Aavaliação in vitro do perfil fenotípico de cultura primária de macrófagos frente à infecção pela linhagem selvagem T1 e seu mutante linhagemCP13 de Corynebacterium pseudotuberculosis

• Autor(a) principal: Rachid Aref El Aouar Filho
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9ABH34
• topic: Genética; Corynebacterium pseudotuberculosis; Macrófagos; Oxído nítrico; Arginase; PCR quantitativa; Genética; Espécies reativas de oxigênio; Citocinas

Corynebacterium pseudotuberculosis é uma bactéria Gram-positiva pertencente à Classe das Actinobactérias. Esta bactéria é um patógeno intracelular facultativo causadora da patologia Linfadenite Caseosa (LC) em ovinos e caprinos. Durante o processo de infecção estas bactérias são contidas por células da resposta imune inata, sendo as principais células efetoras dessa defesa os neutrófilos e macrófagos. Este trabalho foi proposto com o intuito de avaliar a resposta de macrófagos murinos derivados de monócitos de medula, in vitro, em infecção por C. pseudotuberculosis linhagem CP13, um mutante para um gene relacionado ao transporte de ferro em Corynebacterium diphtheriae, que gerou bons níveis de proteção em subsequentes desafios contra C. pseudotuberculosis, e observar o perfil de resposta gerado por essas culturas. Este tipo de caracterização possibilita inferir a participação da resposta imune inata na ação contra infecções desta bactéria. Com os resultados obtidos neste trabalho, conseguimos observar que esta bactéria é responsável por diminuir a viabilidade das culturas de macrófagos em uma proporção que depende da concentração de bactérias inoculadas nas culturas de células. A infecção, em macrófagos, por C. pseudotuberculosis, foi responsável por ativar a produção de óxido nítrico (NO) e induzir a atividade da enzima arginase I, além de mostrar que este aumento da produção de NO e atividade da enzima arginase I estão relacionados ao aumento da expressão do RNAm para a enzima Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) e arginase I. Nossos resultados mostram, também, que a linhagem CP13 não induz a produção de ROS e que comparada com a linhagem T1, linhagem selvagem do qual foi derivada a linhagem CP13, induz maior produção da citocina IL-10 e menos TNF-, em macrófagos. Com estes dados, pudemos inferir que a linhagem CP13 apresenta um perfil similar de ativação dos macrófagos, quando comparados com a linhagem T1. Entretanto houve diferença no perfil de citocinas induzidas por infecção em macrófagos pelas linhagens T1 e CP13, onde está última induziu mais IL-10 (citocina associada a um perfil de maior susceptibilidade a infecções microbianas).