Expression and antigenic analysis of the recombinant TRP36 protein from Ehrlichia canis São Paulo strain for serologic tests

• Autor(a) principal: Medeiros, Miguel Angelo da Silva
• Data de Publicação: 2020
• Outros Autores: Silva, Maria Helena da, Matta, Maria Adelaide do Valle, Ferreira, Eliane de Oliveira, Machado, Sergio Lisboa, Soares, João Fábio, Labruna, Marcelo Bahia, Toma, Helena Keiko, Xavier, Márcia de Souza, Meirelles, Maria de Nazareth Silveira Leal de, Almosny, Nádia R. P.
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/213786
• topic: Proteínas recombinantes; Ehrlichia canis; Antigenos; Diagnostico sorologico; Ehrlichiose; Ehrlichia canis; TRP36 protein; Epidemiology; Diagnostic; Serologic tests

Ehrlichia canis é o principal agente etiológico da erliquiose monocítica canina (EMC), uma doença infecciosa canina globalmente dispersa. No Brasil, a EMC é considerada endêmica, e a infecção pode atingir 65% em cães em alguns estados. O diagnóstico de erliquiose é importante para fins de tratamento e epidemiológicos. A proteína TRP36 de E. canis leva a uma resposta humoral com produção de anticorpos em fase aguda, encontrada durante o curso da doença. O objetivo deste estudo foi obter a proteína TRP36 recombinante da amostra São Paulo de E. canis e avaliar seu potencial como ferramenta para o diagnóstico sorológico da CME. O isolado de E. canis São Paulo foi cultivado em células da linhagem DH82 e o DNA genômico foi obtido. O fragmento de DNA bacteriano que codifica toda a ORF de TRP36 foi clonado no vetor pBAD / Thio-TOPO e transformado em células competentes Escherichia coli DH10B, com o plasmídeo portador de trp36 para expressão de proteínas. Para avaliar a antigenicidade da proteína, 16 amostras de soro canino foram previamente analisadas (por PCR e teste sorológico comercial SNAP4Dx). Os resultados estavam de acordo com o teste SNAP4Dx. Os experimentos que utilizam essa proteína recombinante como antígeno, visando ao desenvolvimento de um teste sorológico baseado no ELISA, são o próximo passo para produzir um teste de diagnóstico confiável, acessível e útil para o diagnóstico da EMC no Brasil.