Efeitos da aclimatação ao desafio frio moderado sobre a contratilidade e o cálcio intracelular transiente em cardiomiócitos de camundongos C57BL/6J selvagens e knockouts para o canal Trpa1.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Miranda, Denise Coutinho de
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFOP
Texto Completo: https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/18707
Resumo: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
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spelling Efeitos da aclimatação ao desafio frio moderado sobre a contratilidade e o cálcio intracelular transiente em cardiomiócitos de camundongos C57BL/6J selvagens e knockouts para o canal Trpa1.Frio moderadoCanais TRPA1CardiomiócitosContratilidadeTransiente de CálcioPrograma de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Doenças cardiovasculares representam uma das condições com maior taxa de mortalidade, com aumento da incidência na estação fria. Sugere-se que o canal TRPA1, presente no coração, desempenha um papel no desenvolvimento e progressão de várias condições, incluindo hipertensão ao frio. Diante disso, torna-se necessário compreender a fisiologia básica dos canais TRPA1 em associação com o frio moderado. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da aclimatação ao desafio frio moderado sobre a contratilidade e transiente intracelular de cálcio ([Ca2+]i) no coração de camundongos C57BL/6J selvagens e knockouts para o canal Trpa1. Os experimentos foram conduzidos em camundongos machos (45 a 52 dias; C57BL/6J e TrpA1 KO em fundo C57BL/6J). Os animais foram mantidos a 30oC por 15 dias (adaptação) e, após a divisão dos grupos, foram aclimatados por mais 15 dias na temperatura pré-definida (30oC ou 22oC), totalizando 30 dias de experimento (adaptação + tratamento). A divisão ocorreu de forma aleatória, a saber: WT 22°C, WT 30°C, TrpA1 KO 22°C, TrpA1 KO 30°C (n=10 cada grupo). Após o período de intervenção foi realizada a eutanásia e a coleta dos corações. Os cardiomiócitos dos animais (ventrículos e átrios) foram isolados (dispersão enzimática) para registro de contratilidade e transiente [Ca2+]i. Foi verificado maior amplitude de contração em todos os animais submetidos ao desafio frio moderado; aumento no tempo de contração e relaxamento nos animais do grupo Trpa1 KO 22oC em relação aos animais Trpa1 KO 30oC e aos animais WT 22oC; nenhuma alteração na amplitude do transiente [Ca2+]i, porém foi possível observar maiores tempos para se atingir o pico do transiente [Ca2+]i e o tempo para 50% de decaimento do [Ca2+]i nos animais Trpa1 KO 30oC quando comparados ao WT 30oC; os cardiomiócitos dos ventrículos dos grupos WT 30oC e Trpa1 KO 22oC apresentaram maior tempo para o pico de contração e para 50% do relaxamento celular, em comparação às células dos átrios; além disso, os miócitos cardíacos dos ventrículos do grupo Trpa1 KO 30oC apresentaram maior tempo para 50% do relaxamento e para o tempo para o pico do transiente [Ca2+]i, em relação às células atriais. Em suma, os achados envolvendo os estudos com cardiomiócitos isolados sugerem que a aclimatação ao frio moderado induz modificações no padrão de contração celular possivelmente como uma tentativa de se aumentar o débito cardíaco, em uma resposta termorreguladora.Cardiovascular diseases represent one of the conditions with the highest mortality rate, with an increased incidence in the cold season. It is suggested that the TRPA1 channel, present in the heart, plays a role in the development and progression of several conditions, including cold hypertension. Given this, it becomes necessary to understand the basic physiology of TRPA1 channels in association with mild cold. Therefore, the aim of the present study was to evaluate the effects of acclimatization to moderate cold challenge on contractility and intracellular calcium transient ([Ca2+]i) in the heart of C57BL/6J wild- type mice and Trpa1 channel knockouts. The experiments were conducted in male mice (45 to 52 days old; C57BL/6J and TrpA1 KO in C57BL/6J background). The animals were kept at 30oC for 15 days (adaptation) and, after the groups were divided, they were acclimatized for another 15 days at the predefined temperature (30oC or 22oC), totaling 30 days of experiment (adaptation + treatment). The animals were randomly divided into groups: WT 22°C, WT 30°C, TrpA1 KO 22°C, TrpA1 KO 30°C (n=10 each group). After the intervention period, euthanasia and collection of hearts were performed. Cardiomyocytes from the animals (ventricles and atria) were isolated (enzymatic dispersion) for recording contractility and transient [Ca2+]i. A greater amplitude of contraction was verified in all animals submitted to the moderate cold challenge; increase in the time of contraction and relaxation in the animals of the Trpa1 KO 22oC group in relation to the Trpa1 KO 30oC animals and the WT 22oC animals; no change in the amplitude of the [Ca2+]i transient, but it was possible to observe longer times to reach the peak of the [Ca2+]i transient and the time for 50% [Ca2+]i decay in Trpa1 KO 30oC animals when compared to WT 30oC; cardiomyocytes from the ventricles of the WT 30oC and Trpa1 KO 22oC groups showed a longer time for the peak of contraction and for 50% of cell relaxation, compared to the cells of the atria; in addition, cardiac myocytes from the ventricles of the Trpa1 KO 30oC group showed a longer time for 50% relaxation and for the time for the [Ca2+]i transient peak, in relation to atrial cells. In summary, the findings involving studies with isolated cardiomyocytes suggest that acclimatization to moderate cold induces changes in the pattern of cellular contraction, possibly as an attempt to increase cardiac output, in a thermoregulatory response.Isoldi, Mauro CésarCastrucci, Ana Maria de LauroIsoldi, Mauro CésarNatali, Antonio JoseReis, Emily Correna CarloSilva, Andre Talvani Pedrosa daSouza, Gabriela Guerra Leal deMiranda, Denise Coutinho de2024-10-02T17:34:47Z2024-10-02T17:34:47Z2023info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfMIRANDA, Denise Coutinho De. Efeitos da aclimatação ao desafio frio moderado sobre a contratilidade e o cálcio intracelular transiente em cardiomiócitos de camundongos C57BL/6J selvagens e knockouts para o canal Trpa1. 2023. 90 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2023.https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/18707Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 United Stateshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 19/07/2023 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. 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