Caracterização de marcadores moleculares com aplicabilidade para identificação de duas espécies de peixe com interesse forense: Prochilodus argenteus e Prochilodus costatus

• Autor(a) principal: Aline Torres de Azevedo Chagas
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-A3KE5V
• topic: Prochilodus argenteus; Marcadores mitocondriais; Prochilodus lineatus; Prochilodus costatus; Biologia forense; Genética

A crescente preocupação com as questões ambientais, aliada ao advento de leis que procuram proteger os recursos naturais, tem criado uma nova demanda na área das ciências forenses que trata das perícias ambientais. Em relação às atividades de pesca, existem diversas cartas legislativas em vigor que buscam proteger os recursos pesqueiros. Em contrapartida, a correta identificação de espécimes apreendidos em ocorrências de pesca ilegal ainda é feita de modo precário. Dessa forma, seria desejável o estabelecimento de protocolos simplificados que permitam a correta identificação de materiais apreendidos como forma de fortalecer as ações de fiscalização e, posteriormente, a prova no meio jurídico. Nesse aspecto, as técnicas moleculares podem oferecer grande ajuda através do estabelecimento de marcadores espécie-específicos, que permitam afirmar se o material questionado é proveniente, de fato, de espécie cuja pesca não é permitida. O presente trabalho objetiva caracterizar marcadores moleculares para as espécies Prochilodus argenteus e Prochilodus costatus, ambas de grande importância ecológica e econômica na região da bacia hidrográfica do rio São Francisco. Para tanto, foi feito o sequenciamento de DNA genômico das duas espécies, montagem de novo das reads geradas, montagem e anotação das sequências de DNA mitocondrial e comparação com a sequência de DNA mitocondrial de outra espécie do mesmo gênero: Prochilodus lineatus. Foram selecionados marcadores mitocondriais gênero-específicos e espécie-específicos e o desenho de primers foi feito levando-se em conta a possibilidade de identificação de gênero e espécie através da análise dos amplicons gerados em reação em cadeia da polimerase (PCR). Foram identificados um par de primers gênero-específicos, que apresentaram boa sensibilidade e especificidade na detecção de DNA do gênero Prochilodus. Quanto aos primers espécieespecíficos, foi encontrado um par que apresentou amplificação apenas para DNA de P. argenteus. O presente trabalho também obteve sucesso na extração de DNA de petrechos de pesca (uma rede e uma tarrafa) que foram sabidamente utilizados para coleta de espécimes de P. argenteus e P. costatus. Através de PCR utilizando marcadores mitocondriais, foi possível detectar a presença de material genético de Prochilodus no DNA extraído dos petrechos de pesca. Os dados obtidos a partir do sequenciamento de P. argenteus e P. costatus também permitiram a identificação de dezenas de milhares de marcadores microssatélites, que ainda precisam ser avaliados quanto à aplicabilidade para a identificação de espécies e para estudos de diversidade. A tecnologia apresentada no presente trabalho possui potencial para ser expandida para outras espécies e para ser aplicada em estudos de ecologia molecular, genética de conservação e na área forense como meio de determinação da materialidade de delitos e, consequentemente,fortalecimento da prova pericial no meio jurídico.