Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRGS |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10183/258761 |
Resumo: | Os mecanismos moleculares que levam ao dano neuronal em muitas doenças neurodegenerativas ainda não foram totalmente elucidados. Parte dessa dificuldade se deve a falta de modelos experimentais adequados para o estudo do sistema nervoso humano. Inúmeras tentativas de diferenciar linhagens em células mais semelhantes a neurônios foram realizadas, resultando apenas na expressão parcial de características neuronais. Previamente nosso grupo estabeleceu condições experimentais para a diferenciação do neuroblastoma humano SH-SY5Y em neurônios dopaminérgicos a partir da adição de ácido retinóico (AR). Alguns estudos sugerem que esta linhagem, quando tratada com AR e fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), apresenta uma mudança para um fenótipo colinérgico. No entanto, são poucos os estudos que caracterizam essa diferenciação. O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças morfológicas e bioquímicas na diferenciação da linhagem SH-SY5Y com AR e adição de BDNF. As células proliferativas foram cultivadas em meio DMEM/F12 com 10% de soro fetal bovino (SFB). A diferenciação foi induzida com 10 μM de AR em meio de cultura com 1% de SFB durante sete dias, sendo o BDNF acrescentado a partir do quarto dia. A atividade da Acetilcolinesterase (AChE) foi determinada como descrito no ensaio colorimétrico por Ellman (1961) e da Colina Acetiltransferase (ChAT) conforme Chao & Wolfgram (1971). Os parâmetros morfológicos foram avaliados pelo aumento na densidade e/ou no prolongamento de neuritos, por microscopia de contraste de fase e fluorescência, e microscopia eletrônica de varredura (MEV). O co-tratamento com BDNF resultou em células com notável morfologia neuronal, apresentando aumento na densidade e comprimento de neuritos. Nossos dados demonstraram que as células co-tratadas com BDNF apresentam um aumento nas atividades enzimáticas da AChE e ChAT quando comparadas às diferenciadas somente com AR. Esses resultados fazem dessa linhagem celular uma ferramenta útil no campo da neurociência, podendo torná-la um modelo versátil para o estudo de doenças neurodegenerativas como a Doença de Parkinson e Alzheimer. |
id |
UFRGS-2_68c180c0bfcdd6e9167d379e7d9da1f7 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:www.lume.ufrgs.br:10183/258761 |
network_acronym_str |
UFRGS-2 |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFRGS |
repository_id_str |
|
spelling |
Medeiros, Liana Marengo deKlamt, FabioRico, Eduardo Pacheco2023-06-02T03:29:47Z2012http://hdl.handle.net/10183/258761000877106Os mecanismos moleculares que levam ao dano neuronal em muitas doenças neurodegenerativas ainda não foram totalmente elucidados. Parte dessa dificuldade se deve a falta de modelos experimentais adequados para o estudo do sistema nervoso humano. Inúmeras tentativas de diferenciar linhagens em células mais semelhantes a neurônios foram realizadas, resultando apenas na expressão parcial de características neuronais. Previamente nosso grupo estabeleceu condições experimentais para a diferenciação do neuroblastoma humano SH-SY5Y em neurônios dopaminérgicos a partir da adição de ácido retinóico (AR). Alguns estudos sugerem que esta linhagem, quando tratada com AR e fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), apresenta uma mudança para um fenótipo colinérgico. No entanto, são poucos os estudos que caracterizam essa diferenciação. O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças morfológicas e bioquímicas na diferenciação da linhagem SH-SY5Y com AR e adição de BDNF. As células proliferativas foram cultivadas em meio DMEM/F12 com 10% de soro fetal bovino (SFB). A diferenciação foi induzida com 10 μM de AR em meio de cultura com 1% de SFB durante sete dias, sendo o BDNF acrescentado a partir do quarto dia. A atividade da Acetilcolinesterase (AChE) foi determinada como descrito no ensaio colorimétrico por Ellman (1961) e da Colina Acetiltransferase (ChAT) conforme Chao & Wolfgram (1971). Os parâmetros morfológicos foram avaliados pelo aumento na densidade e/ou no prolongamento de neuritos, por microscopia de contraste de fase e fluorescência, e microscopia eletrônica de varredura (MEV). O co-tratamento com BDNF resultou em células com notável morfologia neuronal, apresentando aumento na densidade e comprimento de neuritos. Nossos dados demonstraram que as células co-tratadas com BDNF apresentam um aumento nas atividades enzimáticas da AChE e ChAT quando comparadas às diferenciadas somente com AR. Esses resultados fazem dessa linhagem celular uma ferramenta útil no campo da neurociência, podendo torná-la um modelo versátil para o estudo de doenças neurodegenerativas como a Doença de Parkinson e Alzheimer.application/pdfporNeuroblastomaDiferenciação celularÁcido retinóicoCaracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociênciasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisUniversidade Federal do Rio Grande do SulInstituto de BiociênciasPorto Alegre, BR-RS2012Ciências Biológicas: Bachareladograduaçãoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT000877106.pdf.txt000877106.pdf.txtExtracted Texttext/plain63278http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/258761/2/000877106.pdf.txtd3d80cea166d752c917285534dbe4512MD52ORIGINAL000877106.pdfTexto completoapplication/pdf1355232http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/258761/1/000877106.pdfd5f8181786182f3582abb514b1340e27MD5110183/2587612023-06-03 03:37:30.014761oai:www.lume.ufrgs.br:10183/258761Repositório de PublicaçõesPUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestopendoar:2023-06-03T06:37:30Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
