Investigação e caracterização de RNA dupla fita em Phyllosticta spinarum e Guignardia citricarpa

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Montenegro, Douglas Herrera
Data de Publicação: 2007
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/31701
Resumo: Orientador: Vanessa Kava-Cordeiro
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spelling Montenegro, Douglas HerreraUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasKava, Vanessa, 1968-2022-08-23T16:04:01Z2022-08-23T16:04:01Z2007https://hdl.handle.net/1884/31701Orientador: Vanessa Kava-CordeiroMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : Fungos são organismos que muitas vezes habitam os mais variados tecidos vegetais. Se há sintomas, os fungos são considerados fitopatogênicos. Se não, o fungo é endofítico. Os fungos utilizados neste trabalho foram isolados de plantas cítricas, como endofíticos (espécie Phyllosticta spinarum) ou causando a doença Mancha Preta de Citros (MPC) (espécie Guignardia citricarpa). Constatou-se que alguns isolados das espécies de P. spinarum e G. citricarpa apresentam RNA dupla fita (RNAdf) e os possíveis efeitos destes elementos na virulência ou outras alterações fenotípicas dos seus hospedeiros ainda são desconhecidos. Para entender estes efeitos, é necessária a obtenção de linhagens isogênicas, a mesma linhagem com e sem o RNAdf, pela cura destas partículas virais. Para isto, foram feitos experimentos de cura com linhagens das duas espécies infectadas com RNAdf envolvendo repiques sucessivos de pontas de hifas de colônias em tratamento com ciclohexamida e/ou temperatura moderadamente elevada (37ºC). Constatou-se que as concentrações de ciclohexamida utilizadas que variaram de 100 µg/mL até 0,5 µg/mL inibiram o crescimento total dos fungos das duas espécies, enquanto que o tratamento à 37ºC por duas gerações foi capaz de gerar alterações fenotípicas nas colônias de duas linhagens de P. spinarum, que levaram à formação de setores. Estes foram isolados e, após extração de ácidos nucléicos totais, foi confirmada a eliminação do RNAdf. Linhagens de G. citricarpa também foram submetidas a este tratamento e em uma colônia também houve alterações na morfologia, com a formação de setores. A confirmação da cura desta linhagem ainda está em andamento. Análises de RAPD ("Random Amplified Polymorphic DNA") foram feitas para comprovar a isogenia entre os setores formados (linhagens curadas) em P. spinarum e a linhagem original, com o RNAdf. Com os oligonucleotídeos iniciadores utilizados, não foi possível confirmar a isogenia das linhagens e seus setores curados, pois estas apresentaram padrões de bandas semelhantes, mas não idênticos, conforme o esperado em caso de isogenia. Novas extrações de ácidos nucléicos totais das linhagens originais e das curadas estão sendo feitas para serem utilizados nas próximas investigações do perfil de bandas por RAPD. Considerando que os setores curados tenham realmente uma mesma identidade biológica com a linhagem original, uma possível explicação para o observado é que eles, além de perderem RNAdf, também perderam outros elementos genéticos (mini-cromossomos) levando à um padrão de bandas diferente da linhagem com o RNAdf. Na literatura, estes elementos são descritos como não essenciais para a sobrevivência do fungo e são comuns em fungos fitopatogênicos, pois carregam genes responsáveis pelo processo de colonização das plantas.1 recurso online : PDF.application/pdfÁcido ribonucleicoGuignardia citricarpaFungosInvestigação e caracterização de RNA dupla fita em Phyllosticta spinarum e Guignardia citricarpainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Douglas Herrera Montenegro.pdfapplication/pdf1436297https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31701/1/Monografia%20Douglas%20Herrera%20Montenegro.pdfd24d4b4e1598ad067107f6c80da178a0MD51open accessTEXTMonografia Douglas Herrera Montenegro.pdf.txtExtracted Texttext/plain76695https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31701/2/Monografia%20Douglas%20Herrera%20Montenegro.pdf.txt1f58d27dafa294de0e66fc8fdae75708MD52open accessTHUMBNAILMonografia Douglas Herrera Montenegro.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1240https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31701/3/Monografia%20Douglas%20Herrera%20Montenegro.pdf.jpgd268861a9b32d629e81f7a3e84a0f2afMD53open access1884/317012022-08-23 13:04:01.178open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/31701Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-08-23T16:04:01Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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