Proteínas da maquinaria de exocitose da insulina, formação do complexo SNARE e concentração intracelular de Ca2+ em ilhotas pancreáticas de ratos jovens submetidos à desnutrição proteica na vida intrauterina e pós desmame

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lopes, Bruna Vieira
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMT
Texto Completo: http://ri.ufmt.br/handle/1/1778
Resumo: We investigated the kinetics of glucose-induced insulin secretion and its relationship with some elements involved in exocytosis of insulin granules in pancreatic islets from rats subjected to protein restriction. Male Wistar rats were divided into two groups: control (C) and low-protein (LP) fed, respectively, with a diet containing 17% and 6% of protein, since intrauterine life up to 40 days of life. Glucose evoked insulin secretion in both groups, with basal (2.8 mmol/L) and stimulated (22.2 mmol/L) secretion significantly reduced in LP compared to C islets. LP group showed a decrease in first and second phases of glucosestimulated insulin secretion and a decrease in glucose oxidation and concentration of intracellular calcium. There was also an increase of the syntaxin 1A and VAMP-2 and a reduction of the syntaxin4 and synaptotagmin7 expressions. Other proteins analyzed (Munc18, SNAP-25, PKCα, PKA, CaMKII and SERCA3) and the association between syntaxin 4 - Munc18 were not different between groups as did to all mRNA analysed. Finally, the LP islets showed an increase of the SNARE complex, but no time-dependent change in the pattern of complex formation during challenge with glucose. Thus, the damage in the secretory response to glucose by LP islets could, at least partly, be explained by changes in glucose metabolism, Ca2+ handling, and SNARE complex formation and proteins involved. SNARE complex data could also indicates the importance of the stoichiometry of its proteins participating and its pattern of the formation for the functionality of the complex.
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Glucose evoked insulin secretion in both groups, with basal (2.8 mmol/L) and stimulated (22.2 mmol/L) secretion significantly reduced in LP compared to C islets. LP group showed a decrease in first and second phases of glucosestimulated insulin secretion and a decrease in glucose oxidation and concentration of intracellular calcium. There was also an increase of the syntaxin 1A and VAMP-2 and a reduction of the syntaxin4 and synaptotagmin7 expressions. Other proteins analyzed (Munc18, SNAP-25, PKCα, PKA, CaMKII and SERCA3) and the association between syntaxin 4 - Munc18 were not different between groups as did to all mRNA analysed. Finally, the LP islets showed an increase of the SNARE complex, but no time-dependent change in the pattern of complex formation during challenge with glucose. Thus, the damage in the secretory response to glucose by LP islets could, at least partly, be explained by changes in glucose metabolism, Ca2+ handling, and SNARE complex formation and proteins involved. SNARE complex data could also indicates the importance of the stoichiometry of its proteins participating and its pattern of the formation for the functionality of the complex.CAPESFAPEMATA secreção de insulina estimulada por glicose é bifásica, caracterizada por uma rápida primeira fase, seguida por uma lenta e sustentada segunda fase, ambas dependente de cálcio. O processo de exocitose de insulina envolve a formação do complexo SNARE, composto por sintaxina 1A, sintaxina 4, SNAP25 e VAMP-2 e é regulado por proteínas adicionais, tais como Munc18 e sinaptotagmina7. Disfunção da resposta secretória, como na desnutrição, tem sido considerada um dos fatores envolvidos na etiologia de diabetes mellitus tipo 2. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a cinética de secreção de insulina induzida por glicose, o manuseio de Ca2+ citoplasmático intracelular e os elementos envolvidos no processo de exocitose dos grânulos de insulina em ilhotas pancreáticas de ratos submetidos à restrição proteica. Foram utilizados ratos Wistar divididos em dois grupos: controle (C) e desnutrido (D) alimentados, respectivamente, com dieta contendo 17% e 6% de proteína, desde o início da vida intrauterina até 40 º dia de vida. A glicose estimulou a secreção de insulina em ambos os grupos, porém, as secreções basal (2,8mmol/L) e estimulada (22,2mmol/L) foram significativamente reduzidas nos ratos D comparados aos C. Animais D apresentaram diminuição da primeira e segunda fases de secreção de insulina estimulada por glicose, bem como diminuição na oxidação da glicose e na concentração de cálcio intracelular. A formação do complexo SNARE, as concentrações das proteínas SNARE e das proteínas reguladoras deste complexo mostraram-se alteradas com a restrição proteica. Houve aumento do conteúdo de sintaxina 1A e VAMP-2 e redução de sintaxina 4 e sinaptotagmina 7. As demais proteínas analisadas (Munc18, SNAP-25, PKCα, PKA, CAMKII, SERCA3) e a associação entre sintaxina 4 - Munc18 não foram diferentes entre os grupos. Finalmente, os animais desnutridos apresentaram aumento do complexo SNARE, porém sem mudança no padrão de sua formação ao longo do tempo de estímulo com glicose. Portanto, o prejuízo na resposta secretória à glicose nos animais D poderia, pelo menos em parte, ser explicada pelas alterações no metabolismo de glicose, manejo de cálcio, formação do complexo SNARE e expressão de proteínas relacionadas. Dados sobre o complexo SNARE poderiam também indicar a importância da estequiometria de suas proteínas participantes e de seu padrão de formação para a determinação da funcionalidade do complexo.Universidade Federal de Mato GrossoBrasilFaculdade de Nutrição (FANUT)UFMT CUC - CuiabáPrograma de Pós-Graduação em Nutrição, Alimentos e MetabolismoReis, Marise Auxiliadora de Barroshttp://lattes.cnpq.br/0243246676385123Reis, Marise Auxiliadora de Barros025.079.108-01http://lattes.cnpq.br/0243246676385123Carneiro, Everardo Magalhaes967.982.748-72http://lattes.cnpq.br/5931969496718980025.079.108-01Torsoni, Adriana Souza178.741.278-46http://lattes.cnpq.br/0261125208602999Lopes, Bruna Vieira2020-02-18T15:08:03Z2012-12-062020-02-18T15:08:03Z2012-10-06info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisLOPES, Bruna Vieira. Proteínas da maquinaria de exocitose da insulina, formação do complexo SNARE e concentração intracelular de Ca2+ em ilhotas pancreáticas de ratos jovens submetidos à desnutrição proteica na vida intrauterina e pós desmame. 2012. 63 f. Dissertação (Mestrado em Biociências) - Universidade Federal de Mato Grosso, Faculdade de Nutrição, Cuiabá, 2012.http://ri.ufmt.br/handle/1/1778porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMTinstname:Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)instacron:UFMT2020-02-24T07:02:36Zoai:localhost:1/1778Repositório InstitucionalPUBhttp://ri.ufmt.br/oai/requestjordanbiblio@gmail.comopendoar:2020-02-24T07:02:36Repositório Institucional da UFMT - Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)false
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