Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bion, Monique Coelho
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFSC
Texto Completo: https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/249932
Resumo: Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2023.
id UFSC_0c5b2fdc0989bfa5b9556f77ad5b0f5f
oai_identifier_str oai:repositorio.ufsc.br:123456789/249932
network_acronym_str UFSC
network_name_str Repositório Institucional da UFSC
repository_id_str 2373
spelling Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitroBiologia celularCélulas-troncoMedicina veterináriaCélulasFelídiosDissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2023.Nos últimos anos, observou-se um crescente interesse pela utilização de células estromais mesenquimais (CEM) como estratégia terapêutica em animais de companhia, principalmente em cães e gatos. Um fator indispensável para o transplante de CEM durante a terapia celular é o grande número de células, o qual é alcançado por amplificação celular in vitro. No entanto, sabe-se que a amplificação prolongada in vitro pode ocasionar acúmulo de dano celular associado à senescência. Portanto, para garantir a eficácia do tratamento e estabelecer protocolos seguros para utilização das CEM em aplicação terapêutica é necessário um aprofundamento na pesquisa básica, contemplando estudos controlados das características e das propriedades biológicas das CEM. Sendo assim, o presente trabalho buscou avaliar o efeito da técnica de amplificação celular in vitro sobre as características das CEM do tecido adiposo de felinos, visando a análise de senescência replicativa. Para isso, as CEM do tecido adiposo de felinos (CEM-TAF), excedentes de excedentes de cirurgia de castração, foram previamente explicados e especificados quanto ao perfil mesenquimal. Os dados patogênicos que as CEM-TAF pediátricas neste trabalho apresentaram perfil mesenquimal, por meio de morfologia fibroblastóide, presença de marcador de superfície mesenquimal (CD90) e ausência de marcadores hematopoiéticos (CD45 e CD34), e pela capacidade de diferenciação das células em fenótipos mesenquimais. A seguir, foi avaliado o efeito da amplificação celular in vitro sobre parâmetros de senescência celular. Para isso, as CEM-TAF foram deixados ao cultivo de passagem 1 (P1) a passagem 7 (P7), e as suas propriedades foram caçadores ao longo das passagens. Os resultados satisfatórios que as CEM-TAF apresentaram aumento no número de células hipertróficas e achatadas com o aumento do número de passagens, e tendência de diminuição no potencial proliferativo acompanhado pela redução da capacidade clonogênica em passagens tardias. Além disso, foi observado aumento do número de células positivas para SAß-gal e da proporção de células com modificações em passagens tardias. As análises de ciclo celular provocaram uma tendência de aumento na proporção de CEM-TAF na fase G1/G0 do ciclo celular e diminuição na fase S em P5 e P7. Em adição, as análises de alterações químicas e ciclo celular produziram aumento da proporção de células em apoptose durante o cultivo de longo prazo. Esses resultados sugerem que a técnica de amplificação celular in vitro por tempo prolongado afeta características importantes das CEM-TAF, que são necessárias para o sucesso da aplicação terapêutica, o que pode comprometer seriamente a segurança e eficácia da utilização dessas células na medicina veterinária regenerativa .Abstract: In recent years, there has been a growing interest in the use of mesenchymal stromal cells (MSC) as a therapeutic strategy in companion animals, mainly dogs, and cats. An indispensable factor for MSC transplantation during cell therapy is the large number of cells achieved by cell amplification in vitro. However, prolonged amplification in vitro can cause an accumulation of cell damage associated with senescence. Therefore, to guarantee treatment efficacy and establish safe protocols for MSC use in therapeutic applications, it is necessary to deepen basic research, including controlled studies of MSC characteristics and biological properties. Thus, the present work evaluated the effect of the in vitro cellular amplification technique on feline adipose tissue-derived MSC (DSC) characteristics, focusing on replicative senescence. In this way, MSC from feline adipose tissue obtained from castration surgery was previously isolated and characterized according to the mesenchymal profile. The data obtained demonstrated that the feline DSC isolated in this work presented a mesenchymal profile through fibroblastic morphology, the presence of mesenchymal surface marker (CD90) and absence of hematopoietic markers (CD45 and CD34), and the ability of cells to differentiate into mesenchymal phenotypes. Next, was evaluated the effect of in vitro cell amplification on cell senescence parameters. Then, feline DSC was cultivated from passage 1 (P1) to passage 7 (P7), and their properties were analyzed along the passages. The results showed that feline DSC showed an increase in the number of hypertrophic and flattened cells with an increase in the number of passages and a tendency towards a decrease in the proliferative potential accompanied by a reduction in the clonogenic capacity in late passages. Furthermore, an increase in the number of cells positive for SA-ß-gal and the proportion of cells with nuclear alterations in late passages was observed. Cell cycle analyses showed a trend towards an increase in the feline DSC ratio in the G1/G0 phase of the cell cycle and a decrease in the S phase at P5 and P7. In addition, analyses of nuclear and cell cycle changes demonstrated an increase in the proportion of cells undergoing apoptosis during long-term culture. These results suggest that in vitro cell amplification for a long time negatively affects important characteristics of feline DSC and can seriously compromise the safety and efficacy of MSC use in regenerative veterinary medicine.Trentin, Andrea GonçalvesUniversidade Federal de Santa CatarinaBion, Monique Coelho2023-09-01T13:05:32Z2023-09-01T13:05:32Z2023info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis62 p.| il., gráfs., tabs.application/pdf382937https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/249932porreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2023-09-01T13:05:32Zoai:repositorio.ufsc.br:123456789/249932Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestopendoar:23732023-09-01T13:05:32Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false
dc.title.none.fl_str_mv Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
title Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
spellingShingle Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
Bion, Monique Coelho
Biologia celular
Células-tronco
Medicina veterinária
Células
Felídios
title_short Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
title_full Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
title_fullStr Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
title_full_unstemmed Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
title_sort Avaliação da senescência replicativa das células estromais mesenquimais do tecido adiposo de felinos durante a amplificação in vitro
author Bion, Monique Coelho
author_facet Bion, Monique Coelho
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Trentin, Andrea Gonçalves
Universidade Federal de Santa Catarina
dc.contributor.author.fl_str_mv Bion, Monique Coelho
dc.subject.por.fl_str_mv Biologia celular
Células-tronco
Medicina veterinária
Células
Felídios
topic Biologia celular
Células-tronco
Medicina veterinária
Células
Felídios
description Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2023.
publishDate 2023
dc.date.none.fl_str_mv 2023-09-01T13:05:32Z
2023-09-01T13:05:32Z
2023
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv 382937
https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/249932
identifier_str_mv 382937
url https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/249932
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 62 p.| il., gráfs., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFSC
instname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
instacron:UFSC
instname_str Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
instacron_str UFSC
institution UFSC
reponame_str Repositório Institucional da UFSC
collection Repositório Institucional da UFSC
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1808652128291389440

Registros relacionados