phage Display com o objetivo de identificar epítopos conformacionais que são reconhecidos por anticorpos específicos de Ascaris sp. Após o processo de identificação desses peptídeos, seleção e validação pela avaliação da reatividade específica desses peptídeos utilizando soro de camundongos controle, imunizados com antígenos de Ascaris sp., ou de animais infectados três vezes com ovos de A. suum (soros hiperimunes), os peptídeos selecionados altamente específicos e reativos a IgG anti-A. suum foram alinhados em sua melhor conformação e sintetizados em um vetor de clonagem para posterior expressão e purificação da quimera polipeptídica. Após vacinação e posterior infecção-desafio em camundongos BALB/c, foi possível observar uma redução significativa de aproximadamente 50% da carga parasitária nos animais imunizados com a quimera ASCVac-1+MPLA quando comparado ao grupo controle. Além disso, altos níveis séricos de IgG vacina-específica e suas subclasses IgG1, IgG3 e IgG2a foram observadas no grupo vacinado com a quimera. A vacinação demonstrou uma polarização da resposta Th2, com produção significativa de citocinas IL-4, IL-5, IL-13 e uma regulação da produção de IL-33. Além disso, a vacinação levou a uma menor inflamação quando observado o perfil de celulas inflamatórias presentes no BAL após vacinação + infecção além de um menor dano tecidual quando avaliado score de inflamação total e disfunção do pulmão dos animais. Como conclusão, foi possível observar que a quimera ASCVac-1, além de proteger em relação a carga parasitária, induziu uma robusta resposta humoral vacina-específica e não induziu a produção e sensibilização dos animais por IgE, se tornando assim, um potencial candidato vacinal contra a ascaridíase.