Caracterização do transcriptoma de blastosporos de um isolado nativo de Metarhizium pingshaense expostos à UV-B e virulência para Rhipicephalus microplus

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Corval, Amanda Rocha da Costa
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ
Texto Completo: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9705
Resumo: Metarhizium spp. é um dos fungos entomopatogênicos mais utilizados no controle de pragas agrícolas e tem sido considerado uma alternativa promissora no controle de Rhipicephalus microplus. Porém, estes agentes podem ser negativamente afetados por fatores bióticos e abióticos, como a irradiação solar, principalmente a fração UV-B, que causa sérios danos aos fungos, diminuindo sua eficácia no controle de pragas. Este trabalho teve como objetivos: 1) identificar a espécie do isolado nativo de Metarhizium sp.; 2) verificar a tolerância à UV-B de conídios, blastosporos e microescleródios do isolado LCM S10 de M. pingshaense; 3) avaliar a sobrevivência de fêmeas ingurgitadas de R. microplus tratadas com blastosporos de M. pingshaense LCM S10 e expostas à radiação UV-B por três dias consecutivos; 4) analisar o transcriptoma de blastosporos do isolado LCM S10 de M. pingshaense. Os propágulos (conídios, blastosporos e microescleródios) foram expostos à radiação UV-B com fluência total de 4,0 kJ/m2. Conídios foram avaliados quanto à germinação 24h após exposição à UV-B. Microescleródios e blastosporos foram avaliados quanto à presença de unidades formadoras de colônias (UFC) 24 e 72h após exposição à UV-B, respectivamente. Todos os três propágulos demonstraram alta tolerância à radiação ultravioleta. O bioensaio para verificação da mortalidade de fêmeas ingurgitadas de R. microplus, bem como análise dos parâmetros biológicos mostrou que não houve diferença estatística entre o controle e o grupo de fêmeas tratadas com blastosporos e expostas à UV-B por três dias consecutivos, provando que a radiação ultravioleta oferece danos aos propágulos fúngicos. Em relação à sobrevivência das fêmeas, houve diferença estatística e as fêmeas do grupo tratadas com blastosporos e que não foram expostas à UV-B sobreviveram, em média, 12 dias, enquanto as fêmeas tratadas com blastosporos e expostas à radiação ultravioleta por três dias consecutivos teve uma média de sobrevivência de 18,5 dias. Todas as fêmeas do grupo controle tiveram média de sobrevivência de 23 dias. Para entender como a luz UV-B regula a expressão gênica em blastosporos de M. pingshaense, foi realizada uma análise transcricional, onde foram identificados 728 genes diferencialmente expressos, sendo 320 genes induzidos e 408 genes suprimidos na presença de UV-B. As categorias funcionais onde os genes que foram mais suprimidos se encontram são: transporte e metabolismo de aminoácidos; transporte e metabolismo de carboidratos e modificação pós-traducional, volume de proteínas e chaperonas. Já as categorias funcionais onde os genes mais induzidos se encontram são: biossíntese, transporte e catabolismo de metabólitos secundários, transporte e metabolismo de coenzimas e pós-traducional, volume de proteínas e chaperonas. Os dados sobre a tolerância à UV-B de um isolado fúngico revelam informações importantes sobre a sua tolerância intrínseca. Este é o primeiro trabalho analisando o transcriptoma de blastosporos de M. pingshaense quando expostos à UV-B.
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Porém, estes agentes podem ser negativamente afetados por fatores bióticos e abióticos, como a irradiação solar, principalmente a fração UV-B, que causa sérios danos aos fungos, diminuindo sua eficácia no controle de pragas. Este trabalho teve como objetivos: 1) identificar a espécie do isolado nativo de Metarhizium sp.; 2) verificar a tolerância à UV-B de conídios, blastosporos e microescleródios do isolado LCM S10 de M. pingshaense; 3) avaliar a sobrevivência de fêmeas ingurgitadas de R. microplus tratadas com blastosporos de M. pingshaense LCM S10 e expostas à radiação UV-B por três dias consecutivos; 4) analisar o transcriptoma de blastosporos do isolado LCM S10 de M. pingshaense. Os propágulos (conídios, blastosporos e microescleródios) foram expostos à radiação UV-B com fluência total de 4,0 kJ/m2. Conídios foram avaliados quanto à germinação 24h após exposição à UV-B. Microescleródios e blastosporos foram avaliados quanto à presença de unidades formadoras de colônias (UFC) 24 e 72h após exposição à UV-B, respectivamente. Todos os três propágulos demonstraram alta tolerância à radiação ultravioleta. O bioensaio para verificação da mortalidade de fêmeas ingurgitadas de R. microplus, bem como análise dos parâmetros biológicos mostrou que não houve diferença estatística entre o controle e o grupo de fêmeas tratadas com blastosporos e expostas à UV-B por três dias consecutivos, provando que a radiação ultravioleta oferece danos aos propágulos fúngicos. Em relação à sobrevivência das fêmeas, houve diferença estatística e as fêmeas do grupo tratadas com blastosporos e que não foram expostas à UV-B sobreviveram, em média, 12 dias, enquanto as fêmeas tratadas com blastosporos e expostas à radiação ultravioleta por três dias consecutivos teve uma média de sobrevivência de 18,5 dias. Todas