Isolamento e identificação de bactérias bioluminescentes de animais e de ambientes naturais marinhos de Imbé e Tramandaí, Litoral Norte do Rio Grande do Sul, Brasil

• Autor(a) principal: Leite, Belize Rodrigues
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/40075
• topic: Bactérias marinhas; Bioluminescência; Rio Grande do Sul, Litoral norte; Marine bacteria; Bioluminescence; Vibrio; Biotechnological potential

Durante o período de julho de 2010 a abril de 2011 foram coletadas 33 amostras de água e 23 amostras de animais marinhos das adjacências da zona de estuário da Bacia Hidrográfica do Rio Tramandaí, no Litoral Norte do Rio Grande do Sul, Brasil, com o objetivo de isolar e identificar bactérias bioluminescentes, relacionar a carga microbiana total e bioluminescente das amostras de água com suas características físico-químicas e selecionar os isolados com potencial para atuar como fontes doadoras de genes de bioluminescência. Obtiveram-se amostras de água superficial do estuário, em um ponto de Imbé, e do mar, em três pontos de Tramandaí: zona de pós-arrebentação, zona intermediária entre o estuário e as monobóias, e zona das monobóias do Terminal Marítimo Almirante Soares Dutra (TEDUT). Potencial hidrogeniônico, oxigênio dissolvido, temperatura e salinidade foram parâmetros aferidos nas amostras de água. Alíquotas de 0,1 e 1 mL foram inoculadas nos meios Ágar Marinho e TCBS. Após 24h de incubação, a carga microbiana das amostras foi determinada em Unidades Formadoras de Colônia por mL de água. Bactérias bioluminescentes foram constatadas nos quatro pontos amostrados. Das 33 amostras de água, 27 apresentaram bactérias bioluminescentes (81%). Os parâmetros que mais aparentaram influenciar a carga microbiana bioluminescente das amostras foram temperatura e salinidade. Bactérias bioluminescentes não foram observadas em amostras com temperatura inferior a 18°C. A maior carga microbiana bioluminescente (690 UFC/mL) foi observada em fevereiro na amostra da zona de pós-arrebentação, sob a temperatura de 23°C e a salinidade de 38,44 ‰, o maior valor constatado para este parâmetro. Apesar de terem sido feitas três amostragens com invertebrados marinhos, foram observadas colônias bioluminescentes somente nas amostras do mês de fevereiro, no qual também foram constatadas as maiores cargas microbianas bioluminescentes nas amostras de água. A coleta do muco superficial da anêmona, da craca e do briozoário, com o auxílio de suábes, permitiu a observação de bactérias bioluminescentes agregadas na superfície destes animais na forma de biofilme. Os 14 peixes analisados também representaram fontes de bactérias bioluminescentes nas águas costeiras de Imbé e Tramandaí, mesmo quando estas bactérias não foram abundantes na coluna d’água. Após diferentes ciclos de purificação, um total de 44 isolados bioluminescentes foi obtido. Até o presente momento, apenas 15 isolados obtidos a partir das amostras de água ainda expressam bioluminescência. Os isolados caracterizados como BL 15, BL 16, BL 20a e BL 21 representaram ideais fontes doadoras de genes da bioluminescência, pois demonstraram a capacidade de expressar luminescência após 144h de incubação. Amostras de DNA de dez isolados foram submetidas ao sequenciamento do gene 16S rDNA, mas o produto obtido apresentou má qualidade e não permitiu a análise confiável dos nucleotídeos de forma a identificar os isolados em nível de espécie. O perfil genotípico de 14 isolados foi agrupado pela técnica de DNA fingerprinting Microsatellite-Primed (MSP-PCR) e revelou que estes provavelmente pertençam à mesma espécie. Amostras de DNA dos isolados BL 11a, BL 12, BL 16 e BL 34, escolhidos como representantes do grupo, serão novamente sequenciadas.