Associação de células tronco da polpa dentária a enxertos ósseos desmineralizados para otimização de reparos ósseos

• Autor(a) principal: Igor Daniel Garcia Reis
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35393
• topic: Xenoenxertos; Células tronco mesenquimais; Osteogênese; Osteoindução; Defeito ósseo intrabucal; Xenoenxertos; Células-tronco mesenquimais; Osteogênese

A utilização de xenoenxertos derivados de osso bovino tem se configurado como uma alternativa aos autoenxertos na substituição de perdas óssea. Entretanto, sua propriedade de osteoindução e potencial osteogênico ainda são limitados. Por essa razão, algumas estratégias como a desmineralização de fragmentos ósseos, bem como a utilização de células tronco mesenquimais tem sido proposta para a otimização do reparo ósseo. Nesse contexto, este estudo avaliou os efeitos da associação de uma matriz óssea de origem bovina, marca comercial- Criteria®, desmineralizada em EDTA 10%, às CTPD’s (modificadas para eGFP - enhancedgreenfluorescentprotein) no reparo de um defeito ósseo intrabucal em ratos. Os defeitos foram preenchidos por: 1. Matriz óssea desmineralizada (MOD); 2. CTPD’s em suspensão; 3. CTPD+MOD; 4. Coágulo sanguíneo (controle). Os animais foram sacrificados após 7, 14 e 49 dias para avaliações histomorfométricas e imunohistoquímica para GFP (visando o monitoramento das células tronco transplantadas); e após 3 e 7 dias para análise de expressão de genes indicativos de diferenciação osteoblástica (Runx2, Osx e iBSP) por RT-PCRq. Aos 7 dias, o fechamento epitelial foi incompleto em todos os grupos. A morfometria demonstrou que a deposição óssea na área do defeito cirúrgico foi maior no grupo que recebeu a associação proposta, seguido pela enxertia com as CTPD’s isoladas. Este resultado está em concordância com a análise molecular, que demonstrou a expressão do marcador de diferenciação osteoblástica iBSP, 64 vezes maior no mesmo período. Esse padrão de deposição óssea na análise morfométrica se manteve nos períodos de 14 e 49 dias, evidenciando a associação benéfica entre CTPD+MOD para terapias de regeneração tecidual óssea. O nível de maturação da matriz foi avaliado por coloração de PicroSirius Red e revelou a maior maturação no grupo CTPD+MOD. Resumidamente, os resultados demonstraram otimização do processo de regeneração óssea com a associação CTPD+MOD em todos os períodos. O estudo traz esclarecimentos sobre o xenoenxerto de fabricação nacional e apresenta uma proposta de otimização para o seu uso no desenvolvimento de terapias de regeneração tecidual.