Padrões moleculares e evolutivos de SHISA3 : um possível alvo de susceptibilidade ao efeito teratogênico da talidomida

• Autor(a) principal: Dupont, Ágata de Vargas
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/240161
• topic: Genética; Talidomida; Teratogênese

Talidomida é um medicamento inicialmente vendido como sedativo e antiemético para mulheres grávidas, posteriormente sendo descoberto como teratogênico, causando a embriopatia da talidomida (TE). Mais de 10.000 bebês nasceram com TE no mundo, mas estima-se que apenas 20-40% dos fetos expostos desenvolvem a embriopatia, contando com um fator de susceptibilidade genética. Testes em ratos e camundongos mostraram que estas espécies não são afetadas pela TE, ao passo que diversas outras são. Até hoje o mecanismo da teratogênese da talidomida se mantém um mistério, bem como o que causa a diferente resposta desses animais. Recentemente uma nova hipótese foi proposta, com a proteína beta-catenina com papel central no desenvolvimento de TE. Beta-catenina possui um papel central em diversos processos do desenvolvimento, fazendo parte de uma via que é inibida por shisa3. Assim, o objetivo do presente trabalho foi investigar se a proteína shisa3 é uma boa candidata a alvo na TE, investigando padrões evolutivos, epigenéticos e de susceptibilidade genética. Para isso, foram desempenhadas análises proteômicas comparativas no programa MEGA7 entre animais afetados e não afetados, bem como o cálculo de similaridade e identidade das sequências de aminoácidos coletadas através do alinhamento por sequência em pares pelo LALIGN, da EMBL-EBI. Indicativos de seleção foram analisados com o auxílio do pacote de programas PAML. A região codificante do gene foi sequenciada pelo método Sanger de sequenciamento em indivíduos afetados pela TE em busca de variantes. Predições funcionais foram realizadas nas variantes encontradas, além da predição de ilhas CpG. Três variantes na proteína exclusivas nos animais não-afetados foram identificadas e um percentual acima de 90% de similaridade da proteína foi encontrada em mamíferos, entre afetados e não afetados. Uma única variante na região codificante do gene foi encontrada nos indivíduos com TE analisados. Foram identificadas sete ilhas CpG. Poucos estudos sobre shisa3 são encontrados na literatura. Contudo, seu papel inibitório em uma via envolvida no desenvolvimento embrionário recentemente proposta como associada ao desenvolvimento de TE possibilita a sugestão de um papel de shisa3 no efeito teratogênico da talidomida. Com estudos descritos na literatura mostrando o manejo eficiente de camundongos após knockout do gene e a diminuta quantidade de variantes encontradas no presente trabalho, associados a alta incidência de ilhas CpG encontrada, levanta-se a possibilidade de uma diferença de expressão gênica entre espécies ou que os organismos não-afetados possuam um mecanismo de compensação mediante a perda da proteína diferenciado. Outras ideias foram levantadas, bem como perspectivas de estudos futuros.