Efeitos da inibição da enzima conversora de angiotensina na osteoartrite experimental em ratos

• Autor(a) principal: Grazielle Aguiar de Sá
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/33885
• topic: Osteoartrite; Condroproteção; Tecido fibroso do osso; Monoiodoacetato de sódio; Angiotensina II; Enzima conversora de angiotensina; Captopril; Biologia Celular; Osteoartrite; Peptidil Dipeptidase A; Captopril

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da inibição da enzima conversora de angiotensina (ECA) na resposta fisiopatológica dos tecidos articulares durante a osteoartrite (OA). A OA foi induzida com monoiodoaceto de sódio (MIA) em ratos Wistar e, 7 dias depois, iniciou-se tratamento com captopril (80 mg/kg, diário, gavagem), por 21 dias. No 28º dia, foi feita a eutanásia dos ratos para obtenção de lavado articular (contagem total de leucócitos e ELISA) e coleta do joelho para avaliação histopatológica e imuno-histoquímica. A inibição da ECA não aumentou a hiperalgesia induzida pelo MIA. O tratamento com captopril levou à redução do score OARSI, preveniu a morte de condrócitos e a perda de proteoglicanos, reduziu o tecido de reparação e influenciou a expressão de IL-10 na cartilagem articular e tecido de reparação. Além disso, foi observado redução das alterações ósseas induzidas pelo MIA, houve menos tecido fibroso no osso dos animais tratados, que foi relacionado com a redução dos osteoclastos nas áreas de reabsorção óssea e aumento da expressão de IL-10. Houve redução do número de leucócitos migrados a partir da sinóvia e dos níveis de TNF, bem como aumento de IL-6 e TGF-β com o tratamento com captopril. Apesar disso, hiperplasia sinovial induzida por MIA não reduziu. De modo parcialmente semelhante ao MIA, a injeção de Ang II no joelho de ratos promoveu hiperalgesia, edema articular e aumento do número de leucócitos na cavidade articular. A injeção diária de Ang II no joelho de ratos, por 14 dias, também desencadeou discreta perda de proteoglicanos, desorganização de condrócitos na MEC e morte de condrócitos. A fim de confirmar se o efeito condroprotetor do captopril na OA é relacionado à inibição da ECA e consequente redução de Ang II nos condrócitos, realizou-se cultura primária de condrócitos obtidos das articulações de ratos Wistar neonatos. As células foram estimuladas com MIA ou Ang II e tratadas com captopril ou enalapril para avaliação de viabilidade celular (MTT), conteúdo de proteoglicanos (Alcian Blue) e expressão de mRNA por PCR quantitativo (AT1R, AT2R, MasR, ECA, ECA2, TGF-β, MMP-13, Col2A1, Agrecan e Beta-actina). A estimulação dos condrócitos com MIA (6 x 10-6 M) ou Ang II (10-5 M) por 36 horas reduziu a viabilidade celular, o que foi prevenido pelo tratamento com captopril (10-9 M), assim como pelo enalapril (10-9 M). Após 14 dias, o efeito observado foi semelhante para o MIA, mas não para a Ang II, visto que não foram observadas diferenças significativas entre os grupos. Os estímulos com MIA e Ang II também desencadearam redução da produção de proteoglicanos (porcentagem de área marcada, 14 dias após estímulos) que foi restaurada após o tratamento com captopril. Tal fenótipo de modulação do SRA pelo captopril parece decorrer do eixo ECA/AngII/AT2R, visto que o MIA reduziu a expressão de mRNA de AT2R, efeito que foi revertido pelo captopril. O tratamento com captopril em condrócitos estimulados com MIA também induziu redução da expressão de MasR e o aumento da expressão de mRNA de ECA, TGF-β e colágeno tipo II. Este trabalho reforça a importância do SRA local do joelho, a inibição da ECA com o captopril no MIA levou a atenuação das lesões da cartilagem, do osso subcondral e normalizou o recrutamento de leucócitos a partir da sinóvia. Também vimos que a injeção articular da Ang II reproduz alguns dos efeitos induzidos pelo MIA e que o captopril protege os condrócitos in vitro após estímulos MIA ou Ang II. Em conjunto esses dados indicam que a Ang II participa da fisiopatologia da OA e apontam o captopril como uma promissora estratégia terapêuca para OA de joelho