Análise das interações entre proteínas envolvidas na biogênese de miRNAs em ARABIDOPSIS THALIANA

• Autor(a) principal: Capelari, Érika Frydrych
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/150642
• topic: Arabidopsis thaliana; MicroRNAs

O silenciamento de RNA usa pequenas moléculas de RNA como mediadores de sequências específicas responsáveis por regular a expressão de genes a nível transcricional, pós-transcricional e/ou traducional. A interferência por RNA (RNAi) é um dos mecanismos celulares responsáveis pelo silenciamento gênico pós-transcricional, que atua sobre o mRNA. Dependendo do grau de complementaridade com o mRNA-alvo, poderá ocorrer um silenciamento por degradação do mRNA ou por inibição da tradução. Uma das principais vias de silenciamento de RNA de plantas é mediada por microRNAs (miRNAs). miRNAs são pequenas moléculas de RNA não-codificadoras de proteínas, de 21 a 25 nucleotídeos que são parcialmente complementares a uma ou mais moléculas de mRNA, tendo como principal função regular negativamente a expressão gênica. A biogênese dos miRNAs envolve diversas enzimas e proteínas. Dentre essas proteínas importantes são a DICER-LIKE (DCL), responsável pelo tamanho do RNA de fita dupla gerado, ARGONAUTA (AGO), responsável pela seleção da fita de miRNA que será incorporada ao complexo de silenciamento induzido por RNA (RISC) e as proteínas DRB, proteínas ligantes de RNA de dupla fita, que participam da biogênese de miRNAs. O RISC controla a expressão pós-transcricional de genes-alvo, através do pareamento entre a fita do miRNA, incorporada nesse complexo, com a região homóloga de seu mRNA-alvo. Em Arabidopsis thaliana já foram descritas 10 proteínas AGO, 4 proteínas DCL e 5 proteínas DRB. Diferentes combinações de proteínas que se ligam ao RNA resultam em diferentes respostas celulares. Dessa forma, entender como ocorre a interação entre proteínas DRB, bem como a interação destas com outras proteínas envolvidas na biogênese de miRNAs, pode auxiliar na compreensão de como este processo ocorre. Neste trabalho nós utilizamos duplo híbrido de levedura para investigar a interação entre as proteínas DRBs. Interessantemente, foram observadas interações entre as proteínas DRB1/DRB4, DRB2/DRB3 e DRB4/DRB3, trazendo novas perspectivas no cenário de processamento de miRNAs.