Desenvolvimento e validação de metodologia multirresíduos por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas para análise de fluorquinolonas em músculo e rim de frangos

• Autor(a) principal: Diego Gomes Rocha
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SFSA-9JVULS
• topic: Fluorquinolonas; QuEChERS; Espectrometria de massas; Cromatografia líquida; Química analítica; Antibióticos; Cromatografia líquida de alta eficiência; Frango congelado; Espectrometria de massa

Este trabalho envolveu a otimização e a validação de dois métodos para determinação de fluorquinolonas em matrizes de músculo e rim de frango, sendo elas: ácido nalidíxico, ácido oxolínico, ácido pipemídico, danofloxacina, difloxacina, ciprofloxacina, enrofloxacina, flumequina, marbofloxacina, norfloxacina, ofloxacina e sarafloxacina. O procedimento de extração empregado para ambos as metodologias validadas foi um método QuEChERS, cuja otimização para extração de 2,000g de amostra baseou-se no uso de um planejamento fatorial Box-Behnken 33, com avaliação estatística realizada por ANOVA. Foi utilizada como fase extratora 10,0 mL de acetonitrila acidificada com 5% de ácido acético glacial para rim de frango, e, para a matriz músculo, empregou-se 10,0 mL de uma mistura da composição da fase extratora anterior com água ultrapurificada (80:20 %v/v). A etapa de clean-up foi feita por extração em fase sólida dispersiva, empregando-se 50,0 mg de uma mistura dos sorventes C18 e PSA (50:50 % m/m). O primeiro método validado envolveu o uso da técnica LC-MS/MS para separação, identificação e quantificação dos doze analitos, avaliando-se cada fluorquinolona por uma transição de massas para confirmação e outra para quantificação, pelo modo multiple reaction monitoring. As figuras de mérito avaliadas durante a validação apresentaram bons desempenhos, avaliando-se a veracidade (recuperações acima de 88,5%), linearidade (R2 > 0,931), precisão (coeficientes de variação menores que 12,3%), seletividade, além da obtenção de baixos valores de incertezas expandidas. O segundo método validado empregou a técnica de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas de alta resolução, com a identificação e quantificação de nove fluorquinolonas, no modo single ion monitoring. As figuras de mérito avaliadas também se mostraram satisfatórias, com recuperações acima de 87,0%, coeficientes de determinação maiores que 0,960, coeficientes de variação menores que 8,7%, além de boa seletividade e baixos valores de incerteza expandida. Os dois métodos foram estatisticamente comparados, usando-se o teste t de Student não-pareado e com variância agrupada, ao nível de confiança de 95%, e não apresentaram diferença significativa.