Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Luz, Bruna Montes, 1992-
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/59032
Resumo: Orientadora: Profa. Dra. Leda Satie Chubatsu
id UFPR_3fbb969b8bcf7803e55d532911cb7532
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/59032
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Luz, Bruna Montes, 1992-Chubatsu, Leda Satie, 1966-Santos, Marcelo Muller dosUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)2019-04-08T18:26:32Z2019-04-08T18:26:32Z2018https://hdl.handle.net/1884/59032Orientadora: Profa. Dra. Leda Satie ChubatsuCoorientador: Prof. Dr. Marcelo Müller dos SantosDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa : Curitiba, 29/11/2018Inclui referências: p.80-89Resumo: O polihidroxibutirato (PHB) é um poliéster sintetizado por diversas espécies de micro-organismos. Acredita-se que sua síntese e acúmulo façam parte de uma estratégia de estocagem de carbono e energia para as células bacterianas. Além disso, a presença de PHB tem sido correlacionada a maior capacidade bacteriana em resistir a diferentes estresses, incluindo limitação de nutrientes e exposição à irradiação UV e peróxido de hidrogênio. O objetivo do presente trabalho foi determinar alterações decorrentes da deficiência na síntese de PHB na bactéria diazotrófica Azospirillum brasilense. Neste estudo foi utilizada uma estirpe mutante contendo uma inserção no gene que codifica para a enzima PHB sintase (mutante phbC). Foram observadas diferenças no crescimento da estirpe mutante phbC em cultivo em baixas concentrações de amônio e em glutamato quando comparadas à estirpe selvagem FP2. A partir de uma complementação plasmidial do gene phbC a produção de PHB no mutante phbC foi retomada e a aparência das colônias tornouse igual àquela da estirpe selvagem. Entretanto, a estirpe complementada apresentou uma menor taxa de crescimento provavelmente decorrente da maior síntese de PHB. Foi observado que a estirpe mutante phbC apresentou atividade de nitrogenase e regulação pós-traducional da glutamina sintetase semelhante à estirpe selvagem. Genes envolvidos no metabolismo de nitrogênio e na fixação de nitrogênio não tiveram alterações na sua expressão, mas aqueles envolvidos no metabolismo de PHB parecem ser menos expressos no mutante phbC. Nossos resultados indicam que a deficiência na produção de PHB em A. brasilense interfere de forma diferente no metabolismo quando comparado a outras bactérias produtoras de PHB. Palavras-chave: Polihidroxibutirato. Azospirillum brasilense. PHB sintase.Abstract: Polyhydroxybutyrate (PHB) is a polyester polymer synthesized by several species of microorganisms. This polymer is accumulated as intracellular insoluble granules and acts as a carbon and energy sink in bacterial cells. In addition, PHB has been correlated with increased bacterial capacity to withstand different stresses, including nutrient limitation and exposure to UV irradiation and hydrogen peroxide. The objective of the present work was to determine alterations caused by the deficiency in PHB synthesis in the diazotrophic bacterium Azospirillum brasilense. In this study, a mutant strain (phbC mutant) containing an insertion in the gene coding for the PHB synthase enzyme was used. Differences in growth of the phbC mutant strain in culture were observed at low concentrations of ammonium and glutamate when compared to wild type strain FP2. Plasmid complementation of the phbC gene lead to production of PHB in the phbC mutant, and colonies of the complemented cells were similar to the wild type strain. However, the complemented strain showed a lower growth rate probably due to the higher synthesis of PHB. Results showed that the phbC mutant strain had nitrogenase activity and post-translational regulation of glutamine synthetase similar to those of the wild type strain. Genes involved in nitrogen metabolism and nitrogen fixation had no changes in their expression; however, genes involved in PHB metabolism appeared to have lower expression in the phbC mutant. Our results indicate that the deficiency in PHB production in A. brasilense interferes differently in the cell metabolism when compared to other PHB producing bacteria. Keywords: Polyhydroxybutyrate. Azospirillum brasilense. PHB synthase.89 p. : il.application/pdfPoliesteresBioquímicaAzospirillumCaracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilenseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - BRUNA MONTES LUZ.pdfapplication/pdf26961694https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/59032/1/R%20-%20D%20-%20BRUNA%20MONTES%20LUZ.pdf54495a93a6500be62055d53ce656978eMD51open access1884/590322019-04-08 15:26:32.444open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/59032Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082019-04-08T18:26:32Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
title Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
spellingShingle Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
Luz, Bruna Montes, 1992-
Poliesteres
Bioquímica
Azospirillum
title_short Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
title_full Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
title_fullStr Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
title_full_unstemmed Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
title_sort Caracterização do mutante phbC de Azospirillum brasilense
author Luz, Bruna Montes, 1992-
author_facet Luz, Bruna Montes, 1992-
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Chubatsu, Leda Satie, 1966-
Santos, Marcelo Muller dos
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)
dc.contributor.author.fl_str_mv Luz, Bruna Montes, 1992-
dc.subject.por.fl_str_mv Poliesteres
Bioquímica
Azospirillum
topic Poliesteres
Bioquímica
Azospirillum
description Orientadora: Profa. Dra. Leda Satie Chubatsu
publishDate 2018
dc.date.issued.fl_str_mv 2018
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2019-04-08T18:26:32Z
dc.date.available.fl_str_mv 2019-04-08T18:26:32Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/59032
url https://hdl.handle.net/1884/59032
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 89 p. : il.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/59032/1/R%20-%20D%20-%20BRUNA%20MONTES%20LUZ.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 54495a93a6500be62055d53ce656978e
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860313610452992

Registros relacionados