Expressão de antagonismo por Parabacteroides distason: pesquisa, purificação e caracterização de substâncias tipo bacteriocina

• Autor(a) principal: Anna Gabriella Guimarães Oliveira
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-ADHQH4
• topic: Parabacteroides distasonis; Antagonismo; Bacteriocina; Microbiologia; Bacteriocinas; Inibidores químicos

Parabacteroides distasonis é considerado membro da microbiota indígena de seres humanos e outros animais e tem sido associado à etiopatogenia de diversas doenças infecciosas. Bacteriocinas são substâncias antimicrobianas de natureza proteica sintetizadas por uma ampla gama de bactérias, que exercem papel relevante nas relações ecológicas entre bactérias e apresentam grande potencial de aplicação biotecnológica.A presente investigação teve como objetivo avaliar a expressão de substâncias antagonistas tipo bacteriocina por P. distasonis e caracterizar uma destas substâncias. Foram incluídas no estudo 78 amostras debactérias isoladas de espécimes fecais de frangos de corte. Foi detectada a expressão de antagonismo por 50% das amostras, sendo observados heteroantagonismo, isoantagonismo e autoantagonismo.Uma das amostras, selecionada para as etapas subsequentes do estudo, foi submetida à extração proteica. Detectou-se elevação do título de atividade do extrato intracelular precipitado com sulfato de amônio à saturação de 50% (C50) após estresse oxidativo. C50 foi inativado por proteases e altas temperaturas e manteve-se ativo após exposição a solventes orgânicos e uma ampla faixa de valores de pH. A CIM e CBM de C50 indicou atividade bacteriostática contra P. distasonis ATCC 1295. O extrato foi purificado por etapas sucessivas de cromatografia e os dados relativos a SDS-PAGE e espectrometria de massas indicaram a detecção de substância antagonista com massa molecular de cerca de 7 kDa. Em conjunto, os resultados sugerem a purificação de um peptídeo com espectro de ação relativamente amplo, possivelmente relevante do ponto de vista ecológico e potencialmente aplicável na prática médica.