Avaliação da expressão do antígeno 503 de Leishmania I. Chagasi por Escherichia coli M15 utilizando diferentes concentrações de IPTG

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Everaldo Silvino dos
Data de Publicação: 2017
Outros Autores: Asevedo, Estéfani Alves, Ribeiro, Vitor Troccoli Ribeiro
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/32316
Resumo: A leishmaniose visceral é uma doença parasitária infecciosa causada por protozoários do gênero Leishmania, que pode ser letal quando não é feito um tratamento adequado. O aumento da incidência desta doença torna importante a busca por alternativas de baixo custo para diagnóstico rápido e vacinas. Nesse contexto, o principal objetivo desta pesquisa foi avaliar a influência do IPTG na expressão do antígeno 503 de Leishmania i. Chagasi expresso em Escherichia coli. A bactéria foi cultivada em três ensaios diferentes, chamados Cinética A, B, C, onde a concentração do indutor IPTG foi variada em 10, 100 e 1500 μM, respectivamente. Observou-se que na Cinética C (1500 μM), obteve-se uma maior concentração de proteínas totais e a partir de uma análise qualitativa (eletroforese) observou-se que na cinética A e C obteve-se a melhor expressão do antígeno 503. Para purificação do antígeno,utilizou-se resina de níquel sefarose, operada em leito fixo. Os resultados qualitativos da purificação mostraram que não foi eficiente
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Nesse contexto, o principal objetivo desta pesquisa foi avaliar a influência do IPTG na expressão do antígeno 503 de Leishmania i. Chagasi expresso em Escherichia coli. A bactéria foi cultivada em três ensaios diferentes, chamados Cinética A, B, C, onde a concentração do indutor IPTG foi variada em 10, 100 e 1500 μM, respectivamente. Observou-se que na Cinética C (1500 μM), obteve-se uma maior concentração de proteínas totais e a partir de uma análise qualitativa (eletroforese) observou-se que na cinética A e C obteve-se a melhor expressão do antígeno 503. Para purificação do antígeno,utilizou-se resina de níquel sefarose, operada em leito fixo. Os resultados qualitativos da purificação mostraram que não foi eficienteVisceral leishmaniasis is an infectious-parasitic disease caused by protozoa of the genus Leishmania, which can be lethal when there is no adequate treatment. The increasing incidence of this disease makes important the search for alternatives of low cost for rapid diagnosis and vaccine. In this context, the main objective of this research was to evaluate the influence of IPTG on 503 antigen expression of Leishmania i. chagasi expressed in Escherichia coli. The bacteria was cultured in three different assays, called Kinetics A, B, C where the concentration of the IPTG inducer was varied at 10, 100 and 1500 μM respectively. It was observed that in Kinetics C (1500μM), it was obtained a higher concentration of native proteins and from a qualitative analysis (electrophoresis) it was observed that in Kinetics A and C obtained the best expression of 503 antigen. For purification of the antigen, the Nickel Sepharose Resin, operated in fixed bed was used. The qualitative results of the purification showed that it was not efficientRevista Processos QuímicosAttribution-NonCommercial 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessIPTGLeishmanioseEscherichia coli recombinanteAntígeno 503LeishmaniasisRecombinant Escherichia coli503 antigenAvaliação da expressão do antígeno 503 de Leishmania I. Chagasi por Escherichia coli M15 utilizando diferentes concentrações de IPTGinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleporreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRNORIGINALAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdfAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdfapplication/pdf3062347https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/32316/1/Avalia%c3%a7%c3%a3oExpress%c3%a3oAnt%c3%adgeno_Santos_2017.pdf1f88116de2aaca6c4ca3a296b4cd050aMD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8920https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/32316/2/license_rdf728dfda2fa81b274c619d08d1dfc1a03MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81484https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/32316/3/license.txte9597aa2854d128fd968be5edc8a28d9MD53TEXTAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdf.txtAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdf.txtExtracted texttext/plain11995https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/32316/4/Avalia%c3%a7%c3%a3oExpress%c3%a3oAnt%c3%adgeno_Santos_2017.pdf.txtffa09dae756933481332ef3ba4ca83ceMD54THUMBNAILAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdf.jpgAvaliaçãoExpressãoAntígeno_Santos_2017.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1936https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/32316/5/Avalia%c3%a7%c3%a3oExpress%c3%a3oAnt%c3%adgeno_Santos_2017.pdf.jpgc38561273a0ca01b5e808a67ef37cbcaMD55123456789/323162021-05-02 08:35:19.664oai:https://repositorio.ufrn.br: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Repositório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/opendoar:2021-05-02T11:35:19Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false
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