Fantastic genes and where to find them: molecular basis of alcohol effects in zebrafish populations

• Autor(a) principal: Barbosa, Thaís Agues
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/33005
• topic: Teste de tanque novo; Dopamina; Serotonina; Serotonina; Adenosina

O álcool (ou etanol) é um poderoso psicoativo e seu consumo excessivo pode levar o indivíduo a desenvolver o alcoolismo. No entanto, sabe-se que há variações genéticas, fisiológicas e comportamentais que influenciam a forma como os indivíduos respondem ao álcool. Neste sentido, estudos comparativos entre populações de uma mesma espécie são úteis. Assim, avaliamos o padrão comportamental e molecular da resposta ao álcool em populações de zebrafish (Danio rerio), utilizando diferentes protocolos e fases do desenvolvimento. No primeiro capítulo, avaliamos o padrão comportamental e níveis de mRNA em três populações de zebrafish (AB, TU e WT) expostas à combinação entre doses crônicas (0% ou 0.5%) e agudas (0% ou 0.5%) de álcool. Analisamos o comportamento locomotor e tipo-ansioso, e a expressão de mRNAs envolvidos no metabolismo de neuromediadores afetados pelo álcool (Th1, Ache, Gaba1, Gad1b, Tph1, Ada1, BDNF). Observamos que a resposta locomotora (velocidade média e distância percorrida) e genes associados (Gaba1 e Gad1b) foram similares entre as três populações, com aumento do comportamento e da expressão dos genes durante o tratamento agudo. Já os níveis de Th1 e Ache se mostraram similares entre TU e WT, com aumento da expressão nos tratamentos agudo e abstinência. Em termos de ansiedade, TU e AB respondem de maneira similar (maior distância do fundo durante a abstinência e aumento nos níveis de Tph1 e ADA1 durante os tratamentos agudo e abstinência), enquanto WT não mostra mudanças no comportamento e níveis transcricionais. Os peixes TU apresentaram aumento da expressão de BDNF nos grupos crônico e abstinência. No segundo capítulo, expusemos embriões das três populações ao álcool (0%, 0.5% ou 1.0%), a fim de simular a desordem do espectro alcóolico fetal – FASD. Avaliamos o comportamento em três janelas ontogenéticas: larval, juvenil e adulta. Verificamos novamente resposta consistente e padronizada entre as populações AB e TU, enquanto WT não mostraram alteração. Durante a fase larval, AB e WT expostos ao álcool embrionário apresentaram aumento da locomoção (velocidade média e distância percorrida), enquanto TU mostrou diminuição da resposta motora. Quanto à ansiedade, observamos diminuição da ansiedade (tempo na borda e distância da borda) em todas as populações expostas ao álcool. Na fase juvenil, AB e TU mantiveram o padrão locomotor da fase larval, porém não apresentaram resposta tipo-ansiosa alterada nos grupos expostos ao álcool. WT, por outro lado, não mostrou mudança locomotora ou tipo-ansiosa. Durante a fase adulta, AB e TU expostos ao álcool embrionário exibiram aumento da locomoção e ansiedade, enquanto WT não expressaram diferenças comportamentais. No último capítulo, tentamos estabelecer um novo protocolo experimental de busca voluntária pelo álcool. Após induzir os animais ao alcoolismo por meio da combinação entre doses crônicas (0% ou 0.5%) e agudas (0% ou 0.5%) de álcool, testamos a preferência deles pelo álcool ou pela água. Constatamos que os animais preferiram o lado da água, evidenciando que talvez o protocolo não seja suficiente para induzir o comportamento de busca. Em termos gerais, a resposta ao álcool depende do regime de exposição e da contribuição do background genético. Para fins de estudos translacionais, populações-padrão utilizadas em laboratório oferecem resultados confiáveis e reproduzíveis devendo ser, portanto, priorizadas.