Lipossomas na criopreservação de sêmen de suínos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Schmitt, Cléderson Idênio
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/11858
Resumo: No Brasil, a inseminação artificial, representa 95% dos acasalamentos, sendo que mais de 99% são realizadas com sêmen refrigerado a 17°C, por causa o processo de criopreservação ocasiona diversos danos aos espermatozoides. Tais como, maior desidratação celular, decorrente da remoção de moléculas polares dos fosfolipídios, acarretando em alterações de funcionalidade. Com isso, pesquisas apontam que manter o sêmen diluído por até 24 horas a uma temperatura acima de 15°C é benéfico ao espermatozoide. Além disso, estudos apontam que acrescentar lipossomas ao diluente durante o processo de criopreservação, proporciona uma maior resistência dos espermatozoides ao frio. Por isso os objetivos desse estudo foram: a) avaliar a citotoxicidade do lipossoma comercial S100 com 98% de fosfatidilcolina em células espermáticas de suínos; b) avaliar do lipossoma comercial S45 junto a diluente de refrigeração em células espermáticas de suínos armazenadas a 17°C e 5°C. No primeiro estudo, foi avaliado a citotoxicidade do lipossoma comercial S100, fabricado pelo processo de injeção de etanol, com 98% de fosfatidilcolina comercial Lipoid GmbH (Alemanha), sendo acrescentados ao diluente plasma lactose, sendo testadas quatro diluições a 5°C e a 17°C de resfriamento por até quatro dias. No segundo estudo, foi avaliar a adição do lipossoma comercial S45, produzido com lecitinas de soja desengorduradas com >45% m/m fosfatidilcolina, 10–18% m/m fosfatidiletanolamina, <4% m/m lisofosfatidilcolina e <3% m/m triacilgliceróis, junto a diluente de refrigeração no processo hoilding time por até 72h a 17°C e a 5°C. Em ambos estudos se utilizou células espermáticas de dez machos diferentes (~ 80mL com ~2,6 bilhões de espermatozoides, cada dose) da mesma linhagem, mantidos em baias individuais e recebendo a mesma ração. Além disso, em ambas pesquisas, usou-se quatro diluições de lipossomas (5nM, 3,75nM, 2,5nM, 1,25nM e 0nM), avaliou-se a cinética espermática pelo sistema automatizado CASA, avaliando MT, MP, VCL, VSL, VAP, STR, LIN, WOB, BCF, ALH, DCL, DSL, DAP. A partir dos resultados, notou-se que no primeiro estudo, o lipossoma S100 apresenta uma alta citotoxicidade em todas a concentrações avaliadas, principalmente quando se armazena as células espermáticas a 5°C, e quando armazenadas a 17°C a concentração de 1,25nM. No segundo estudo, os resultados demonstraram que o armazenamento a 17°C com a adição de lipossomas proporcionou ganho na cinética espermática, e as doses armazenadas a 5°C, com a adição de lipossomaspermaneceram viáveis por 24h de armazenamento. Assim conclui-se que o uso do lipossoma S45 pode ser viável no processo de criopreservação do sêmen suíno por proporciona uma melhora nos resultados dos parâmetros da cinética espermática. E uso de lipossomas com alta concentração de fosfatidilcolina, como o caso do lipossoma S100, é citotóxico para as células espermáticas de suínos, devendo ser evitado o seu uso.
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spelling 2024-01-30T18:14:24Z2024-01-302024-01-30T18:14:24Z2023-02-15SCHMITT, Cléderson Idênio. Lipossomas na criopreservação de sêmen de suínos. 2023. 94 f. Tese (Doutorado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2023.http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/11858No Brasil, a inseminação artificial, representa 95% dos acasalamentos, sendo que mais de 99% são realizadas com sêmen refrigerado a 17°C, por causa o processo de criopreservação ocasiona diversos danos aos espermatozoides. Tais como, maior desidratação celular, decorrente da remoção de moléculas polares dos fosfolipídios, acarretando em alterações de funcionalidade. Com isso, pesquisas apontam que manter o sêmen diluído por até 24 horas a uma temperatura acima de 15°C é benéfico ao espermatozoide. Além disso, estudos apontam que acrescentar lipossomas ao diluente durante o processo de criopreservação, proporciona uma maior resistência dos espermatozoides ao frio. Por isso os objetivos desse estudo foram: a) avaliar a citotoxicidade do lipossoma comercial S100 com 98% de fosfatidilcolina em células espermáticas de suínos; b) avaliar do lipossoma comercial S45 junto a diluente de refrigeração em células espermáticas de suínos armazenadas a 17°C e 5°C. No primeiro estudo, foi avaliado a citotoxicidade do lipossoma comercial S100, fabricado pelo processo de injeção de etanol, com 98% de fosfatidilcolina comercial Lipoid GmbH (Alemanha), sendo acrescentados ao diluente plasma lactose, sendo testadas quatro diluições a 5°C e a 17°C de resfriamento por até quatro dias. No segundo estudo, foi avaliar a adição do lipossoma comercial S45, produzido com lecitinas de soja desengorduradas com >45% m/m fosfatidilcolina, 10–18% m/m fosfatidiletanolamina, <4% m/m lisofosfatidilcolina e <3% m/m triacilgliceróis, junto a diluente de refrigeração no processo hoilding time por até 72h a 17°C e a 5°C. Em ambos estudos se utilizou células espermáticas de dez machos diferentes (~ 80mL com ~2,6 bilhões de espermatozoides, cada dose) da mesma linhagem, mantidos em baias individuais e recebendo a mesma ração. Além disso, em ambas pesquisas, usou-se quatro diluições de lipossomas (5nM, 3,75nM, 2,5nM, 1,25nM e 0nM), avaliou-se a cinética espermática pelo sistema automatizado CASA, avaliando