Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/70043
Resumo: Orientadora: Vania Aparecida Vicente, Ph.D
id UFPR_bf05ea3189fcaabcca530f8a4d36b3f1
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/70043
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-Vicente, Vânia AparecidaGomes, Renata Rodrigues, 1981-Universidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia2021-03-25T22:59:46Z2021-03-25T22:59:46Z2018https://hdl.handle.net/1884/70043Orientadora: Vania Aparecida Vicente, Ph.DCoorientadora: Renata Rodrigues Gomes, Ph.DDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa : Curitiba, 25/05/2018Inclui referênciasResumo: As leveduras negras são fungos melanizados de grande diversidade morfológica pertencentes ao filo Ascomycota, subfilo Pezizomycotina; com a maioria das espécies incluídas nas ordens Chaetothyriales e Dothideales. A ordem Chaetothyriales possui cinco famílias: Chaetothyriaceae, Cyphellophoraceae, Epibryaceae, Herpotrichiellaceae e Trichomeriaceae. Sendo que na família Herpotrichiellaceae estão acomodadas os gêneros Exophiala, Rhinocladiella, Veronea, Capronia, Thysanorea, Dactylospora, Fonsecaea, Cladophialophora e Phialophora. Fonsecaea reconhecidos como agentes etiológicos prevalentes de infecções em humanos e animais. Entre elas a cromoblastomicose uma doença de implantação reconhecida por uma infecção cutânea, subcutânea de evolução crônica e múltiplas formas clínicas em humanos, caracterizada pela presença de corpos esféricos septados no tecido subcutâneo do hospedeiro, denominado de corpos muriformes. Da mesma forma, estas espécies têm sido relatadas como agentes causais da doença feohifomicose caracterizada clinicamente pelo aparecimento de lesões desde superficiais até sistêmicas, com presença de hifas nos tecidos de hospedeiros humanos e animais. A doença cromoblastomicose está principalmente associada ao trauma por fragmentos vegetais. Diversos estudo de isolamento tem sido realizados no sentido de elucidar os nichos e rotas de infecção da doença. Entretanto, o link entre o ambiente e as amostras clinicas ainda não está totalmente esclarecido. Assim, a obtenção de linhagens mutantes marcadas podem auxiliar em estudos de virulência, assim como nos estudos relacionados a investigação da rota de infeção destes agentes. Neste contexto, este estudo objetiva fornecer linhagens mutantes por transformação mediada por Agrobacterium (AMT) em espécies proximamente relacionada de Fonsecaea de origem clínica e ambiental. Na transformação mediada por Agrobacterium (AMT), o co-cultivo foi utilizado conídios de F. erecta e F. monophora com uma proporção de 1:1, 10:1 e 100:1 (Agrobacterium: conidia) a 28 °C por 72 horas. Os plasmideos pAD1625 e pCAMDsRed foram inseridos nos dois fungos. As proporções de 100:1 (Agrobacterium:conidia) geraram maior número de transformantes (F. monophora e F. erecta) do que as proporções 1: 1 ou 10: 1. F. monophora transformada com pCAMDsRed apresentou maior número de transformantes. O genoma de DNA do fungo avaliado e modificado aumentou a expressão do gene da higromicina indicado pela fluorescência vermelha moderada ou forte. As duas espécies estudadas apresentaram fluorescência vermelha dentro de B. gasipaes, principalmente no tecido da epiderme. Em síntese, este trabalho descreveu AMT de F. erecta e F. monophora com plasmídeo pCAMDsRed para estudar a interação entre plantas, fungos patogênicos e doenças, e com plasmídeos pAD1625 como um possível modelo para estudo de genes patogênicos.Abstract: Black yeasts are melanized fungi of morphological diversity belonging to the Ascomycota phylum, Pezizomycotina subphylum; with most of the species included in the orders Chaetothyriales and Dothideales. The Chaetothyriales order has five families: Chaetothyriaceae, Cyphellophoraceae, Epibryaceae, Herpotrichiellaceae, and Trichomeriaceae. In the Herpotrichiellaceae family, the genera Exophiala, Rhinocladiella, Veronea, Capronia, Thysanorea, Dactylospora, Fonsecaea, Cladophialophora, and Phialophora are accommodated. Fonsecaea are recognized as prevalent etiological agents of humans and animals infection such as chromoblastomycosis, an implantation disease recognized by a cutaneous and subcutaneous infection of chronic evolution and with multiple clinical