Avaliação de métodos de preparação de amostras utilizados em bioensaios

• Autor(a) principal: Muniz, Vanessa Morais
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPB
• Texto Completo: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/123456789/1011
• topic: CNPQ:: Ciências a Saúde: Farmárcia; Extração; Matriz biológica; Preparação de amostra

A análise de material biológico é de grande interesse para várias áreas, incluindo o campo farmacêutico. Nestas análises são feitas a detecção e/ou quantificação de substâncias de interesse, que são os analitos e/ou biomarcadores. As matrizes biológicas são altamente complexas e possuem componentes endógenos ou exógenos, que podem interferir na busca pelo analito de interesse. Os efeitos causados pelos compostos interferentes são chamados de efeitos de matriz, e podem ser driblados ou amenizados por meio de técnicas de preparação de amostras. Por causa disso, são realizadas técnicas de extração, na tentativa de eliminar os componentes que causam o efeito de matriz, tornando a amostra adequada para a realização da análise do composto de interesse. É uma etapa demorada e determinante, que deve ser escolhida de acordo com alguns critérios relacionados à amostra, ao analito e às técnicas cromatográficas. Cada tipo de matriz possui componentes diferentes e devem ser preparadas também de acordo com os tipos de interferentes de cada. Neste trabalho, foi feita a análise de 22 artigos e foi extraído deles informações como: matriz biológica utilizada, técnica de extração, método cromatográfico, limite de detecção, limite inferior de quantificação (LOD e LIQ), recuperação e coeficiente de correlação. As matrizes biológicas mais utilizadas são sangue e urina. As técnicas mais comuns são a extração líquido-líquido (LLE), extração em fase sólida (SPE), precipitação de proteínas (PPT), microextração em fase sólida (SPME) e microextração em fase líquida (LPME). Dentre elas, a mais utilizada nos trabalhos foi a SPE, presente em 8 artigos, dos 22. A SPE provou ser o mais eficaz para a extração de matrizes biológicas, com valores de LIQ e LOD satisfatórios, como exemplo LIQ: 0,3 pg/mL e LOD: 2,5 pg/mL. Alguns artigos apresentaram outros tipos de técnicas de preparação, menos usadas ou mais sofisticadas, como por exemplo a técnica de RAM (material de acesso restrito), presente em 4 artigos. Alguns parâmetros são utilizados para a otimização do processo, como a agitação, o aumento da temperatura, a adição de sal, o uso de alta pressão e a escolha do solvente ideal. Todos os métodos de extração provaram eficácia na eliminação de interferentes, visto a análise dos valores de LIQ e LOD, com valores satisfatórios, os valores de coeficiente de correlação, todos próximos de 1, provam a confiabilidade das análises. Além dos altos valores de recuperação, exceto nos dois trabalhos em que o método de extração selecionado foi o LLE, que mostraram baixos valores de recuperação (45,1 e 60%). Cada análise deve ser avaliada separadamente, de acordo com as suas características, para a escolha do método de extração ideal.