MT, MP, VCL, VSL, VAP, STR, LIN, WOB, BCF, ALH, DCL, DSL, DAP. A partir dos resultados, notou-se que no primeiro estudo, o lipossoma S100 apresenta uma alta citotoxicidade em todas a concentrações avaliadas, principalmente quando se armazena as células espermáticas a 5°C, e quando armazenadas a 17°C a concentração de 1,25nM. No segundo estudo, os resultados demonstraram que o armazenamento a 17°C com a adição de lipossomas proporcionou ganho na cinética espermática, e as doses armazenadas a 5°C, com a adição de lipossomaspermaneceram viáveis por 24h de armazenamento. Assim conclui-se que o uso do lipossoma S45 pode ser viável no processo de criopreservação do sêmen suíno por proporciona uma melhora nos resultados dos parâmetros da cinética espermática. E uso de lipossomas com alta concentração de fosfatidilcolina, como o caso do lipossoma S100, é citotóxico para as células espermáticas de suínos, devendo ser evitado o seu uso.In Brazil, artificial insemination represents 95% of mating, and more than 99% are performed with semen refrigerated at 17°C, because the cryopreservation process causes various damage to spermatozoa. Such as, greater cellular dehydration, resulting from the removal of polar molecules from phospholipids, resulting in changes in functionality. With this, pesquisas point out that keeping the semen diluted for up to 24 hours at a temperature above 15°C is beneficial to sperm. In addition, studies indicate that adding liposomes to the diluent during the cryopreservation process provides greater resistance of sperm to cold. Therefore, the objectives of this study were: a) to value the cytotoxicity of commercial liposome S100 with 98% phosphatidylcholine in swine spermatic cells; (b) evaluate of commercial liposome S45 with refrigeration diluent in swine swine cells stored at 17°C and 5°C. In the first study, the cytotoxicity of the commercial liposome S100, manufactured by the ethanol injection process, with 98% of commercial phosphatidylcholine Lipoid GmbH (Germany), was evaluated, being added to the plasma lactose diluent, being tested four dilutions at 5°C and 17°C of cooling for up to four days. In the second study, we evaluated the addition of commercial liposome S45, produced with defatted soy lecithin with >45% m/m phosphatidylcholine, 10–18% m/m phosphatidyllectolamine, <4% m/m lysophosphatidylcholine and <3% m/m triacylglycerols, along with the cooling diluent in the holding time process for up to 72h to 17°C and 5°C. In both studies, sperm cells of ten different males (~ 80mL with ~2.6 billion sperm, each dose) of the same lineage, kept in individual stalls and receiving the same ration, were used. In addition, in both studies, four dilutions of liposomes (5nM, 3.75nM, 2.5nM, 1.25nM and 0nM) were used, the spermatic kinetics was evaluated by the automated CASA system, evaluating MT, MP, VCL, VSL, VAP, STR, LIN, WOB, BCF, ALH, DCL, DSL, DAP. From the results, it was observed that in the first study, the liposome S100 presents a high cytotoxicity in all concentrations evaluated, especially when storing the spermatic cells at 5°C, and when stored at 17°C the concentration of 1.25nM. In the second study, the results showed that storage at 17°C with the addition of liposomes provided gain in sperm kinetics, and doses stored at 5°C, with the addition of liposomes remained viable for 24 h of storage. Thus, it is concluded that the use of liposome S45 may be feasible in the cryopreservation process of swine semen by providing an improvement in the results of the parameters of the kinetic spermatids. And use of liposomes with high concentration of phosphatidylcholine, as the case of liposome S100, is cytotoxic to use.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS AGRARIASMEDICINA VETERINARIAREPRODUCAO ANIMALCriopreservaçãoLipossomaHolding timeSuínoFosfatidilcolinaCryopreservationLiposomePigPhosphatidylcholineLipossomas na criopreservação de sêmen de suínosLiposomes in sperm semen cryopreservation pigsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttps://orcid.org/0000-0001-7948-9627http://lattes.cnpq.br/4431573159859934https://orcid.org/0000-0001-5683-7801http://lattes.cnpq.br/7340307576119827Corcini, Carine DahlSchmitt, Cléderson Idênioreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALtese_clederson_schmitt.pdftese_clederson_schmitt.pdfapplication/pdf780560http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/11858/1/tese_clederson_schmitt.pdfc18f2238b8ad6a2ad502ed9a622ea0d2MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81960http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/11858/2/license.txta963c7f783e32dba7010280c7b5ea154MD52open accessTEXTtese_clederson_schmitt.pdf.txttese_clederson_schmitt.pdf.txtExtracted texttext/plain202074http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/11858/3/tese_clederson_schmitt.pdf.txte6984d05aa938cd2370ec6e949e549caMD53open accessTHUMBNAILtese_clederson_schmitt.pdf.jpgtese_clederson_schmitt.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1199http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/11858/4/tese_clederson_schmitt.pdf.jpg915a8d8a4b73d34a12b261bbeb7ac988MD54open accessprefix/118582024-01-31 03:01:50.647open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br: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Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2024-01-31T06:01:50Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false
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