Detecção e quantificação de Campylobacter spp. em carcaças de frango resfriadas e congeladas por PCR em tempo real associada a propídeo monoazida (PMA)

• Autor(a) principal: Andrea Guicheney Salgado e Almeida Castro
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-A7ER7D
• topic: PMA; PCR em tempo real; carcaças de frangos de corte; temperatura de armazenamento; Frango de corte Carcaças; Campylobacter; Reação em cadeia de polimerase

A contaminação de carcaças de frangos de corte por micro-organismos do gênero Campylobacter é frequente. No entanto, sua detecção é dificultada devido a sua característica fastidiosa. Metodologias como a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em Tempo Real foram desenvolvidas para verificar a presença do micro-organismo. Porém, também é necessário determinar sua viabilidade visto que apenas bactérias vivas são capazes de causar infecções alimentares no homem. O propídio monoazida (PMA) é um intercalante de DNA capaz de penetrar apenas em células não viáveis, impedindo que seu DNA seja amplificado pela técnica da PCR em tempo real. Com o objetivo de detectar e quantificar Campylobacter spp. viável em carcaças de frango de corte congeladas e resfriadas, foram analisadas 60 amostras de carcaças de frangos (30 resfriadas e 30 congeladas) pela metodologia da PCR em tempo real com e sem o tratamento pelo PMA. Foi observado que quando as amostras foram tratadas com PMA, tanto as carcaças congeladas quanto as resfriadas, tiveram menor taxa de positividade em relação às amostras não tratadas com este intercalante de DNA (p<0,001). Das 60 amostras analisadas pela metodologia da PCR em tempo real, 53 (88,33%) apresentaram resultado positivo para Campylobacter spp., enquanto 11 (18,33%) tiveram resultado positivo utilizando-se o método PCR em tempo real com tratamento pelo PMA. Pela técnica da PCR em tempo real sem o tratamento com PMA, 26 (86,67%) amostras resfriadas e 27 (90%) amostras congeladas apresentaram resultados positivos para Campylobacter spp.. Quanto utilizado o PMA, foi observado que um menor número de carcaças congeladas continha o micro-organismo viável, duas (6,67%), quando comparado às nove (30%) carcaças resfriadas positivas (P<0,05). Conclui-se que o armazenamento de carcaças de frango de corte em temperaturas de refrigeração e congelamento é eficaz na redução da positividade para Campylobacter spp. quando utilizada a técnica de PCR em tempo real com tratamento por PMA em relação à PCR em tempo real sem o tratamento com o intercalante de DNA. Além disso, o micro-organismo se mantem viável com maior frequência em carcaças resfriadas, quando comparado a carcaças congeladas