as fêmeas do grupo controle tiveram média de sobrevivência de 23 dias. Para entender como a luz UV-B regula a expressão gênica em blastosporos de M. pingshaense, foi realizada uma análise transcricional, onde foram identificados 728 genes diferencialmente expressos, sendo 320 genes induzidos e 408 genes suprimidos na presença de UV-B. As categorias funcionais onde os genes que foram mais suprimidos se encontram são: transporte e metabolismo de aminoácidos; transporte e metabolismo de carboidratos e modificação pós-traducional, volume de proteínas e chaperonas. Já as categorias funcionais onde os genes mais induzidos se encontram são: biossíntese, transporte e catabolismo de metabólitos secundários, transporte e metabolismo de coenzimas e pós-traducional, volume de proteínas e chaperonas. Os dados sobre a tolerância à UV-B de um isolado fúngico revelam informações importantes sobre a sua tolerância intrínseca. Este é o primeiro trabalho analisando o transcriptoma de blastosporos de M. pingshaense quando expostos à UV-B.CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorFAPERJ - Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroMetarhizium spp. is one of the most used entomopathogenic fungi to control agricultural pests and also presents positive results in tests against Rhipicephalus microplus. However, these agents can be negatively affected by biotic and abiotic factors, such as solar irradiation, especially the UV-B fraction, which causes serious damage to fungi, decreasing their effectiveness in controlling pests. This work analyzed the M. pingshaense isolate LCM S10 with the objective of: 1) to identify the native isolate of Metarhizium sp.; 2) verifying the UV tolerance of conidia, blastospores and microsclerotia of the isolate LCM S10; 3) to evaluate the survival of engorged females of R. microplus treated with M. pingshaense blastospores and exposed to UV-B radiation for three consecutive days; 4) analyze the transcriptoma of the M. pingshaense isolate LCM S10 after being exposed to UV-B radiation. The propagules (conidia, blastospores and microsclerotia) were exposed to UV-B radiation with a total fluency of 4.0 kJ/m2. Conidia were evaluated for germination 24h after exposure to UV-B. Microsclerotia and blastospores were evaluated for the presence of colony forming units (CFU) 24 and 72h after exposure to UV-B, respectively. All three propagules demonstrated high tolerance to ultraviolet radiation. The bioassay to verify the mortality of engorged females of R. microplus, as well as the analysis of the biological parameters, showed that there was no statistical difference between the control and the group of females treated with blastospores and exposed to UV-B for three consecutive days, proving that ultraviolet radiation damages fungal propagules. Regarding female survival, there was a statistical difference and females in the group treated with blastospores and not exposed to UV-B survived, on average, 12 days, while females treated with blastospores and exposed to ultraviolet radiation for three consecutive days had a median survival of 18.5 days. All females in the control group had a mean survival of 23 days. To understand how UV-B light regulates gene expression in M. pingshaense blastospores, we performed a transcriptional analysis, where differential expression analysis identified 728 genes differentially expressed, 320 genes induced and 408 genes suppressed in the presence of UV-B. The functional categories where the genes that were most suppressed are: transport and metabolism of aminoacids; transport and metabolism of carbohydrates; and post-translational modification, proteins turnover and chaperones. The functional categories where the most induced genes are found are: biosynthesis, transport and catabolism of secondary metabolites; transport and metabolism of coenzymes; and post-translational modification, proteins turnover and chaperones. Data on the UV-B tolerance of a fungal isolate reveal important information about its intrinsic tolerance. This is the first work analyzing the blastospore transcriptoma of M. pingshaense when exposed to UV-B.application/pdfporUniversidade Federal Rural do Rio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Ciências VeterináriasUFRRJBrasilInstituto de VeterináriaCarrapato dos bovinosFungos entomopatogênicosFatores abióticosCattle tickEntomopathogenic fungiAbiotic factorsMedicina VeterináriaCaracterização do transcriptoma de blastosporos de um isolado nativo de Metarhizium pingshaense expostos à UV-B e virulência para Rhipicephalus microplusCharacterization of the transcriptome of blastospores of a native isolate of Metarhizium pingshaense exposed to UV-B and virulence for Rhipicephalus microplusinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttps://tede.ufrrj.br/retrieve/73568/2023%20-%20Amanda%20Rocha%20da%20Costa%20Corval.Pdf.jpghttps://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/6669Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2023-06-06T16:21:06Z No. of bitstreams: 1 2023 - Amanda Rocha da Costa Corval.Pdf: 1998360 bytes, checksum: 2463b0874a01c85827e64711910ac781 (MD5)Made available in DSpace on 2023-06-06T16:21:06Z (GMT). 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