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Fernao Castro BragaMaria Beatriz Abreu GloriaEliana de Faria GarciaAna Barbara Dias Pereira2019-08-14T07:24:57Z2019-08-14T07:24:57Z2012-02-06http://hdl.handle.net/1843/EMCO-8ZSH5SHancornia speciosa Gomes, popularmente conhecida como mangaba, tem uso etnomédico para o tratamento de hipertensão e diabetes, entre outros. A potencial atividade anti-hipertensiva da espécie foi relatada em trabalhos anteriores de nosso grupo em modelos in vitro, ex vivo e in vivo, sendo rutina, L-(+)-bornesitol e ácido quínico identificados como constituintes bioativos. O presente trabalho teve como objetivo uantificar os principais constituintes químicos em extratos de folhas da espécie, visando contribuir para sua padronização. Para tanto, foram desenvolvidos e validados métodos analíticos. Foram definidos como marcadores químicos o ácido clorogênico, rutina, L-(+)-bornesitol, flavonoides totais e FlavHS, um triglicosídeo de quercetina identificado por análises de CLAE-EM, empregando-se análises de impressão digital química de extratos etanólicos de folhas da espécie, obtidas de diferentes acessos genéticos. Os teores de flavonoides totais foram determinados por espectrofotometria no UV/Vis após reação com cloreto de alumínio. O método foi validado e apresentou linearidade (r2 > 0,99), seletividade, precisão (DPR < 3,09%), exatidão (recuperação entre 94,03% e 96,24%) e robustez adequadas. Um método por CLAE-DAD foi desenvolvido e validado para a quantificação de rutina, ácido clorogênico e FlavHS, o qual apresentou parâmetros adequados de linearidade (r2 > 0,9968), seletividade, precisão (DPR < 2,65%), exatidão (recuperação entre 97,09% e 102,97) e robustez. CLAE com detector de índice de refração foi avaliada para quantificação de L-(+)-bornesitol em matrizes de H. speciosa; porém, não se obteve seletividade adequada nas condições cromatográficas estabelecidas. Como alternativa, desenvolveu-se um método por CLAE-DAD para a quantificação deste ciclitol com derivatização prévia da amostra com cloreto de p-toluenossulfonila, utilizando-se pentaeritritol como padrão interno. A validação do método indicou parâmetros analíticos adequados de linearidade (r2 > 0,9942), seletividade, precisão (DPR < 3,17%), exatidão (recuperação entre 92,31% e 99,13%) e robustez. Os métodos desenvolvidos foram aplicados na análise de extratos etanólicos provenientes de oito acessos distintos de H. speciosa, que apresentaram diferenças marcantes nos teores dos marcadores químicos. L-(+)-bornesitol foi o constituinte majoritário (teores de 5,77±0,09% a 8,78±0,14%), seguido por flavonoides totais (teores de 1,83±0,09% a 4,84±0,12%), rutina (teores de 1,05±0,00% a 2,00±0,03%), ácido clorogênico (teores de 0,80±0,01% a 1,52 ± 0,02%) e FlavHS (teores de 0,32±0,00% a 0,84±0,00). Os constituintes quantificados poderão ser utilizados para a padronização de derivados da droga vegetal folhas de H. speciosa.Hancornia speciosa Gomes, a plant species popularly named mangaba, has ethnomedical uses to treat hypertension and diabetes, among others. The potential antihypertensive activity of the species has been previously described by our group employing in vitro, ex vivo and in vivo assays, rutin, L-(+)-bornesitol and quinic acid being regarded as the bioactive compounds. The goal of this work was to quantify the main constituents in extracts from H. speciosa leaves, aiming to contribute to their standardization. Analytical methods were developed and validated for this purpose. Definition of chemical markers for quantification was based on chemical fingerprint analyses of plant materials collected from different specimens. Chlorogenic acid, rutin, L-(+)-bornesitol, total flavonoids and FlavHS, a quercetin triglycoside identified by HPLC-MS analysis, were selected for quantitation. The contents of total flavonoids were assayed by spectrophotometry on UV-Vis, after chemical reaction with aluminum chloride. The method showed adequate linearity (r2 > 0.99), selectivity, precision (RSD < 3.09%), accuracy (recovery between 94.03% - 96.24%) and robustness. An HPLC-DAD method was developed and validated to quantify rutin, chlorogenic acid and FlavHS, which was shown to be linear (r2 > 0.9968), selective, precise (RSD < 2.65%), accurate (recovery between 97.09% - 102.97) and robust in the established conditions. HPLC with refractive index detector was evaluated to quantify L-(+)-bornesitol in matrices of H. speciosa; however, the established chromatographic conditions were not selective for quantitative analysis. As alternative, an HPLC-DAD method was developed to quantify this cyclitol in H. speciosa employing a derivatization step with p-toluenosulfonyl chloride and pentaerytritol as internal standard. The method presented adequate linearity (r2 > 0.9942), selectivity, precision (RSD < 3.17%), accuracy (recovery between 92.31% - 99.13%) and robustness. The developed methods were employed for the analysis of ethanol extracts from leaves of eight specimens, which showed significant differences in the contents of chemical markers. L-(+)-bornesitol was the major compound (5.77±0.09% to 8.78±0.14%), followed by total flavonoids (1.83±0.09% to 4.84±0.12%), rutin (1.05±0.00% to 2.00±0.03%), chlorogenic acid (0.80±0.01% to 1.52±0.02%) and FlavHS (0.32±0.001% to 0.84±0.00). The quantified compounds may be employed for standardization of derivatives from H. speciosa leaves.Universidade Federal de Minas GeraisUFMGApocinaceasValidação de métodoMangabaMarcadores biológicosAgentes hipotensoresProdutos naturaisrutinaHancornia speciosaquantificaçãoácido clorogênicoL-(+)-bornesitolderivatizaçãoContribuição para a padronização química de Hancornia speciosa Gomes: desenvolvimento e validação de métodos analíticos para a quantificação de marcadores químicosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALdisserta__o_ana_barbara_dias_2012.pdfapplication/pdf2843185https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/EMCO-8ZSH5S/1/disserta__o_ana_barbara_dias_2012.pdf93ea1e90028cf0faa63fef7acd197606MD51TEXTdisserta__o_ana_barbara_dias_2012.pdf.txtdisserta__o_ana_barbara_dias_2012.pdf.txtExtracted texttext/plain260382https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/EMCO-8ZSH5S/2/disserta__o_ana_barbara_dias_2012.pdf.txt5748ef3a8901ef05f94166e760663822MD521843/EMCO-8ZSH5S2019-11-14 14:04:55.269oai:repositorio.ufmg.br:1843/EMCO-8ZSH5SRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2019-11-14T17:04:55Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
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