title |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
spellingShingle |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências Medeiros, Liana Marengo de Neuroblastoma Diferenciação celular Ácido retinóico |
title_short |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
title_full |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
title_fullStr |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
title_full_unstemmed |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
title_sort |
Caracterização da diferenciação colinérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y e seu uso como modelo in vitro para estudos em neurociências |
author |
Medeiros, Liana Marengo de |
author_facet |
Medeiros, Liana Marengo de |
author_role |
author |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Medeiros, Liana Marengo de |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Klamt, Fabio |
dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv |
Rico, Eduardo Pacheco |
contributor_str_mv |
Klamt, Fabio Rico, Eduardo Pacheco |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Neuroblastoma Diferenciação celular Ácido retinóico |
topic |
Neuroblastoma Diferenciação celular Ácido retinóico |
description |
Os mecanismos moleculares que levam ao dano neuronal em muitas doenças neurodegenerativas ainda não foram totalmente elucidados. Parte dessa dificuldade se deve a falta de modelos experimentais adequados para o estudo do sistema nervoso humano. Inúmeras tentativas de diferenciar linhagens em células mais semelhantes a neurônios foram realizadas, resultando apenas na expressão parcial de características neuronais. Previamente nosso grupo estabeleceu condições experimentais para a diferenciação do neuroblastoma humano SH-SY5Y em neurônios dopaminérgicos a partir da adição de ácido retinóico (AR). Alguns estudos sugerem que esta linhagem, quando tratada com AR e fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), apresenta uma mudança para um fenótipo colinérgico. No entanto, são poucos os estudos que caracterizam essa diferenciação. O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças morfológicas e bioquímicas na diferenciação da linhagem SH-SY5Y com AR e adição de BDNF. As células proliferativas foram cultivadas em meio DMEM/F12 com 10% de soro fetal bovino (SFB). A diferenciação foi induzida com 10 μM de AR em meio de cultura com 1% de SFB durante sete dias, sendo o BDNF acrescentado a partir do quarto dia. A atividade da Acetilcolinesterase (AChE) foi determinada como descrito no ensaio colorimétrico por Ellman (1961) e da Colina Acetiltransferase (ChAT) conforme Chao & Wolfgram (1971). Os parâmetros morfológicos foram avaliados pelo aumento na densidade e/ou no prolongamento de neuritos, por microscopia de contraste de fase e fluorescência, e microscopia eletrônica de varredura (MEV). O co-tratamento com BDNF resultou em células com notável morfologia neuronal, apresentando aumento na densidade e comprimento de neuritos. Nossos dados demonstraram que as células co-tratadas com BDNF apresentam um aumento nas atividades enzimáticas da AChE e ChAT quando comparadas às diferenciadas somente com AR. Esses resultados fazem dessa linhagem celular uma ferramenta útil no campo da neurociência, podendo torná-la um modelo versátil para o estudo de doenças neurodegenerativas como a Doença de Parkinson e Alzheimer. |
publishDate |
2012 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2012 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2023-06-02T03:29:47Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
format |
bachelorThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/10183/258761 |
dc.identifier.nrb.pt_BR.fl_str_mv |
000877106 |
url |
http://hdl.handle.net/10183/258761 |
identifier_str_mv |
000877106 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFRGS instname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS) instacron:UFRGS |
instname_str |
Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS) |
instacron_str |
UFRGS |
institution |
UFRGS |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFRGS |
collection |
Repositório Institucional da UFRGS |
bitstream.url.fl_str_mv |
http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/258761/2/000877106.pdf.txt http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/258761/1/000877106.pdf |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
d3d80cea166d752c917285534dbe4512 d5f8181786182f3582abb514b1340e27 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS) |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1801224660416724992 |