Efeito do metotrexato sobre o transporte mitocondrial de cálcio, a lançadeira malato-aspartato e alguns metabólitos de células HeLa

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bastos, Maria Teresa Cordeiro Cid
Data de Publicação: 1989
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/78382
Resumo: Orientadoras: Dra. Maria Lúcia Wambier Klüppel, Dra. Maria Benigna Martinelli de Oliveira
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spelling Bastos, Maria Teresa Cordeiro CidUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)Kluppel, Maria Lucia Wambier, 1946-Oliveira, Maria Benigna Martinelli de, 1951-20082022-09-16T18:01:40Z2022-09-16T18:01:40Z1989https://hdl.handle.net/1884/78382Orientadoras: Dra. Maria Lúcia Wambier Klüppel, Dra. Maria Benigna Martinelli de OliveiraDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 63-68Resumo: Estudou-se o efeito do MTX sobre o transporte mitocondrial de cálcio, usando-se mitocôndrias isoladas de fígado de rato. Em concentrações entre 0,4 e 1,6 umoles de MTX.mg-1 de proteína mitocondrial, observou-se redução do influxo e aumento do efluxo de Ca2+ , progressivos, de ate 20%. Ao ser avaliada a ação da droga sobre a lançadeira malato-aspartato, notou-se que a oxidação do malato, em mitocôndrias intactas de fígado de rato, foi 30% inibida durante os estados III o IV, em concentrações de MTX acima de 0,5 umoles.mg-1 de proteína mitocondrial. Os sistemas enzimáticos MDH/GOT e MDH purificada, foram 100% inibidos em concentrações de 0,5mM e 0,34mM de MTX, respectivamente. A MDH mitocondrial, na presença de FCCP e rotenona, mostrou-se 100% inibida pela droga em concentrações acima de 0.35 umoles de MTX.mg-1 de proteína mitocondrial. Em células HeLa, a lançadeira malato-aspartato foi avaliada através do acumulo de piruvato, proveniente da oxidação de lactato adicionado, na presença de inibidores da via glicolitica (fluoreto) e do ciclo de Krebs (malonato). O acúmulo de piruvato foi totalmente inibido pelo amino-oxiacetato, e 73% inibido na presença de rotenona, comprovando que celulas HeLa usam preferencialmente a lançadeira malato-aspartato para o transporte de equivalentes redutores para as mitocôndrias. O MTX (0,4mM) inibiu o acumulo de piruvato cm 44%, devido a sua ação sobre as enzimas 1.DH e MDH. Incubando-se por 30 minutos células HeLa com MTX (0,4mM), na presença de lmM de glucose, notou-se, em relação ao controle som droga: acumulo de ADP e diminuição de ATP, de 20%, com aumento da relação ADP/ATP; acumulo de NAD+ e decréscimo de NADH de 15%, com diminuição da razão NADH/NAD+ ; decréscimo de NADPH, de 14%, com redução da razão NADPH/NADP+ ; acumulo de 26% de piruvato, e decréscimo de 33% na produção de lactato, com diminuição da razão lactato/piruvato.68 p. : il., grafs.application/pdfDisponível em formato digitalTesesBioquímicaEfeito do metotrexato sobre o transporte mitocondrial de cálcio, a lançadeira malato-aspartato e alguns metabólitos de células HeLainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - MARIA TERESA CORDEIRO CID BASTOS.pdfapplication/pdf2990077https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/78382/1/D%20-%20MARIA%20TERESA%20CORDEIRO%20CID%20BASTOS.pdf6969e874d825b1a62bfbda82a37d5bd7MD51open access1884/783822022-09-16 15:01:40.989open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/78382Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-16T18:01:40Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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