Modulação da homeostase de zinco em macrófagos durante a interação com Cryptococcus neoformans

• Autor(a) principal: Fogaça, Natully de Souza Süffert
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/102615
• topic: Cryptococcus neoformans; Criptococose; Homeostase; Zinco

A levedura basidiomicética Cryptococcus neoformans é o agente etiológico da criptococose, patologia que pode acometer diferentes órgãos do hospedeiro, incluindo pele, pulmões e sistema nervoso central. O ciclo infeccioso se inicia com a deposição de partículas infecciosas nas vias aéreas do hospedeiro. Neste ambiente, o micro-organismo se depara com diversas limitações impostas pelo hospedeiro para conter a progressão da infecção, sendo uma delas denominada imunidade nutricional, caracterizada pela criação de um ambiente com restrita disponibilidade de nutrientes. Visto que a privação de zinco constitui um exemplo de imunidade nutricional, os mecanismos de captação e metabolismo deste metal possivelmente estão relacionados ao processo de interação patógeno-hospedeiro. Portanto, o objetivo deste projeto foi avaliar a modulação da homeostase do metal zinco em macrófagos e a sua influência na atividade fungicida dessas células. Em ensaios de viabilidade celular de macrófagos murinos em concentrações crescentes de cloreto de zinco (ZnCl2) ou do quelante de zinco DTPA, foi observada redução drástica da viabilidade celular apenas em concentrações de ZnCl2 superiores a 500 μM. A taxa de desenvolvimento de C. neoformans foi alterada apenas na ausência de zinco (concentrações superiores a 50 μM de DTPA). Para avaliar se a privação de zinco influencia a atividade fungicida de macrófagos, realizamos testes de viabilidade de C. neoformans após a interação com células de macrófagos murinos. Observamos que a privação de zinco levou a menor atividade fungicida de macrófagos; entretanto, células de C. neoformans previamente tratadas com o quelante de zinco TPEN se mostraram mais sensíveis à atividade fungicida de macrófagos. Levando em consideração que a privação de zinco altera a sensibilidade de C. neoformans à atividade fungicida de macrófagos, foi realizada análise quantitativa dos níveis de transcritos de 10 genes da família ZnT e 4 genes da família ZIP de transportadores de zinco. Os genes ZnT-1, ZnT-5, ZnT-6 e ZnT-7 apresentaram uma redução significativa dos níveis relativos de transcritos após 3 ou 6 horas de interação com C. neoformans. Esta mesma redução foi observada para os níveis relativos dos transcritos referentes aos genes ZIP1, ZIP8, ZIP13 e ZIP14. Em ensaios para avaliar se ocorre mobilização de zinco intracelular em células de macrófagos durante a interação com Cryptococcus, não houve diferença significativa, sugerindo que os transportadores de zinco ZnT e ZIP não estão envolvidos na homeostase de zinco durante a infecção por C. neoformans, e que existem outros mecanismos que regulam a homeostase de zinco em macrófagos durante a infecção por essa levedura.