Propriedades físico-químicas e biológicas de lipossomas termossensíveis de cisplatina funcionalizados com ácido hialurônico.

• Autor(a) principal: Isabela Pereira Gomes
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/44460
• topic: Lipossoma termossensível; Ácido hialurônico; Cisplatina; Direcionamento ativo

A administração continuada de cisplatina (CDDP), quimioterápico usado no tratamento de vários tipos de tumores sólidos, é limitada em função de reações adversas, como nefrotoxicidade, hepatotoxicidade, neurotoxicidade, mielotoxicidade e ototoxicidade. Na tentativa de contornar esses inconvenientes e melhorar o índice terapêutico da CDDP, modificações farmacotécnicas têm sido propostas, como a encapsulação da CDDP em sistemas de liberação de fármacos, tais como os lipossomas. Nesse sentido, foi proposto o desenvolvimento de lipossomas termossensíveis de cisplatina não funcionalizado (LTS-CDDP), funcionalizado com ácido hialurônico (AH) por interação eletrostática (LTS-CDDP-AH-1) e funcionalizado com AH por ligação covalente (LTS-CDDP-AH-2), no intuito de proporcionar um direcionamento ativo para a região tumoral. Inicialmente foi realizado um estudo de caracterização das formulações desenvolvidas, por meio da associação das técnicas espalhamento dinâmico da luz (DLS), microcalorimetria e espalhamento de raio-X a baixo ângulo (SAXS). A taxa de encapsulação de CDDP foi avaliada por cromatografia líquida de alta eficiência por um método de derivatização com dietilditiocarbamato. Em seguida, foi avaliada a citotoxicidade frente as células tumorais MDA-MB-231, bem como a toxicidade in vivo em camundongos Swiss sadios. Os resultados de caracterização mostraram diâmetro médio menor que 200 nm e índice de polidispersão (PDI) sugestivos de formulações homogêneas (< 0,2), indicando a ausência de agregação de vesículas mesmo após funcionalização com AH. A eficiência do revestimento na superfície do lipossoma foi atribuída a valores de potencial zeta próximos da neutralidade. Os dados de DLS mostraram uma redução significativa no diâmetro médio e contagem de partículas (Kcps) das formulações avaliadas a 40oC, e o revestimento com AH não alterou a temperatura de transição de fase das formulações. A encapsulação de CDDP foi de 9,3 ± 0,7% para LTS-CDDP-AH-2, 16,1 ± 1,9% para LTS-CDDP-AH-1 e 13,7 ± 0,9% para LTS-CDDP. O perfil obtido por SAXS para todas as formulações estudadas foi característico de uma organização lamelar independente da temperatura avaliada e apresentou dilatação da bicamada, causada por desorganização na estrutura dos lipídeos, confirmando a alteração conformacional devido ao aquecimento. No entanto, o perfil de liberação in vitro sugeriu uma possível adsorção do fármaco na bicamada fosfolipídica ocasionando uma taxa de difusão de CDDP antes de atingir a Tc (42oC), para LTS-CDDP e LTS-CDDP-AH-2. Para o LTS-CDDP-AH-1, a presença do polímero pode estar modulando essa difusão, gerando um perfil de liberação mais controlado e lento. Os resultados biológicos mostraram que LTS-CDDP apresentou maior citotoxicidade quando comparado com CDDP livre, além de levar ao aumento da ocorrência de senescência. O uso de hipertermia nos grupos tratados com LTS-CDDP e LTS-CDDP-AH-1 aumentou a ocorrência de apoptose em relação aos grupos sem hipertermia. No estudo in vivo, foi observado maior toxicidade da formulação catiônica para células saudáveis, sendo observado a ocorrência de nefrotoxicidade nos animais tratados com LTS-CDDP. Enquanto que, com o uso do ligante AH, os efeitos adversos conhecidos relacionados ao uso de CDDP foram eliminados, uma vez que os animais tratados com essa formulação não apresentaram alterações significativas nos exames hematológicos e bioquímicos, bem como nas análises histológicas. Sendo assim, a formulação de CDDP proposta, termossensível e contendo AH por interação eletrostática, apresenta características adequadas para tratamento do câncer por via intravenosa, em associação com hipertermia moderada, podendo ser capaz de reduzir a toxicidade relacionada a CDDP, representando uma alternativa potencial para veiculação desse fármaco.