Avaliação do papel das moléculas CD80 e CD86 expressas por monócitos na ativação dos linfócitos T CD4+ e no direcionamento de um perfil pró-inflamatório/imunomodulatório nas diferentes formas clínicas da doença de Chagas

• Autor(a) principal: Bruna Fernandes Pinto
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/36794
• topic: Doença de Chagas; Monócitos; Moléculas de co-estimulação CD80 e CD86; Subpopulação de linfócitos T; Biologia celular; Doença de Chagas; Monócitos; Antígeno B7-1; Antígeno B7-2; Linfócitos T CD4-positivos

A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, foi descoberta em 1909, mas continua sendo um sério problema de saúde pública e econômico em muitos países da América Latina, com aproximadamente 8 milhões de pessoas infectadas em todo o mundo. Durante a fase crônica da doença, os indivíduos podem ser classificados nas formas clínicas indeterminada (IND), caracterizada pela ausência de sintomas, ou cardíaca (CARD) quando as manifestações clínicas resultam em danos progressivos ao miocárdio. Os mecanismos envolvidos no desenvolvimento das formas graves da doença de Chagas são ainda pouco compreendidos, entretanto, o estudo da resposta imune é crucial para determinar a evolução da doença. As moléculas co-estimuladoras CD80 e CD86 expressas por monócitos e suas subpopulações apresentam um papel fundamental na ativação de linfócitos, e dessa forma, da resposta imune adaptativa subsequente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o papel das moléculas co-estimuladoras CD80 e CD86 em monócitos e suas subpopulações no direcionamento das diferentes subpopulações de linfócitos T CD4+ (Th1, Th2, Th17, Treg), após estímulo in vitro com antígeno de T. cruzi, nas diferentes formas clínicas da doença de Chagas. Os resultados demonstraram maior expressão de CD86 em todas as subpopulações de monócitos apenas em IND em comparação com o grupo NI. Após estimulação com T. cruzi, pacientes IND também apresentaram maior frequência de linfócitos T CD4+CTLA-4+ quando comparado aos indivíduos NI. Por análise de regressão linear observamos associação entre CD80 e CD28, e entre CD86 e CTLA-4, com uma alta proporção de células Treg em pacientes IND. Posteriormente, avaliamos o papel de CD80 e CD86 no direcionamento das subpopulações Th1, Th2, Th17, Treg através de um ensaio utilizando bloqueio para os receptores CD80 ou CD86 em cultura com PBMC de indivíduos NI, IND e CARD. Demonstramos redução na frequência de linfócitos Treg CTLA-4+ em cultura anti-CD86 apenas no grupo IND. Além disso, Treg apresentou maior expressão de CTLA-4 quando comparado às outras subpopulações. Verificamos aumento na frequência de Th1 CD28+ na presença de anticorpo anti-CD86, assim como maior frequência de Th2 e Th17 no grupo CARD. Observamos que na presença de anti-CD80 ocorria aumento da frequência de linfócitos de Treg e Treg CTLA-4+, enquanto anti-CD86 reduzia a frequência dessas populações apenas no grupo IND. Em pacientes CARD, anti-CD80 leva à redução da frequência de linfócitos Treg e Treg CTLA-4+, e a presença de anti-CD86 leva ao aumento de Treg CTLA-4+. Verificamos que na presença de anti-CD86, CD80 pode estar relacionada com a expressão de CTLA-4 expressos por Th2 e Th17 e CD80 apresenta correlação negativa apenas com CTLA-4 em Treg do grupo IND. Finalmente, avaliamos atuação das moléculas CD80 e CD86 no desenvolvimento da resposta imune mediada por linfócitos T CD8+ e T CD8+ reguladores. Observamos maior frequência de linfócitos CD8+ Treg CD28+ em pacientes CARD e de CD8+ Treg, CD8+ Treg IL-10+ e CD8+ Treg CTLA-4+ no grupo IND. Observamos correlação negativa entre CD8+ Treg CD28+ com monócitos na cultura anti-CD80 e entre CD8+ Treg CTLA-4+ com monócitos patrulhadores na cultura anti-CD86. Concluímos que os linfócitos Th2 e Th17 podem ser ativados através da interação entre os receptores CD80/CTLA-4 em pacientes assintomáticos e sugerimos que linfócitos Th1 são ativados por meio da interação entre os receptores CD80/CD28 em pacientes CARD. Além disso, propusemos que o receptor CD86 possa estar envolvido na imunorregulação pela sua associação com CTLA-4, sendo decisivo na ativação de linfócitos Treg apenas pacientes assintomáticos. Todavia, células Treg de pacientes CARD podem ser ativadas de forma alternativa, via interação entre os receptores CD80/CTLA- 4. Assim, concluímos que CD86 é uma molécula chave na interação com CTLA-4 e ativação dos linfócitos reguladores principalmente em pacientes assintomáticos, podendo representar uma nova estratégia para controlar a inflamação e os danos teciduais em pacientes com doença de Chagas.