Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ribeiro, Rômulo Pereira
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/63469
Resumo: Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo
id UFPR_ef766e583cbde958ffdf90104f8e9770
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/63469
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Ribeiro, Rômulo PereiraGasparetto, João CleversonUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências FarmacêuticasPontarolo, Roberto, 1954-2020-07-16T19:06:27Z2020-07-16T19:06:27Z2014https://hdl.handle.net/1884/63469Orientador : Prof. Dr. Roberto PontaroloCoorientador: Prof. Dr. João Cleverson GasparettoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 25/02/2014Inclui referênciasÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: No presente trabalho foi desenvolvido e validado um método para quantificação simultânea de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-O-metildopa e dopamina em plasma, através de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas sequencial (CLAE-EM/EM). A fonte de ionização por electrospray (ESI) operada no modo positivo de ionização foi o mecanismo mais eficiente para ionizar os compostos de interesse. Na cromatografia, foi utilizada uma coluna XBridge C8 (150 x 4,6 mm com tamanho de partícula de 5 ?m) mantida a 30 ºC. A fase móvel foi composta de um gradiente entre água e acetonitrila:metanol (90:10, v/v) ambos contendo 0,1% de ácido fórmico. A extração dos analitos foi realizada por meio da precipitação de proteínas com acetonitrila contendo 0,1% de ácido fórmico. Dados da validação demonstraram que o método é seletivo e não sofre efeito residual e de matriz. O método foi considerado sensível por apresentar baixos limites de detecção (5 ng/mL para levodopa; 7 ng/mL para a carbidopa; 1 ng/mL para entacapona; 1,5 ng/mL para tolcapona; 2,5 ng/mL para 3-O-metildopa; 1,25 ng/mL para dopamina) e baixos limites de quantificação (20 ng/mL para levodopa; 30 ng/mL para a carbidopa; 5 ng/mL para dopamina e 10 ng/mL para entacapona, tolcapona e 3-O-metildopa). As curvas de calibração apresentaram um coeficiente de correlação linear ? 0,9948 ao longo do intervalo de 20-1000 ng/mL para levodopa, 30-600 ng/mL para carbidopa, 10-750 ng/mL para entacapona, 10-500 ng/mL para tolcapona, 10-1000 ng/mL para 3-O-metildopa e 5-500 ng/mL para dopamina. Nos diferentes níveis de concentração das amostras controle, o método apresentou precisão (CV%: ?11,31%) e exatidão (ER%: ?11,88%). O estudo de estabilidade mostrou que, nas condições normais de trabalho do laboratório, a levodopa, carbidopa, 3-O-metildopa, dopamina e metildopa são facilmente degradadas tanto em plasma quanto em solução. A recuperação dos analitos utilizando precipitação de proteínas foi maior que 59,15% com variações de reprodutibilidade menores que 8%. O método validado foi aplicado no plasma de pacientes com doença de Parkinson que estavam em tratamento com o medicamento Stalevo® (100 mg de levodopa, 25 mg de carbidopa e 200 mg de entacapona) e quantificou com sucesso os fármacos levodopa, carbidopa e entacapona e os metabólitos da levodopa (3-O-metildopa e dopamina). Portanto, o método pode ser utilizado como uma ferramenta bioanalítica para acompanhar o tratamento de pacientes com a doença de Parkinson e promover a segurança e eficácia clínica da dose medicamentosa administrada.Abstract: An HPLC-MS/MS method for simultaneous quantification of levodopa, carbidopa, entacapone, tolcapone, 3-O-methyldopa and dopamine in human plasma was developed and validated in this study. The electrospray ionization source was operated in positive ion mode. The chromatographic separation was achieved using a XBridge C8 column (150 x 4.6 mm; 5 ?m particle size). The mobile phase consisted of a gradient of water and acetonitrile:methanol (90:10, v/v), both containing 0.1% formic acid. The extraction of the analytes was performed by protein precipitation with acetonitrile (0.1% formic acid).The validation procedures showed that the new method is selective and free of residual and matrix effects. The high sensitivity of the developed method was demonstrated by the low limits of detection (signal-to-noise ? 