Adaptação e avaliação da técnica de citometria de fluxo para detecção de corpos de Heinz

• Autor(a) principal: Rodrigues, Letícia Terres
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/234275
• topic: Citometria de fluxo; Anemia falciforme; Corpos de Heinz

INTRODUÇÃO: Corpos de Heinz são inclusões presentes nos eritrócitos, resultado de hemoglobinas instáveis e podem estar presentes em amostras de pacientes portadores de hemoglobinopatias. O método usado atualmente utiliza microscopia óptica, é pouco sensível e raramente utilizado. O composto acetilfenilhidrazina induz a produção de corpos de Heinz fluorescentes. O objetivo deste trabalho foi adaptar e avaliar a técnica de citometria de fluxo para detectar os corpos de Heinz induzidos in vitro por acetilfenilhidrazina. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram utilizadas amostras de sangue de controles normais, alfa-talassêmicos e portadores de síndromes falciformes que foram incubadas com acetilfenilhidrazina e analisadas por citometria de fluxo. As emissões médias de fluorescência (mean fluorescence intensity – MFI) foram comparadas com os resultados obtidos na eletroforese de hemoglobina e no hemograma. RESULTADOS: Foram padronizadas a estabilidade das amostras e a quantidade de amostra necessária para a realização da técnica. Dentre os índices hematológicos, houve correlação positiva entre MFI e VCM, HCM e CHCM. Os pacientes portadores de síndromes falciformes obtiveram emissões médias de fluorescência significativamente mais altas que os controles e os alfa-talassêmicos e houve correlação positiva entre o aumento da emissão de fluorescência e a presença de HbS. Para os alfa-talassêmicos, não foi encontrada diferença significativa na emissão de fluorescência com relação aos controles normais. CONCLUSÃO: Foi possível padronizar a técnica de citometria de fluxo para detecção dos corpos de Heinz induzidos por acetilfenilhidrazina em pacientes alfa-talassêmicos e portadores de síndromes falciformes. Futuras análises precisam esclarecer a correlacão entre a produção de corpos de Heinz e a severidade de crises oxidativas em pacientes alfatalassêmicos e a relação entre a emissão média de fluosrescência obtida na citometria com o mecanismo de formação de corpos de Heinz pela acetilfenilhidrazina.