Caracterização biológica de tripomastigotas de T. cruzi provenientes de células deficientes em LAMP

• Autor(a) principal: Anny Carolline Silva Oliveira
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/33742
• topic: LAMP; Trypanosoma cruzi; Infectividade; Biologia Celular; Trypanosoma cruzi; Virulência; Proteína 1 de Membrana Associada ao Lisossomo; Proteína 2 de Membrana Associada ao Lisossomo

Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas, uma doença tropical negligenciada, de grande importância epidemiológica. O T. cruzi entra nas células hospedeiras interagindo com sua superfície e causando lesões em sua membrana, as quais levam a um processo de endocitose compensatória que culmina na internalização do parasito. Em estudos anteriores mostramos que a ausência de duas proteínas localizadas na membrana lisossomal, LAMP-1 e 2, interferem com a entrada do T. cruzi e com sua multiplicação no interior das células hospedeiras. No interior de células deficientes em LAMP, os parasitos apresentam uma capacidade de multiplicação muito maior do que em células selvagens. Poderia um ambiente intracelular deficiente em LAMP alterar características do parasito? Para responder esta questão, infectamos fibroblastos selvagens e deficientes em LAMP-1 e/ou LAMP-2 e avaliamos, nesses parasitos, as taxas de invasão e adesão celular em células selvagens para LAMP e em células da linhagem LLC-MK2, bem como a capacidade de injuriar as células. Nossos resultados mostraram que, para as culturas de fibroblastos selvagens, os parasitos derivados de células deficientes em LAMP-1 e LAMP-2 ou apenas em LAMP-2 apresentam uma taxa de invasão diferente entre si e também quando comparados aos parasitos derivados de células selvagens para LAMP. Demonstramos que estas diferenças não estão relacionadas à capacidade de adesão dos parasitos à célula hospedeira, o que foi corroborado por ensaios realizados em uma linhagem de células epiteliais, LLC-MK2. Por outro lado, as diferenças nas taxas de invasão mostraram ser influenciadas pela capacidade de injúrias e sinais de cálcio intracelular induzidos por estes parasitos. Nós acreditamos que o ambiente intracelular deficiente em LAMP esteja alterando a expressão de proteínas de superfície do parasito, acarretando no seu maior ou menor sucesso de invasão celular. Essa hipótese é corroborada por ensaios preliminares da análise de microvesículas liberadas pelos parasitos provenientes dos três tipos celulares