Criopreservação e crioterapia de ápices caulinares para erradicação do complexo viral associado a murcha (PMWAV) em variedades silvestres do gênero ANANAS
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Data de Publicação: | 2017 |
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Resumo: | Estratégias de conservação e erradicação de patógenos têm sido propostas para diversas culturas que tenham coleções in vitro e no campo. O ataque de pragas e doenças vem causando perdas significativas em germoplasma do gênero Ananas . Sendo assim, o desenvolvimento e otimização de protocolos de criopreservação e crioterapia de variedades cultivadas e silvestres de abacaxi tornam-se necessárias para conservação desses recursos genéticos. No presente estudo foram utilizadas plantas de abacaxizeiros provenientes de quatro variedades botânicas pertencentes ao Banco Ativo de Germoplasma de Abacaxi (BAG Abacaxi) e dois híbridos oriundos do programa de melhoramento genético do abacaxizeiro da Embrapa Mandioca e Fruticultura. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar as condições do material de partida (ápices caulinares) em diferentes tempos de cultivo da planta doadora e sua correlação com as porcentagens de regeneração, assim como, estabelecer um protocolo de crioterapia para remoção do complexo viral da murcha do abacaxizeiro (o PMWaV). Para os estudos do material de partida foi utilizada a técnica de criopreservação já estabelecida para ápices caulinares de abacaxi. Plantas in vitro foram cultivadas por 30, 45 e 60 dias para retirada dos ápices caulinares a serem criopreservados. Foram avaliadas as porcentagens de regeneração em cada tratamento tanto para os grupos controle quanto aos ápices expostos ao nitrogênio líquido, e realizados cortes histológicos para avaliação da anatomia do material de partida. Para os ensaios de crioterapia foram realizados procedimentos de indexação via RT-PCR em dois momentos distintos, antes e depois do congelamento. Os resultados indicaram uma interação entre o tempo de cultivo da planta doadora e os genótipos, influenciando de forma significativa nas porcentagens de regeneração dos ápices caulinares. Os acessos A. comosus var. c omosus (BGA 009), A. comosus var. b racteatus (BGA 119) apresentaram as maiores porcentagens de regeneração com 95 % e 90 %, respectivamente, para o tempo de cultura de 30 dias dias. Os cortes histológicos explicaram o insucesso de alguns tratamentos após o congelamento. Para os BGA-009 e BGA-376 (A. comosus var. parguazensis) a crioterapia foi eficiente na remoção do complexo viral. No entanto, para o BGA-119 o PMWaV-3 foi eliminado em cerca de 83 % das plantas tratadas. Esses resultados são promissores para a melhoria da metodologia de criopreservação e para que a crioterapia possa ser utilizada como metodologia de rotina para a remoção do complexo viral da murcha do abacaxizeiro em germoplasma de abacaxi. |
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2019-11-06T22:23:58Z2019-11-06T22:23:58Z2017-08-18GUERRA, Patrícia Araújo. Criopreservação e crioterapia de ápices caulinares para erradicação do complexo viral associado a murcha (PMWAV) em variedades silvestres do gênero ANANAS. 2017. 77 f. Dissertação (Mestrado) - Curso de Programa de Pós-graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Universidade Federal do Recôncavo da Bahia - Ufrb, Cruz das Almas, 2017.http://localhost:8080/handle/prefix/1057Estratégias de conservação e erradicação de patógenos têm sido propostas para diversas culturas que tenham coleções in vitro e no campo. O ataque de pragas e doenças vem causando perdas significativas em germoplasma do gênero Ananas . Sendo assim, o desenvolvimento e otimização de protocolos de criopreservação e crioterapia de variedades cultivadas e silvestres de abacaxi tornam-se necessárias para conservação desses recursos genéticos. No presente estudo foram utilizadas plantas de abacaxizeiros provenientes de quatro variedades botânicas pertencentes ao Banco Ativo de Germoplasma de Abacaxi (BAG Abacaxi) e dois híbridos oriundos do programa de melhoramento genético do abacaxizeiro da Embrapa Mandioca e Fruticultura. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar as condições do material de partida (ápices caulinares) em diferentes tempos de cultivo da planta doadora e sua correlação com as porcentagens de regeneração, assim como, estabelecer um protocolo de crioterapia para remoção do complexo viral da murcha do abacaxizeiro (o PMWaV). Para os estudos do material de partida foi utilizada a técnica de criopreservação já estabelecida para ápices caulinares de abacaxi. Plantas in vitro foram cultivadas por 30, 45 e 60 dias para retirada dos ápices caulinares a serem criopreservados. Foram avaliadas as porcentagens de regeneração em cada tratamento tanto para os grupos controle quanto aos ápices expostos ao nitrogênio líquido, e realizados cortes histológicos para avaliação da anatomia do material de partida. Para os ensaios de crioterapia foram realizados procedimentos de indexação via RT-PCR em dois momentos distintos, antes e depois do congelamento. Os resultados indicaram uma interação entre o tempo de cultivo da planta doadora e os genótipos, influenciando de forma significativa nas porcentagens de regeneração dos ápices caulinares. Os acessos A. comosus