Avaliação de métodos moleculares para detecção de Acinetobacter baumannii multidroga resistentes recuperados de pacientes com suspeita de pneumonia associada à ventilação mecânica

• Autor(a) principal: Mirna Giselle Moreira
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AUUEN2
• topic: Microbiologia; Microbiologia; Pneumonia Associada à Ventilação Mecânica; Acinetobacter baumannii/microbiologia; Infecções hospitalares

Infecções Relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS) são consideradas um dos maiores problemas de saúde pública em todo o mundo. O gênero Acinetobacter representa um importante patógeno relacionado a infecções hospitalares, principalmente em pneumonia associada à ventilação mecânica (PAV). O objetivo desse trabalho foi avaliar o desempenho de métodos moleculares no diagnóstico laboratorial de Acinetobacter baumannii isolados de lavado broncoalveolar (mini-BAL), obtidos de pacientes adultos com suspeita de PAV em unidade de terapia intensiva do hospital das clínicas de Minas Gerais. A cultura quantitativa das amostras de mini-BAL foi utilizadas como comparação aos resultados obtidos através da avaliação dos resultados das técnicas moleculares sendo elas: FISH, LAMP, PCR convencional, qPCR (SYBR® Green, TaqMan®) e ddPCR. Foram coletadas 44 amostras de mini-BAL e destas, oito foram positivas em cultura para A. baumannii todas elas multidroga resistentes. A técnica de FISH não houve hibridização em concordância quando comparada aos controles utilizados. LAMP a técnica é sensível e versátil, houve sucesso na padronização na pesquisa de blaNDM-1 apresentando uma concordando em 100% com os resultados da PCR convencional, porém para os outros iniciadores pesquisados como; região ITS, blaOXA-51 e blaKPC-2, foram detectados falsos positivos quando comparados com a PCR. Na comparação das três gerações da PCR frente ao alvo testado, a PCR convencional demonstrou boa especificidade e sensibilidade, houve uma correlação de 75% dos produtos amplificados aos resultados de cultura quantitativa. O SYBR® Green demonstrou baixa especificidade ao painel de bactérias testado, tornado a quantificação das amostras de mini-BAL questionáveis. O TaqMan® mostrou boa sensibilidade e especificidade com limite de detecção igual ao obtido com o SYBR® Green, 1,02 pg/µl, porém houve uma discrepância na quantificação das 44 amostras de mini-BAL em comparação com a cultura quantitativa. A sensibilidade e especificidade da técnica de ddPCR se mostrou excelente, houve uma perfeita correlação dos resultados da quantificação absoluta das amostras de mini-BAL, aos resultados de cultura quantitativa demonstrando ser uma técnica precisa e extremamente eficiente. Portanto através dos resultados obtido com a PCR convencional demonstrou ser uma boa técnica para detecção e a ddPCR demonstrou ser mais acurada e sensível podendo ser utilizada como uma ferramenta para acompanhamento do processo infeccioso e para descalonamento da terapia antimicrobiana usada.