Estudo de hemoglobinas variantes com mobilidadeseletroforética semelhante à da hemoglobina S emcrianças do programa de triagem neonatal de MinasGerais (PTN-MG)

• Autor(a) principal: Marcilene Rezende Silva
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8YAN59
• topic: Ciências da saúde- saúde da criança e do adolescente; Hemoglobinas; Anemia falciforme; Triagem neonatal; Alelos; Erros de diagnóstico; Hemoglobina falciforme; Criança; Adolescente

Algumas hemoglobinas (Hb) variantes apresentam mobilidade eletroforética semelhante à da Hb S, o que pode levar ao falso diagnóstico de traço ou doença falciforme. A maioria dos indivíduos possuidores das Hbs variantes é assintomática, mas em vários casos aHb está associada à alfa-talassemia, o que pode resultar em alterações hematológicas. A associação de Hb variante com a Hb S ou Hb C pode determinar quadros clínicos e/ou laboratoriais complexos. Objetivo e Métodos: O objetivo deste estudo foi determinar a frequência das variantes de hemoglobina detectadas no Programa de Triagem Neonatal de Minas Gerais com mobilidade elétrica similar à da Hb S. O DNA de 118 crianças foi utilizado para verificar a presença do alelo bS. O diagnóstico de alfa-talassemia do tipo 3.7 ou 4.2 foi realizado por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) multiplex do tipo gap (gap- PCR multiplex). Os produtos dessa PCR foram então digeridos com endonucleases de restrição para detectar as mutações correspondentes à Stanleyville-II e Hasharon, já descritasno Brasil. Nos casos negativos para essas Hbs fez-se sequenciamento dos genes HBA ou HBB. Dados clínicos foram obtidos das crianças que compareceram à consulta clínica na Fundação Hemominas. Resultados: Das 118, apenas 6 crianças apresentaram a Hb S. Dentre as 112 foram encontradas duas crianças, (1,8%) com Hb Stanleyville-II em homozigose (-3.7;Stanleyville/-3.7;Stanleyville) e outras 94 (84%) com Stanleyville-II em heterozigose (84 têm genótipo /- 3.7;Stanleyville, cinco -a3.7/-a3.7;Stanleyville e cinco aStanleyvillea/aa) Dentre os 112 casos, seis apresentavam Hb Hasharon em heterozigose (todas aa/-a3.7Hasharon-). Detectaramse ainda cinco casos com Hb Ottawa, um com Hb St Lukes e um com Hb Etobicoke, todasvariantes de cadeia , em heterozigose e genótipo /. Hb G-Ferrara foi encontrada em duas crianças (uma /-a3.7 e outra aa/aa) e Hb Maputo (/-a3.7)em uma, ambas variantes b e em heterozigose. Dentre as hemoglobinas citadas acima, foram encontradas cincoassociações com a Hb S: em três crianças com Hb Stanleyville-II, uma Ottawa e uma St Luke's. A Hb Etobicoke foi encontrada em uma criança que possui o alelo híbrido 212. Não foi observada nenhuma alteração clínica decorrente dessas associações. Em várias crianças com Hb Stanleyville-II, todas com ancestralidade africana, foram observadas microcitose e hipocromia, devido a associação com a alfa talassemia do tipo 3.7. Foi estabelecida PCRRFLP (Polimorfismo de Fragmento de Restrição) para a identificação de todas as hemoglobinas, com exceção da hemoglobina G-Ferrara. Conclusões: 1. Hemoglobina Stanleyville-II é relativamente comum em Minas Gerais (incidência de 1:11.500); 2. Apresença das Hbs Stanleyville-II, Ottawa, Maputo, G-Ferrara, Hasharon, Etobicoke e St Luke's pode levar a falso diagnóstico de traço ou doença falciforme, necessitando-se de testes adicionais para o diagnóstico diferencial correto; 3. A presença dessas Hbs parece não possuirrelevância clínica, mesmo nos casos encontrados neste estudo quando se detectou associação das Hbs variantes St Luke's, Stanleyville-II e Ottawa com a Hb S; 4. Hipocromia e microcitose, observadas em várias crianças, são devidas à co-herança de -talassemia e não à presença da Hb Stanleyville-II; 5. Foram encontrados casos assintomáticos de Hb Maputo e G- Ferrara em heterozigose com a Hb A. Os pais dessas crianças receberam orientação genética sobre a possibilidade das crianças terem filhos com doença falciforme se houver coherançacom a Hb S; 6. A PCR-RFLP pode ser utilizada como método diagnóstico para todas as Hbs variantes identificadas neste estudo, com exceção da Hb G-Ferrara.