Desenvolvimento de biossensor microbiano de metal pesado utilizando Saccharomyces cerevisiae como modelo de estudo

• Autor(a) principal: Grilo, Vinícius Simas
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRJ
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11422/5780
• topic: Biossensor; Cádmio; Saccharomyces cerevisiae; Detecção de metais pesados; CNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA

As técnicas analíticas convencionais para detecção de metais pesados, como espectrometria de absorção atômica, são precisas, porém possuem um custo elevado e necessitam de certa capacitação para serem utilizadas. Biossensores microbianos possuem uma série de vantagens frente à técnicas convencionais como especificidade, baixo custo, portabilidade, vida útil mais longa, maior tolerância a variações de pH e temperatura, além de serem mais baratos que enzimas e anticorpos. Neste estudo, utilizando a levedura S. cerevisiae como modelo, foi verificado o potencial biossensor de uma linhagem mutante dessa levedura baseado no promotor PvSR2 (Stress-Related gene number 2 de Phaseolus vulgaris), que responde especificamente a vários metais pesados, entre eles cádmio e mercúrio. Para a construção de tal biossensor, foram utilizados vetores plasmidiais com dois genes repórteres, lacZ e GFP, sob regulação do promotor PvSR2 , onde estes foram transformados em S. cerevisiae BY4741, gerando duas linhagens mutantes. Para avaliar a capacidade de resposta das leveduras recombinantes à presença de metais pesado, tais células foram expostas a concentrações crescentes de Cd2+ e posteriormente avaliada a atividade β-galactosidase e a fluorescência nas mutantes contendo os genes repórteres lacZ e GFP, respectivamente.