Efeito da terapia gênica com o fato derivado de epitélio pigmentado (PEDF) via vetor viral AAV8 em modelo murinho de silicose
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRJ |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/11422/20165 |
Resumo: | A silicose é uma doença ocupacional relacionada à exposição de trabalhadores a partículas de sílica. A inalação da sílica leva a um processo inflamatório crônico do sistema respiratório e, posteriormente, uma doença fibrosante do parênquima pulmonar. Até o momento, não há um tratamento eficiente para impedir ou minimizar a evolução desta enfermidade. A terapia gênica, que em seu termo mais amplo, significa o tratamento de doenças genéticas ou adquiridas pela introdução de genes exógenos nas células de pacientes, surge como uma alternativa para o tratamento da silicose. Pode ser utilizado sistemas de transferência gênica tanto virais quanto não virais. Dentre os vetores virais, o adenovírus associado 8 (AAV8) surgiu como um vetor promissor para o tratamento de doenças respiratórias, pois, apresenta um tropismo natural para as células epiteliais das vias aéreas e é pouco imunogênico. Um gene promissor para a utilização na terapia gênica em silicose é o fator derivado de epitélio pigmentado (PEDF), pois ele possui atividade antiangiogênica, anti-inflamatória, antifibrótica e antioxidante. Portanto, o presente estudo visa demonstrar o potencial terapêutico do PEDF na silicose. Nesse contexto, foi avaliada a hipótese de que o gene codificador do PEDF, entregue pelo vetor AAV8, reduz a inflamação e o remodelamento pulmonar em modelo murino de silicose. Para tal, camundongos C57BL/6 fêmeas (20-25g) foram divididos aleatoriamente em dois grupos: controle (C) e sílica (SIL). O grupo controle foi subdividido em C-SAL e C-PEDF, e o grupo sílica (instilados com 20 mg/50 µL de sílica) subdividido em SIL-SAL e SIL-PEDF. Os animais dos subgrupos salina, C-SAL e SIL-SAL, foram instilados com 50 µl de salina, intratraquealmente (it) e os animais dos subgrupos PEDF, C-PEDF e SIL-PEDF, foram instilados com o vetor AAV8 carreando o gene codificador do PEDF (AAV8-PEDF), 1010 vg em 50 µL de salina, it. Realizamos três modelos experimentais: 1) vetor AAV8-PEDF instilado 15 dias depois da instilação de sílica, 2) vetor AAV8-PEDF instilado 1 dia antes da instilação de sílica e 3) vetor AAV8-PEDF instilado 28 dias antes da instilação de sílica. A quantidade relativa de RNAm, a mecânica respiratória e fração de área de granuloma foram investigados. A instilação de sílica provocou alterações histológicas no parênquima pulmonar, como a presença de granulomas (modelo 1 e 3), além de causar alta taxa de mortalidade. No modelo 1 não foi observado melhoras na função e histologia pulmonar, além da baixa expressão do gene PEDF no subgrupo SIL-PEDF. No modelo 2, os resultados da mecânica respiratória sugerem ausência do desenvolvimento da doença, também sendo observado redução na expressão do gene PEDF no subgrupo SIL-PEDF em comparação ao subgrupo C-PEDF. No terceiro modelo, não foi observada melhora na função e histologia pulmonar no subgrupo SIL-PEDF, além desse subgrupo apresentar uma diminuição da expressão do gene PEDF em relação ao subgrupo C-PEDF. Devido a alta taxa de mortalidade (modelo 2 e 3) o número experimental foi baixo, sendo necessário seu aumento para confirmação dos resultados. Portanto, mais estudos serão realizados para determinar o efeito da terapia gênica com o PEDF no tratamento silicose. |
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Braga, Igor Corrêa da Costahttp://lattes.cnpq.br/5066327321880472Arruda, Luciana Barros dePereira, Renata de Meirelles SantosFerreira, Debora PiresCosta, Luciana Jesus daVargas, Sabrina Martini2023-04-11T18:07:39Z2023-11-30T03:00:36Z2017-12-07BRAGA, I. C. da C. (2017). Efeito da terapia gênica com o fato derivado de epitélio pigmentado (PEDF) via vetor viral AAV8 em modelo murinho de silicose [Trabalho de conclusão de curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon.http://hdl.handle.net/11422/20165Submitted by Luiza Arias (luiza@micro.ufrj.br) on 2023-04-11T18:07:39Z No. of bitstreams: 1 ICCBraga.pdf: 883668 bytes, checksum: 66e9153bf037bcf39efd337a1f2bb60f (MD5)Made available in DSpace on 2023-04-11T18:07:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ICCBraga.pdf: 883668 bytes, checksum: 66e9153bf037bcf39efd337a1f2bb60f (MD5) Previous issue date: 2017-12-07A silicose é uma doença ocupacional relacionada à exposição de trabalhadores a partículas de sílica. A inalação da sílica leva a um processo inflamatório crônico do sistema respiratório e, posteriormente, uma doença fibrosante do parênquima pulmonar. Até o momento, não há um tratamento eficiente para impedir ou minimizar a evolução desta enfermidade. A terapia gênica, que em seu termo mais amplo, significa o tratamento de doenças genéticas ou adquiridas pela introdução de genes exógenos nas células de pacientes, surge como uma alternativa para o tratamento da silicose. Pode ser utilizado sistemas de transferência gênica tanto virais quanto não virais. Dentre os vetores virais, o adenovírus associado 8 (AAV8) surgiu como um vetor promissor para o tratamento de doenças respiratórias, pois, apresenta um tropismo natural para as células epiteliais das vias aéreas e é pouco imunogênico. 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No modelo 2, os resultados da mecânica respiratória sugerem ausência do desenvolvimento da doença, também sendo observado redução na expressão do gene PEDF no subgrupo SIL-PEDF em comparação ao subgrupo C-PEDF. No terceiro modelo, não foi observada melhora na função e histologia pulmonar no subgrupo SIL-PEDF, além desse subgrupo apresentar uma diminuição da expressão do gene PEDF em relação ao subgrupo C-PEDF. Devido a alta taxa de mortalidade (modelo 2 e 3) o número experimental foi baixo, sendo necessário seu aumento para confirmação dos resultados. Portanto, mais estudos serão realizados para determinar o efeito da terapia gênica com o PEDF no tratamento silicose.porUniversidade Federal do Rio de JaneiroUFRJBrasilInstituto de Microbiologia Paulo de GóesCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIACNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIATerapia genéticaSilicoseAdenovírus associadoGenetic therapySilicosisAdeno-associated virusEfeito da terapia gênica com o fato derivado de epitélio pigmentado (PEDF) via vetor viral AAV8 em modelo murinho de silicoseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisabertoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRJinstname:Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ)instacron:UFRJLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81853http://pantheon.ufrj.br:80/bitstream/11422/20165/2/license.txtdd32849f2bfb22da963c3aac6e26e255MD52ORIGINALICCBraga.pdfICCBraga.pdfapplication/pdf883668http://pantheon.ufrj.br:80/bitstream/11422/20165/1/ICCBraga.pdf66e9153bf037bcf39efd337a1f2bb60fMD5111422/201652023-11-30 00:00:36.831oai:pantheon.ufrj.br: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Repositório de PublicaçõesPUBhttp://www.pantheon.ufrj.br/oai/requestopendoar:2023-11-30T03:00:36Repositório Institucional da UFRJ - Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ)false |
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