Avaliação do potencial antifúngico de extratos de plantas medicinais frente a isolados clínicos de Candida

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: BOMFIM, Flávio dos Santos
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32266
Resumo: As plantas utilizadas na medicina popular vêm sendo estudadas devido as suas propriedades terapêuticas. Diversos estudos comprovam que a biodiversidade vegetal possui compostos promissores na produção de novos fármacos, principalmente nas espécies vegetais do Nordeste Brasileiro. Com o rápido surgimento de resistência de microrganismos, diante disso a busca por novos agentes terapêuticos eficazes tem se tornado uma alternativa favorável no combate às doenças causadas por fungos, principalmente espécies Candida sp. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo extrair, caracterizar, isolar e purificar metabólitos bioativos de plantas medicinais utilizadas no estado de Pernambuco e avaliar seu potencial antifúngico in vitro e in vivofrente cepas de Candida sp. Foram utilizados cinco extratos de plantas medicinais obtidos a partir de extratos das folhas de Eugenia uniflora L., Psidium guajava L., e Persea americana Mill. e cascas do caule de Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) e Schinus terebinthifolius Raddi. Posteriormente, foi avaliada a atividade antifúngica dessesfrente a cinco espécies de Candida: C. albicans 12680, C. tropicalis 10660, C. krusei 14206, C. glabrata14188, C.guilliermondii 14495 e um isolado de referência C.parapsilosis ATCC 22019, para a determinação da concentração inibitória mínima, de acordo com o protocolo do CLSI(M27-A3). Para critério de comparação do potencial antifúngico foram utilizados os fármacos anfotericina B (Bristol-Myers Squibb) e fluconazol. Os extratos bioativos foram testados isoladamente e em conjunto para verificação do sinergismo que foi procedido conforme o método de Checkerboard. A atividade antifúngica in vivo foi realizada de acordo com o modelo de infecção experimental de candidíase sistêmica, em cinco grupos com oito ratos Wistar. Após a realização dos testes foi verificado que o extrato acetato aquoso (Act/Aq) de E. uniflora apresentou a melhor concentração inibitória, variando de 4μg.mL⁻¹ a 32μg.mL⁻¹, seguido peloAct/Aq da P. americana com a CIM variando de 32μg.mL⁻¹ a 128μg.mL⁻¹. Também para P. guajava e S. terebinthifolius foram obtidas CIM de 32μg.mL⁻¹ a 256μg.mL⁻¹ e 32μg.ml⁻¹ a 1024μg.mL⁻¹ respectivamente, sendo necessário a continuação do estudo de purificação e elucidação estrutural dos compostos presentes, a fim de verificar se a ação antifúngica encontrada poderá ser atribuída a um composto específico ou depende de algum mecanismo sinérgico da mistura de polifenóis. Diante dos resultados podemos concluir que o extrato Act/Aq de E. uniflora possui promissora ação antifúngica. Candidemia experimental mostrou que o extrato de E. uniflora apresenta uma resposta terapêutica mais efetiva ao fluconazol além de não haver toxicidade aguda relatada in vivo.
