Efeito do resveratrol sobre parâmetros astrocíticos e permeabilidade de barreira hematoencefálica no modelo animal de autismo induzido por exposição pré-natal ao ácido valproico

• Autor(a) principal: Rockenbach, Marília Körbes
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/238722
• topic: Transtorno do espectro autista; Ácido valpróico; Astrócitos; Resveratrol; Barreira hematoencefálica; Aquaporina 4; Autism spectrum disorder; Valproic acid; Blood brain barrier; Astrocytes; Aquaporin-4

O Transtorno do Espectro Autista (TEA) é uma desordem do neurodesenvolvimento de elevada prevalência, afetando 1:59 crianças de até 8 anos de idade nos Estados Unidos. De acordo com a 5ª edição do Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais (DSM-5), o diagnóstico do TEA é dado pela díade comportamental composta por prejuízos na comunicação e interação social, bem como por interesses restritos, comportamentos repetitivos e estereotipados. Além das alterações comportamentais, o TEA pode apresentar muitas comorbidades associadas e um importante achado clínico é a presença de maior volume encefálico nos primeiros anos de vida. Embora a etiologia do TEA permaneça desconhecida, sabe-se da importância de fatores genéticos e ambientais, como a exposição pré-natal ao ácido valproico (VPA). O resveratrol (RSV) é uma molécula anti-inflamatória, anti-oxidante e neuroprotetora conhecida por prevenir comportamentos sociais no modelo animal de autismo induzido por exposição pré-natal ao VPA. O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos do VPA na permeabilidade da barreira hematoencefálica (BHE), nas células GFAP+ e na aquaporina 4 (AQP4) no córtex pré-frontal medial (CPFm) de ratos machos de 30 dias e o possível efeito protetivo do RSV. Ratas Wistar prenhes receberam doses diárias de 3.6 mg/kg de RSV ou DMSO (veículo) via subcutânea do dia embrionário 6.5 (E6.5) até E18.5 e no dia E12.5 foi administrada uma dose intraperitoneal de 600 mg/kg de VPA ou solução salina (0,9%). No dia pós-natal 30 (P30) os animais foram eutanasiados por sobredose anestésica de cetamina (300 mg/kg) e xilazina (40 mg/kg) e destinados a diferentes técnicas experimentais. Os animais avaliados para a permeabilidade da BHE ao corante azul de Evans foram injetados via intraperitoneal com uma solução de azul de Evans 2% diluído em salina (4 mg/kg), anestesiados e submetidos a perfusão transcardíaca com salina e paraformaldeído para posterior remoção e secção do encéfalo e análise de fluorescência. Para a imunofluorescência, os animais foram anestesiados, perfundidos e o encéfalo foi removido e seccionado. Animais do grupo VPA apresentaram maior permeabilidade da BHE ao corante azul de Evans e o RSV preveniu essa alteração. Os grupos que receberam VPA apresentaram aumento no número absoluto de células GFAP+ nas camadas profundas do pré-límbico (PrL), além de um efeito sinérgico do RSV e do VPA no CC (superficial), no PrL (superficial) e no infralímbico (IL – profundo). Na razão de células GFAP+ foi visto um aumento no número relativo nas camadas profundas e uma diminuição nas camadas superficiais do CC e do PrL no grupo VPA e o RSV foi capaz de prevenir essa alteração no PrL. Também foi observado uma diminuição no conteúdo de fluorescência de AQP4 em todas as regiões analisadas do CPFm no grupo VPA. Dessa forma, esse trabalho demonstrou alterações significativas na permeabilidade da BHE, no número e localização de células GFAP+ e no conteúdo de fluorescência de AQP4 no CPFm do modelo VPA, bem como o uso do RSV como uma ferramenta para a investigação de mecanismos envolvidos na fisiopatologia do TEA.