Caracterização de fatores de virulência em amostras de Escherichia coli isoladas de lagoas do parque estadual do Rio Doce, Minas Gerais.

• Autor(a) principal: Melo, Syomara Ker de
• Data de Publicação: 2006
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFOP
• Texto Completo: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2286
• topic: Ecologia; Água - qualidade - Minas Gerais; Virulência - microbiologia; Escherichia coli; Parque Estadual do Rio Doce - Minas Gerais

Os coliformes fecais cujo principal representante é a Escherichia coli fazem parte da microbiota intestinal do homem e outros animais de sangue quente, estes microrganismos têm sido extensivamente utilizados no monitoramento da qualidade de águas e quando detectados em corpos d´água indicam a possível presença de contaminação fecal recente, e consequentemente, a presença de patógenos entéricos. Além das linhagens comensais, várias grupos patogênicos distintos de E. coli diarreiogênicas são reconhecidos: E. coli enteropatogênica (EPEC), E. coli enterotoxigênica (ETEC), E. coli enterohemorrágica ou Produtora de Toxina Shiga (EHEC/STEC), E. coli enteroinvasora (EIEC), E. coli enteroagregativa (EAEC), E. coli difusamente aderente (DAEC). As linhagens patogênicas de E. coli causadoras de infecções intestinais possuem numerosos fatores de virulência localizados em cromossomos, plasmídios ou DNAs de bacteriófagos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi determinar a freqüência de ocorrência e os fatores de virulência de amostras de Escherichia coli isoladas em lagoas do Parque Estadual do Rio Doce - MG (PERD - MG). As coletas foram realizadas mensalmente entre Maio de 2004 e Fevereiro de 2005 nas lagoas Carioca, Jacaré, Gambazinho e Dom Helvécio. Utilizando a Técnica de Tubos Múltiplos verificou-se que as lagoas amostradas apresentaram baixas contagens para coliformes fecais na maioria das amostras analisadas. A densidade de coliformes fecais variou significativamente (E. coli F= 2,11; p = 0,035) apenas em relação aos meses de coleta. Um total de 456 (89,94%) das linhagens ambientais isoladas foram positivas em relação às provas bioquímicas específicas para a identificação da espécie Escherichia coli. A técnica de PCR foi utilizada para detecção dos genes de virulência stx1 e stx2 de EHEC, eae de EPEC e eltI de ETEC. O gene stx2 foi detectado em cinco linhagens de E. coli ambas isoladas das lagoas Carioca e Jacaré. Nenhum dos 80 isolados de E. coli investigados apresentou o fragmento de DNA correspondente ao gene stx1. Para o gene eae e elt I, apenas os isolados E. coli 373 (C LT) e E. coli 58 (C LT) respectivamente, amplificaram o fragmento de gene de interesse. Pela técnica de aglutinação em lâmina 61,3% dos isolados de E. coli aglutinaram na presença de soro específico para EPEC clássica, 18,2% das linhagens aglutinaram para o sorotipo O157: H7 x de EHEC e 20,5% aglutinaram na presença do soro específico de EIEC. Na caracterização fenotípica do sorotipo O157: H7, cinco isolados de E. coli ambientais não fermentaram o sorbitol e apenas dois não fermentaram a ramnose. Altas frequências de linhagens de E. coli resistentes à ampicilina (20%), cefalotina (50%) e cefuroxima (14%) foram verificadas, para os demais antibióticos testados a resistência quando verificada ocorreu em menos de 10% dos isolados. Todos os lagos amostrados apresentaram níveis de coliformes fecais abaixo dos valores permitidos pela resolução do CONAMA, para balneabilidade. Por outro lado, a presença de genes de virulência nas linhagens de E. coli analisadas sugere que existe a probabilidade dos banhistas adquirirem doença gastrointestinal transmitida pelas águas dos lagos investigados. A Técnica de Aglutinação em Lâmina, específica para determinados sorogrupos nem sempre correlaciona com a patogenicidade da linhagem e a discriminação de subgrupos de EPEC, ETEC, EHEC e EIEC requer a utilização de técnicas moleculares baseadas em genes de virulência. Alta incidência de isolados de E. coli multi-resistentes a antibióticos indicam a possível disseminação de linhagens resistentes pelos banhistas e animais, e também um risco para saúde dos mesmos. Os dados obtidos no presente estudo podem contribuir para manter o equilíbrio dos ecossistemas estudados e ampliar o estudo da ecologia da espécie E. coli considerando o isolamento dos subtipos no meio ambiente. ____________________________________________________________________________________________________