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Desta forma, o presente estudo teve como objetivo extrair, caracterizar, isolar e purificar metabólitos bioativos de plantas medicinais utilizadas no estado de Pernambuco e avaliar seu potencial antifúngico in vitro e in vivofrente cepas de Candida sp. Foram utilizados cinco extratos de plantas medicinais obtidos a partir de extratos das folhas de Eugenia uniflora L., Psidium guajava L., e Persea americana Mill. e cascas do caule de Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) e Schinus terebinthifolius Raddi. Posteriormente, foi avaliada a atividade antifúngica dessesfrente a cinco espécies de Candida: C. albicans 12680, C. tropicalis 10660, C. krusei 14206, C. glabrata14188, C.guilliermondii 14495 e um isolado de referência C.parapsilosis ATCC 22019, para a determinação da concentração inibitória mínima, de acordo com o protocolo do CLSI(M27-A3). Para critério de comparação do potencial antifúngico foram utilizados os fármacos anfotericina B (Bristol-Myers Squibb) e fluconazol. Os extratos bioativos foram testados isoladamente e em conjunto para verificação do sinergismo que foi procedido conforme o método de Checkerboard. A atividade antifúngica in vivo foi realizada de acordo com o modelo de infecção experimental de candidíase sistêmica, em cinco grupos com oito ratos Wistar. Após a realização dos testes foi verificado que o extrato acetato aquoso (Act/Aq) de E. uniflora apresentou a melhor concentração inibitória, variando de 4μg.mL⁻¹ a 32μg.mL⁻¹, seguido peloAct/Aq da P. americana com a CIM variando de 32μg.mL⁻¹ a 128μg.mL⁻¹. Também para P. guajava e S. terebinthifolius foram obtidas CIM de 32μg.mL⁻¹ a 256μg.mL⁻¹ e 32μg.ml⁻¹ a 1024μg.mL⁻¹ respectivamente, sendo necessário a continuação do estudo de purificação e elucidação estrutural dos compostos presentes, a fim de verificar se a ação antifúngica encontrada poderá ser atribuída a um composto específico ou depende de algum mecanismo sinérgico da mistura de polifenóis. Diante dos resultados podemos concluir que o extrato Act/Aq de E. uniflora possui promissora ação antifúngica. Candidemia experimental mostrou que o extrato de E. uniflora apresenta uma resposta terapêutica mais efetiva ao fluconazol além de não haver toxicidade aguda relatada in vivo.The plants used in popular medicine have been studied due their therapeutic properties. Several studies show that vegetal biodiversity has promising compounds in the production of new drugs, mainly in the vegetal species of the Brazilian northeast. With the fast emergence of micro-organisms resistance, the search for new effective therapeutic agents has become a favorable alternative in the fight against diseases caused by fungi, mainly Candida sp species. Thus, the Objective of this study is to perform a screening of plant extracts in medicinal plants of the Brazilian northeast, and to evaluate its antifungal potential ahead of the clinical isolates of Candida sp. Methods were used in five medicinal plants, from Leaves Extracts of Eugenia unifloraL., Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.), barks stalk of Ferra (Mart. exTul.), Schinus terebinthifolius Raddi., leaves of Psidiumguajava L., and Persea american Mill. In contrast of fiv especies of Candida: C. albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. glabrata, C. guilliermondii and an isolate reference of C. parapsilosis ATCC 22019, for the determination of the minimum inhibitory concentration, according to the document M27-A3. The commercially available antifungals evaluated were amphotericin B (Bristol-Myers Squibb) diluted in DMSO and fluconazol ediluted in water. The synergism test was followedby the Checkerboard method. The antifungal activity in vivo was performed according to the experimental infection model of systemic candidiasis, in Five groups with eight Wistar mice. Results the aqueous acetate extract (ACT/Aq) E. was the Best inhibitory concentration, ranging from 4 mg. mL⁻¹ to 32 mg. mL⁻¹, followed by P. american Extract Act/Aqcomto CIM varying de32 μ g. mL⁻¹ to 128 mg. mL⁻¹. Also for P. guajava and S. terebinthifolius the extra cthad CIM' swith 32 mg. mL⁻¹ to 256 mg. mL⁻¹ and 32 mg/mL⁻¹ to 1024 μg. mL⁻¹ respectively, beingnecessaryto continue the study of purification and structural elucidation of the present compounds in order to verify the Fungal action found could be attributed to a specific compound or depends on some synergic mechanism of mixing polyphenols. Conclusion: E. uniflora has promising antifungal action. Experimental candidemia showed that the extract of E. uniflorahas a more effective therapeutic response to the fluconazole further more thereis no acute toxicity reported in vivo.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Inovacao TerapeuticaUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessPlantas medicinaisAgentes antifúngicosCandidíaseAvaliação do potencial antifúngico de extratos de plantas medicinais frente a isolados clínicos de CandidaAvaliação do potencial antifúngico de extratos de plantas medicinais utilizadas em Pernambuco contra isolados de Candida patogênicos a humanosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPETHUMBNAILTESE Flávio dos Santos Bomfim.pdf.jpgTESE Flávio dos Santos Bomfim.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1200https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/32266/5/TESE%20Fl%c3%a1vio%20dos%20Santos%20Bomfim.pdf.jpg31a39e877ab4bf6081d25f43ae28e133MD55ORIGINALTESE Flávio dos Santos Bomfim.pdfTESE Flávio dos Santos Bomfim.pdfapplication/pdf1206610https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/32266/1/TESE%20Fl%c3%a1vio%20dos%20Santos%20Bomfim.pdff098cdb0a82008eab8ced4aaa64d62b7MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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