Aspectos da interação entre Vaccinia virus e célula hospedeira: significado funcional desempenhado pelas MAPKs JNK e ERK na biologia viral

• Autor(a) principal: Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira
• Data de Publicação: 2007
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/42535
• topic: Vaccinia virus; Multiplicação viral; JNK1/2; VACV; Microbiologia; Vírus Vaccinia; Interações entre Hospedeiro e Microrganismos; Proteínas Quinases Ativadas por Mitógeno; Proteínas Quinases JNK Ativadas por Mitógeno

Os eventos de sinalização intracelular representam um papel fundamental na multiplicação viral. Nos últimos trabalhos, o grupo de transdução de sinal do laboratório de vírus mostrou que a ativação da proteína quinase ativada por mitógenos (MAPK) (ERK1/2) e seus substratos são essenciais para a multiplicação do Vaccinia virus (VACV) (Magalhães et al, 2001, Andrade et al, 2004, Silva et al, 2006). Neste trabalho nós analisamos a cinética de ativação das MAPKs ERK1/2, JNK1/2 durante a infecção pelo VACV, assim como a atuação destas quinases sobre fatores de transcrição alvos. Nossos resultados demonstram que ERK1/2 e JNK1/2 regulam temporalmente a ativação do fator de transcrição c-Jun. A atuação destas quinases sobre c-Jun leva à formação de complexos DNA-proteínas das seqüências AP-1 e CRE em momentos distintos da infecção viral. Neste trabalho, também caracterizamos a ativação de JNK1/2 durante a infecção viral. Observamos que a ativação de JNK1/2 é mediada pelas MAPKKs MKK4 e MKK7 e ainda que o fator de crescimento do VACV (VGF), embora envolvido, não é essencial para a ativação JNK1/2. Ainda, observamos que a proteína quinase viral B1R não é responsável pela ativação de JNK1/2 durante a infecção. Além disso, com intuito de determinar o papel de JNK1/2, utilizamos o inibidor SP600125, e observamos um profundo reflexo na expressão do gene viral da timidina quinase, na replicação do DNA viral, na expressão de proteína viral e na multiplicação do VACV. No entanto, este drástico efeito na multiplicação viral não pode ser atribuído à ativação de JNK1/2 pois estes dados não corroboram com experimentos realizados com células nocautes para estas quinases. Observamos então, que SP600125, além de JNK1/2, inibe inespecificamente outra(s) proteína(s)/via(s) importante(s) na multiplicação viral. Apesar de JNK1/2 não apresentar um papel sobre a multiplicação viral, em experimentos de fenótipo de placa, as células nocautes para estas quinases apresentaram um tamanho reduzido em relação às células selvagens. Além disto, a liberação da forma EEV demonstrou um aumento na ausência de JNK1/2. Juntamente com dados da literatura sugerimos que JNK1/2 pode ter seu papel relacionado ao controle da liberação das formas CEV e EEV da célula hospedeira. Além disto, JNK1/2 parece ter um papel relacionado à resposta celular antiviral através da indução da citocina IL-6. A modulação das vias sinalizadoras envolvendo MEK/ERK e MKK/JNK durante o curso da infecção pelo VACV se correlaciona com as necessidades temporais virais, sendo a primeira relacionada à multiplicação, enquanto que MKK/JNK está envolvida principalmente com a saída das formas virais CEV e EEV da célula infectada.