forms in humans, characterized by the presence of spherical septate bodies into the subcutaneous tissue of the host tissues called as muriform cells. Likewise, the species have also been reported as causative agents of phaeohyphomycosis, a disease characterized clinically by superficial to systemic infection, with presence of hyphae inside the tissues of human and animal hosts. The Chromoblastomycosis disease is mainly associated to the trauma caused by plant fragments. However, the link between the environment and the clinical pictures is still not fully understood. Therefore, obtain target mutant strains would support the studies about virulence infection route of these agents. In this context, the aim of this study is to provide mutant strains by Agrobacterium-mediated transformation (AMT) in Fonsecaea sibling species obtained from the environmental and clinical source. In Agrobacterium-mediated transformation (AMT) the co-cultivation was utilized conidia of F. erecta and F. monophora with a ratio 1:1, 10:1 and 100:1 (Agrobacterium: conidia) at 28 °C by 72 hours. pAD1625 and pCAMDsRed plasmids were inserted into both fungi. The 100:1(Agrobacterium: conidia) ratios generated many numbers of transformant (F. monophora and F. erecta transformed) than 1:1 or 10:1 ratios. F. monophora transformed with pCAMDsRed showed higher number of transformations. The DNA genomic of fungus evaluated transformed were amplified the hygromycin gene, and expressed moderate or strong red fluorescence. The two species studied showed red fluorescence inside of B. gasipaes, mainly in the tissue of the epidermis. In summary, this work described AMT of F. erecta and F. monophora with the pCAMDsRed plasmid to study the interaction between plant and disease fungi, and pAD1625 as a possible model of deletion of pathogenic genes.84 p. : il. (algumas color.).application/pdfLevedurasCromoblastomicoseTransformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study modelinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - CRISTINA ISABEL FERRER VILLENA.pdfapplication/pdf5145396https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/70043/1/R%20-%20D%20-%20CRISTINA%20ISABEL%20FERRER%20VILLENA.pdfcfcb1facd017dffc476e71def6687b17MD51open access1884/700432021-03-25 19:59:46.697open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/70043Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082021-03-25T22:59:46Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
title Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
spellingShingle Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-
Leveduras
Cromoblastomicose
title_short Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
title_full Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
title_fullStr Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
title_full_unstemmed Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
title_sort Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens de Fonsecaea monophora e Fonsecaea erecta para modelo de estudo clínico : Transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens of the Fonsecaea monophora and Fonsecaea erecta for clinic study model
author Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-
author_facet Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Vicente, Vânia Aparecida
Gomes, Renata Rodrigues, 1981-
Universidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia
dc.contributor.author.fl_str_mv Villena, Cristina Isabell Ferrer, 1989-
dc.subject.por.fl_str_mv Leveduras
Cromoblastomicose
topic Leveduras
Cromoblastomicose
description Orientadora: Vania Aparecida Vicente, Ph.D
publishDate 2018
dc.date.issued.fl_str_mv 2018
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2021-03-25T22:59:46Z
dc.date.available.fl_str_mv 2021-03-25T22:59:46Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/70043
url https://hdl.handle.net/1884/70043
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 84 p. : il. (algumas color.).
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/70043/1/R%20-%20D%20-%20CRISTINA%20ISABEL%20FERRER%20VILLENA.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv cfcb1facd017dffc476e71def6687b17
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860498321309696

Registros relacionados