3) estimated at 5.0 ng/mL for levodopa; 7.0 ng/mL for carbidopa; 1.0 ng/mL for entacapone; 1.5 ng/mL for tolcapone; 2.5 ng/mL for 3-O-methyldopa and 1.25 ng/mL for dopamine. The limits of quantification with appropriate precision was estimated at 20.0 ng/mL for levodopa; 30.0 ng/mL for carbidopa; 5.0 ng/mL for dopamine and 10.0 ng/mL for entacapone, tolcapone and 3-O-methyldopa. The calibration curves showed linear correlation coefficient superior to 0.9948 over the range of 20-1000 ng/mL for levodopa, 30-600 ng/mL for carbidopa, 10-750 ng/mL for entacapone, 10-500 ng/mL for tolcapone, 10-1000 ng/mL for 3-O-methyldopa and 5-500 ng/mL for dopamine. Variations from the precision and accuracy were within suitable range (<15%). The stability assay demonstrated that under normal working conditions levodopa, carbidopa, 3-O-methyldopa, dopamine and methyldopa (internal standard) are easily degraded in solution and in plasma. The recovery of the analytes and internal standard (> 59.0%) was achieved after protein precipitation with desirable reproducibility (RSD < 8%). The validated method was applied to evaluate plasmatic levels of levodopa, carbidopa, entacapone, 3-O-methyldopa and dopamine in patients with Parkinson's disease using Stalevo® (100.0 mg of levodopa, 25.0 mg of carbidopa and 200.0 mg of entacapone) and all analytes were successfully determined. Therefore, the method can be used as a bianalytical tool for monitoring treatment of patients with Parkinson's disease and promote the clinical efficacy and safety of the administered drug dose.111f. : il., grafs., tabs.application/pdfTesesCiencias farmaceuticasFarmáciaLevodopaDopaminaDoença de ParkinsonDissertaçõesFarmáciaDeterminação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EMinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - ROMULO PEREIRA RIBEIRO.pdfapplication/pdf1605516https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/63469/1/R%20-%20D%20-%20ROMULO%20PEREIRA%20RIBEIRO.pdf9ec91ba33ab2f45120b3cf8467f947aeMD51open access1884/634692020-07-16 16:06:27.318open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/63469Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082020-07-16T19:06:27Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
title Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
spellingShingle Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
Ribeiro, Rômulo Pereira
Teses
Ciencias farmaceuticas
Farmácia
Levodopa
Dopamina
Doença de Parkinson
Dissertações
Farmácia
title_short Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
title_full Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
title_fullStr Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
title_full_unstemmed Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
title_sort Determinação de levodopa, carbidopa, entacapona, tolcapona, 3-0-metildopa e dopamina em plasma humano utilizando CLAE-EM/EM
author Ribeiro, Rômulo Pereira
author_facet Ribeiro, Rômulo Pereira
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Gasparetto, João Cleverson
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas
dc.contributor.author.fl_str_mv Ribeiro, Rômulo Pereira
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Pontarolo, Roberto, 1954-
contributor_str_mv Pontarolo, Roberto, 1954-
dc.subject.por.fl_str_mv Teses
Ciencias farmaceuticas
Farmácia
Levodopa
Dopamina
Doença de Parkinson
Dissertações
Farmácia
topic Teses
Ciencias farmaceuticas
Farmácia
Levodopa
Dopamina
Doença de Parkinson
Dissertações
Farmácia
description Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo
publishDate 2014
dc.date.issued.fl_str_mv 2014
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2020-07-16T19:06:27Z
dc.date.available.fl_str_mv 2020-07-16T19:06:27Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/63469
url https://hdl.handle.net/1884/63469
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 111f. : il., grafs., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/63469/1/R%20-%20D%20-%20ROMULO%20PEREIRA%20RIBEIRO.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 9ec91ba33ab2f45120b3cf8467f947ae
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860319483527168

Registros relacionados