Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Varela, Kyvia Regina Fernandes
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/35782
Resumo: Plasmídeos (pDNAs) são DNAs circulares presentes principalmente nas bactérias, com importância biotecnológica na área da terapia gênica e vacinas de DNA. Entretanto, mesmo sendo seguros e acessíveis, estes vetores possuem limitações relacionadas à baixa estabilidade e baixa eficiência na transfecção celular. Diante disso, esse trabalho teve como objetivo elucidar parâmetros físico-químicos e biológicos da estabilidade dos plasmídeos pVAX1, pVAX1LacZ e nTSApVAX1, tais como tamanho, temperatura e concentração de nuclesases sanguíneas. Além disso, desenvolver novas nanoformulações que pudessem garantir maior proteção aos plasmídeos, utilizando para isso nanopatículas de polímeros biodegradáveis brancas (NB) e funcionalizadas com PEI (NC). Para a avalição da estabilidade e viabilidade dos plasmídeos, foram realizadas eletroforeses em gel de agarose 1%. Os resultados obtidos mostraram que todos os pDNAs são mais degradados em elevadas concentrações de soros de camundongo e humano. Com relação ao tamanho, o plasmídeo maior (pVAX1LacZ) mostrou-se mais susceptível à ação das nucleases, enquanto que a temperatura demonstrou ser uma variável que influencia diretamente na estabilidade desses plasmídeos. No que diz respeito às nanoformulações, verificou-se que as nanopartículas brancas não foram eficientes em proteger os plasmídeos, enquanto as nanopartículas funcionalizadas com PEI, mostraram-se eficientes na proteção dos pDNAs. Através desse estudo, foi possível obter uma alternativa biotecnológica promissora, que confere maior estabilidade aos plasmídeos, possibilitando aplicações futuras em terapias de DNAs.
id UFRN_17471f5cc50b6f589bbe345f69f72e5f
oai_identifier_str oai:https://repositorio.ufrn.br:123456789/35782
network_acronym_str UFRN
network_name_str Repositório Institucional da UFRN
repository_id_str
spelling Varela, Kyvia Regina FernandesWendy Marina Toscano Queiroz de MedeirosVeríssimo, Lourena MafraMonte, Jéssyka Fernanda SantiagoSilva, Marcelo de Souza da2019-11-20T11:35:44Z2021-09-20T17:51:24Z2019-11-20T11:35:44Z2021-09-20T17:51:24Z2019-11-052014088954VARELA, Kyvia Regina Fernandes. Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica. 2019. 30 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Farmácia) - Departamento de Farmácia, Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2019.https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/35782Plasmídeos (pDNAs) são DNAs circulares presentes principalmente nas bactérias, com importância biotecnológica na área da terapia gênica e vacinas de DNA. Entretanto, mesmo sendo seguros e acessíveis, estes vetores possuem limitações relacionadas à baixa estabilidade e baixa eficiência na transfecção celular. Diante disso, esse trabalho teve como objetivo elucidar parâmetros físico-químicos e biológicos da estabilidade dos plasmídeos pVAX1, pVAX1LacZ e nTSApVAX1, tais como tamanho, temperatura e concentração de nuclesases sanguíneas. Além disso, desenvolver novas nanoformulações que pudessem garantir maior proteção aos plasmídeos, utilizando para isso nanopatículas de polímeros biodegradáveis brancas (NB) e funcionalizadas com PEI (NC). Para a avalição da estabilidade e viabilidade dos plasmídeos, foram realizadas eletroforeses em gel de agarose 1%. Os resultados obtidos mostraram que todos os pDNAs são mais degradados em elevadas concentrações de soros de camundongo e humano. Com relação ao tamanho, o plasmídeo maior (pVAX1LacZ) mostrou-se mais susceptível à ação das nucleases, enquanto que a temperatura demonstrou ser uma variável que influencia diretamente na estabilidade desses plasmídeos. No que diz respeito às nanoformulações, verificou-se que as nanopartículas brancas não foram eficientes em proteger os plasmídeos, enquanto as nanopartículas funcionalizadas com PEI, mostraram-se eficientes na proteção dos pDNAs. Através desse estudo, foi possível obter uma alternativa biotecnológica promissora, que confere maior estabilidade aos plasmídeos, possibilitando aplicações futuras em terapias de DNAs.Plasmids (pDNAs) are circular DNAs presented mainly in bacteria, with biotechnological importance in the area of gene therapy and DNA vaccines. However, even though they are safe and affordable, these vectors have restrictions related to low stability and low efficiency in cell transfection. Therefore, this work aims to elucidate physicochemical and biological stability parameters of plasmids pVAX1, pVAX1LacZ and nTSApVAX1 – such as size, temperature and blood nucleases’ concentration – and to develop new nanoformulations that could guarantee greater protection to the plasmids, through use of functionalized with PEI (NC) and white biodegradable polymer nanoparticles (NB). For the evaluation of plasmid stability and viability, 1% agarose gel electrophoresis was performed. The results showed that all pDNAs are more degradable in high concentrations of mouse and human serum. Regarding size, the larger plasmid, pVAX1LacZ, was more susceptible to nuclease action; meanwhile temperature directly influenced the stability of these plasmids. Concerning the nanoformulations, it was found that white nanoparticles were not efficient in protecting the plasmids, while PEI functionalized nanoparticles proved to be efficient in protecting pDNAs.Through this study, it was possible to obtain a promising biotechnological alternative, which gives greater stability to the plasmids, enabling future applications in DNA therapies.Universidade Federal do Rio Grande do NorteUFRNBrasilFarmáciaAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessplasmídeosnucleasesnanopartículasestabilidadePlasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológicainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRNORIGINALPlasmídeosassociados_Varela_2019.pdfapplication/pdf1890397https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/1/Plasm%c3%addeosassociados_Varela_2019.pdf78b6c832a053953d65f16738fcca6a1dMD51CC-LICENSElicense_rdfapplication/octet-stream811https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/2/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD52LICENSElicense.txttext/plain762https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/3/license.txte428689918449bd69f843393981e4109MD53TEXTPlasmídeosassociados_Varela_2019.pdf.txtExtracted texttext/plain67996https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/4/Plasm%c3%addeosassociados_Varela_2019.pdf.txt85153483707ded431772bea40c90d660MD54123456789/357822021-09-20 14:51:24.292oai:https://repositorio.ufrn.br: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ório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/opendoar:2021-09-20T17:51:24Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
title Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
spellingShingle Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
Varela, Kyvia Regina Fernandes
plasmídeos
nucleases
nanopartículas
estabilidade
title_short Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
title_full Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
title_fullStr Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
title_full_unstemmed Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
title_sort Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica
author Varela, Kyvia Regina Fernandes
author_facet Varela, Kyvia Regina Fernandes
author_role author
dc.contributor.referees1.none.fl_str_mv Veríssimo, Lourena Mafra
dc.contributor.referees2.none.fl_str_mv Monte, Jéssyka Fernanda Santiago
dc.contributor.author.fl_str_mv Varela, Kyvia Regina Fernandes
dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv Wendy Marina Toscano Queiroz de Medeiros
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Silva, Marcelo de Souza da
contributor_str_mv Wendy Marina Toscano Queiroz de Medeiros
Silva, Marcelo de Souza da
dc.subject.por.fl_str_mv plasmídeos
nucleases
nanopartículas
estabilidade
topic plasmídeos
nucleases
nanopartículas
estabilidade
description Plasmídeos (pDNAs) são DNAs circulares presentes principalmente nas bactérias, com importância biotecnológica na área da terapia gênica e vacinas de DNA. Entretanto, mesmo sendo seguros e acessíveis, estes vetores possuem limitações relacionadas à baixa estabilidade e baixa eficiência na transfecção celular. Diante disso, esse trabalho teve como objetivo elucidar parâmetros físico-químicos e biológicos da estabilidade dos plasmídeos pVAX1, pVAX1LacZ e nTSApVAX1, tais como tamanho, temperatura e concentração de nuclesases sanguíneas. Além disso, desenvolver novas nanoformulações que pudessem garantir maior proteção aos plasmídeos, utilizando para isso nanopatículas de polímeros biodegradáveis brancas (NB) e funcionalizadas com PEI (NC). Para a avalição da estabilidade e viabilidade dos plasmídeos, foram realizadas eletroforeses em gel de agarose 1%. Os resultados obtidos mostraram que todos os pDNAs são mais degradados em elevadas concentrações de soros de camundongo e humano. Com relação ao tamanho, o plasmídeo maior (pVAX1LacZ) mostrou-se mais susceptível à ação das nucleases, enquanto que a temperatura demonstrou ser uma variável que influencia diretamente na estabilidade desses plasmídeos. No que diz respeito às nanoformulações, verificou-se que as nanopartículas brancas não foram eficientes em proteger os plasmídeos, enquanto as nanopartículas funcionalizadas com PEI, mostraram-se eficientes na proteção dos pDNAs. Através desse estudo, foi possível obter uma alternativa biotecnológica promissora, que confere maior estabilidade aos plasmídeos, possibilitando aplicações futuras em terapias de DNAs.
publishDate 2019
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2019-11-20T11:35:44Z
2021-09-20T17:51:24Z
dc.date.available.fl_str_mv 2019-11-20T11:35:44Z
2021-09-20T17:51:24Z
dc.date.issued.fl_str_mv 2019-11-05
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
format bachelorThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.pt_BR.fl_str_mv 2014088954
dc.identifier.citation.fl_str_mv VARELA, Kyvia Regina Fernandes. Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica. 2019. 30 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Farmácia) - Departamento de Farmácia, Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2019.
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/35782
identifier_str_mv 2014088954
VARELA, Kyvia Regina Fernandes. Plasmídeos associados à nanopartículas biodegradáveis para melhorar as propriedades de estabilidade: uma aplicação biotecnológica. 2019. 30 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Farmácia) - Departamento de Farmácia, Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2019.
url https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/35782
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
eu_rights_str_mv openAccess
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal do Rio Grande do Norte
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFRN
dc.publisher.country.fl_str_mv Brasil
dc.publisher.department.fl_str_mv Farmácia
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal do Rio Grande do Norte
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFRN
instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)
instacron:UFRN
instname_str Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)
instacron_str UFRN
institution UFRN
reponame_str Repositório Institucional da UFRN
collection Repositório Institucional da UFRN
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/1/Plasm%c3%addeosassociados_Varela_2019.pdf
https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/2/license_rdf
https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/3/license.txt
https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/35782/4/Plasm%c3%addeosassociados_Varela_2019.pdf.txt
bitstream.checksum.fl_str_mv 78b6c832a053953d65f16738fcca6a1d
e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34
e428689918449bd69f843393981e4109
85153483707ded431772bea40c90d660
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1802117877443067904

Registros relacionados