Papel do receptor canabinóide CB2 e sua relação com a NNOS no reparo endotelial e remodelamento vascular

• Autor(a) principal: Gianne Paul Campos
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/30204
• topic: Receptor canabinóide CB2; Remodelamento vascular

Estudos com modelos celulares, animais e humanos demonstram de maneira consistente que as atuais terapias cirúrgicas e anti-proliferativas retardam, mas não evitam, a hiperplasia das camadas média e íntima arteriais, independentemente de um quadro de dislipidemia associado. Por outro lado, apesar do inquestionável sucesso da atual terapia hipocolesterolemiante, vários estudos sugerem que o sistema endocanabinóide pode representar um importante alvo de atuação terapêutica em doenças fibro-proliferativas vasculares. Desta forma, testamos a hipótese de que a ativação dos receptores canabinóides tipo 2 (CB2) poderia modular a enzima óxido nítrico sintase neuronal (nNOS) e prevenir o dano causado em modelo de oclusão de carótidas em camundongos C57BL6J. A artéria carótida foi ocluída sob tratamento local com agonista CB2 – JWH015. A carótida foi avaliada por técnicas histológicas e também por microscopia de fluorescência (imunofluorescência e sondas fluorescentes sensíveis ao NO e radicais superóxido). Células endoteliais humanas também foram expostas a tratamento com mesmo agonista. Neste modelo foram avaliadas a expressão proteica (eNOS, nNOS, marcadores de proliferação e receptores CB2), a produção de NO e superóxido e migração celular. Os resultados encontrados demonstram que o agonista CB2 previne a formação neoíntima no modelo estudado, com redução na densidade de células endoteliais, colágeno, metaloproteinase de matriz e radicais superóxido. Nas células endoteliais, o tratamento com JWH015 aumenta a expressão da nNOS e a produção de NO. A inibição da nNOS leva à diminuição de superóxido, indicando que esta isoforma possa estar desacoplada. Sob shear stress oscilatório (OSS), observamos que tanto o estímulo com JWH015 quanto com a inibição da nNOS levam a uma diminuição na produção de NO, que parece ser provocada pela ativação da via PI3K/AKT. Sobre a cicatrização endotelial (ensaio de fenda), encontramos que o tratamento com agonista do receptor CB2 reduziu o tempo para fechamento da fenda em repouso. Por outro lado, a inibição da enzima nNOS retardou este processo. Concluímos ainda que, para que o receptor CB2 seja utilizado como um alvo farmacológico para prevenção da formação neoíntima, mais ensaios precisam ser desenvolvidos em modelos biológicos.