var. c omosus (BGA 009), A. comosus var. b racteatus (BGA 119) apresentaram as maiores porcentagens de regeneração com 95 % e 90 %, respectivamente, para o tempo de cultura de 30 dias dias. Os cortes histológicos explicaram o insucesso de alguns tratamentos após o congelamento. Para os BGA-009 e BGA-376 (A. comosus var. parguazensis) a crioterapia foi eficiente na remoção do complexo viral. No entanto, para o BGA-119 o PMWaV-3 foi eliminado em cerca de 83 % das plantas tratadas. Esses resultados são promissores para a melhoria da metodologia de criopreservação e para que a crioterapia possa ser utilizada como metodologia de rotina para a remoção do complexo viral da murcha do abacaxizeiro em germoplasma de abacaxi.Strategies for the conservation and eradication of pathogens have been proposed for several cultures that have as collections in vitro and in the field. The attack of pests and diseases has caused significant losses in germplasm of the genus Ananas. Thus, the development and optimization of creativity and cryotherapy protocols of cultivated and wild pineapple varieties are necessary for conservation of genetic resources. In the present study, pineapple plants of four botanical varieties belonging to the Pineapple Active Germplasm Bank (AGB Pineapple) and two hybrids from the genetic improvement program of the Embrapa Cassava and Fruits research unit (Embrapa Mandioca e Fruticultura). The main objective was to evaluate the conditions of the starting material (stem tips) after different cultivation intervals of the donor plant and their correlation with the regeneration rates, as well as to establish cryotherapy protocol for removal of the pineapple mealybug wilt-associated virus (PMWaV) complex. The suitability of the starting material was studied using cryopreservation of pineapple stem tips. Plants were cultivated in vitro for 30, 45 and 60 days before removal of the stem tips for cryopreservation. The regeneration rates of each treatment were calculated and histological sections were observed to evaluate the anatomy of the starting material. For the cryotherapy tests, indexation by RT-PCR was performed before and after freezing. The results indicated an interaction between cultivation time of the donor plant and the genotypes, with a significant influence on the regeneration percentages of the stem tips. The accessions A. comosus var. comosus (AGB-009) and A. comosus var. bracteatus (AGB-119) showed the highest regeneration rates, of 95% and 90%, respectively, for cultivation time of 30 days. The histological sections revealed the failure of some treatments after thawing. For AGB-009 and AGB-376 (A. comosus var. parguazensis), the cryotherapy was efficient in removing the viral complex. However, for AGB-119, the PMWaV-3 was eliminated in 83% of the plants. These results are promising for improvement of the cryopreservation method and for use of cryotherapy for routine removal of the pineapple mealybug wilt-associated virus complex from germplasm material.porUniversidade Federal do Recôncavo da BahiaPPG1UFRBBrasilDepartamento 1CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIAAbacaxiCultivo do AbacaxiMelhoramento GenéticoAnanas comosus (L) Merr.Pineapple Mealybug Associated VirusÁpices CaulinaresCriopreservação e crioterapia de ápices caulinares para erradicação do complexo viral associado a murcha (PMWAV) em variedades silvestres do gênero ANANASCryopreservation and cryotherapy of stem apexes for eradication of wilt-associated viral complex (PMWAV) in wild varieties of the genus ANANASinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisSouza, Fernanda Vidigal Duartehttp://lattes.cnpq.br/3813423168973974Souza, Everton Hilo deID Lattes: 3936341852424789http://lattes.cnpq.br/3936341852424789Souza, Fernanda Vidigal DuarteID Lattes: 3813423168973974http://lattes.cnpq.br/3813423168973974Ledo, Ana da SilvaID Lattes: 8253115718345940http://lattes.cnpq.br/8253115718345940Andrade, Eduardo Chumbinho deID Lattes: 7798573813761460http://lattes.cnpq.br/7798573813761460ID Lattes: 3558575056999279http://lattes.cnpq.br/3558575056999279Guerra, Patrícia Araújoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRBinstname:Universidade Federal do Recôncavo da Bahia (UFRB)instacron:UFRBLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866http://ri.ufrb.edu.br/jspui/bitstream/prefix/1057/2/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD52ORIGINALCriopreservação e crioterapia de ápices caulinares para erradicação do complexo viral associado a murcha ... .pdfCriopreservação e crioterapia de ápices caulinares para erradicação do complexo viral associado a murcha ... .pdfapplication/pdf1702420http://ri.ufrb.edu.br/jspui/bitstream/prefix/1057/1/Criopreserva%c3%a7%c3%a3o%20e%20crioterapia%20de%20%c3%a1pices%20caulinares%20para%20erradica%c3%a7%c3%a3o%20do%20complexo%20viral%20associado%20a%20murcha%20...%20.pdf42e317da0fea255899d376abad3a8ee2MD51prefix/10572022-02-08 16:54:07.217oai:ri.ufrb.edu.br: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ório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufrb.edu.br/oai/requestnutin.cidoc@proplan.ufrb.edu.bropendoar:27582022-02-08T19:54:07Repositório Institucional da UFRB - Universidade Federal do Recôncavo da Bahia (UFRB)false |
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