Simultaneous quantification of lycopene, B-carotene, retinol and alfa-tocopherol in plasma after a simple extraction procedure : stability study and application to human volunteers
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Data de Publicação: | 2012 |
Outros Autores: | , , , , , , , , , , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRGS |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10183/72503 |
Resumo: | Um método para quantificação simultânea de licopeno, β-caroteno, retinol e α-tocoferol por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detecção no visível/fluorescente e eluição isocrática foi otimizado e validado. O método consiste de extração líquido-líquido rápida e simples e posterior quantificação do sobrenadante extraído por HPLC. Alíquotas de plasma foram estocadas a –20°C por três meses para estudo da estabilidade. Aplicação metodológica foi realizada em amostras fornecidas por pintores e indivíduos não expostos a tintas (n = 75). O ensaio foi linear para todas as vitaminas analisadas (r > 0,99). Precisões intradia e interdia apresentaram coeficiente de variação (CV) menor que 5%. Exatidões variaram de 0,29 a –5,80% e recuperações entre 92,73 e 101,97%. Amostras de plasma e sobrenadante extraído foram estáveis por até 60 dias a –20°C. Foi demonstrada uma diminuição significativa nas concentrações de licopeno, β-caroteno e retinol em indivíduos expostos quando comparados com os não-expostos (p < 0,05). O método é simples, reprodutível, preciso, exato e sensível, e pode ser utilizado na rotina de laboratórios clínicos. |
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Charão, Mariele FeifferMoro, Angela MariaBrucker, NatáliaBulcão, Rachel PicadaBaierle, MaríliaFreitas, FernandoDurgante, JulianoNascimento, Sabrina Nunes doBubols, Guilherme BorgesSaldiva, Paulo Hilario NascimentoBohrer, DeniseGarcia, Solange Cristina2013-06-15T01:49:21Z20120103-5053http://hdl.handle.net/10183/72503000873512Um método para quantificação simultânea de licopeno, β-caroteno, retinol e α-tocoferol por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detecção no visível/fluorescente e eluição isocrática foi otimizado e validado. O método consiste de extração líquido-líquido rápida e simples e posterior quantificação do sobrenadante extraído por HPLC. Alíquotas de plasma foram estocadas a –20°C por três meses para estudo da estabilidade. Aplicação metodológica foi realizada em amostras fornecidas por pintores e indivíduos não expostos a tintas (n = 75). O ensaio foi linear para todas as vitaminas analisadas (r > 0,99). Precisões intradia e interdia apresentaram coeficiente de variação (CV) menor que 5%. Exatidões variaram de 0,29 a –5,80% e recuperações entre 92,73 e 101,97%. Amostras de plasma e sobrenadante extraído foram estáveis por até 60 dias a –20°C. Foi demonstrada uma diminuição significativa nas concentrações de licopeno, β-caroteno e retinol em indivíduos expostos quando comparados com os não-expostos (p < 0,05). O método é simples, reprodutível, preciso, exato e sensível, e pode ser utilizado na rotina de laboratórios clínicos.A method for the simultaneous quantification of lycopene, β-carotene, retinol and α-tocopherol by high-performance liquid chromatography (HPLC) with Vis/fluorescence detection with isocratic elution was optimized and validated. The method consists of a rapid and simple liquid-liquid extraction procedure and a posterior quantification of extracted supernatants by HPLC. Aliquots of plasma were stored at –20°C for three months for stability study. The methodology was applied to samples from painters and individuals not exposed to paints (n = 75). The assay was linear for all vitamins (r > 0.99). Intra- and inter-run precisions were obtained with coefficient of variation smaller than 5%. The accuracies ranged from 0.29 to –5.80% and recoveries between 92.73 and 101.97%. Plasma samples and extracted supernatants were stable for 60 days at –20°C. A significant decrease of lycopene, β-carotene and retinol concentrations in plasma from exposed individuals compared to non-exposed individuals (p < 0.05) was observed. The method is simple, reproducible, precise, accurate and sensitive, and can be routinely utilized in clinical laboratories.application/pdfengJournal of the Brazilian Chemical Society. São Paulo. Vol. 23, n. 8 (2012), p. 1441-1449RetinolLicopenoCarotenóidesMétodos analíticosRetinolα-tocopherolLycopeneβ-caroteneHPLCLiquid-liquid extractionSimultaneous quantification of lycopene, B-carotene, retinol and alfa-tocopherol in plasma after a simple extraction procedure : stability study and application to human volunteersinfo:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/otherinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSORIGINAL000873512.pdf000873512.pdfTexto completo (inglês)application/pdf721730http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/72503/1/000873512.pdfaa4ea12a64319ca9e35c4dcef94bdb90MD51TEXT000873512.pdf.txt000873512.pdf.txtExtracted Texttext/plain34313http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/72503/2/000873512.pdf.txtf9034dcc76d797fa24966b74a27a38fcMD52THUMBNAIL000873512.pdf.jpg000873512.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1585http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/72503/3/000873512.pdf.jpg340783b0946d2cb68901697042678be6MD5310183/725032018-10-16 08:58:31.266oai:www.lume.ufrgs.br:10183/72503Repositório de PublicaçõesPUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestopendoar:2018-10-16T11:58:31Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false |
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