Utilização de PCR multiplex para o diagnóstico etiológico da mastite bovina

• Autor(a) principal: Marisa Araujo Silva
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SSLA-7UWHS2
• topic: Mastite bovina; PCR Multiplex; Leite; Mastite Diagnóstico; Leite Análise; Bovino Doenças

O controle eficiente da mastite requer teste sensível, rápido e específico para identificação do agente causador da doença. Testes moleculares como a PCR têm sido crescentemente utilizados em diagnósticos microbiológicos. Neste trabalho foi utilizado um protocolo de extração de DNA diretamente em amostras de leite e a utilização de uma PCR multiplex (mPCR) para identificação dos principais agentes da mastite bovina: Staphylococcus. aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus uberis e Streptococcus dysgalactiae e do patógeno emergente: S. aureus resistente a meticilina (MRSA). Foram realizados testes com leite artificialmente contaminado com concentração bacteriana conhecida e posteriormente, para validar a técnica, foram analisadas 30 amostras oriundas de leite de tanque de expansão recebidas pelo Laboratório de Análise da Qualidade do Leite LabUFMG - MAPA. Para a realização das PCRs foram utilizados iniciadores que amplificam a região 16S-23S do RNA ribossomal de S. aureus, S. agalactiae, S. uberis e S. dysgalactiae e, para detecção de MRSA, utilizou-se iniciadores que amplificam o gene Mec A. O limite de detecção dos microrganismos envolvidos em infecções de glândula mamária é 1000 UFC/mL por mPCR, o que demonstra a sensibilidade do método para o diagnóstico etiológico de mastite bovina