Ação de compostos bioativos em câncer de tireoide

• Autor(a) principal: Rodrigues, Mariana Teixeira [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://repositorio.unifesp.br/11600/65832
• topic: Câncer de tireoide; Compostos bioativos; Atividade anti-neoplásica; Neoplasias da glândula tireoide

Introdução: A maioria dos casos de câncer de tireoide são carcinomas papilíferos (90 a 95%) e possuem um bom prognóstico, porém por volta de 10% desses casos desenvolvem maior agressividade e, juntamente com os carcinomas anaplásico, correspondem a mais de 50% das mortes. Para estes casos, há alguns inibidores disponíveis, mas estes possuem baixa eficácia e muitos efeitos colaterais, levando o paciente a abandonar o tratamento. Neste cenário, a busca por novos tratamentos é essencial. Atualmente, alguns dos quimioterápicos são ou derivam de compostos bioativos e, portanto, pesquisar a atividade antineoplásica de compostos que posam ser captados pela tireoide, que mostraram ter atividade antineoplásica em outros modelos de câncer, ou que são moléculas novas é muito relevante. Objetivo: Este estudo teve como objetivo fazer uma bioprospecção dos compostos bioativos Iodeto de sódio, Caleína C, Calealactona B, derivado de Caleína C, R- e S- Nuciferina, Tricina, Salcolinas A e B, Selênio-L-Metionina e Lisicamina, os quais poderiam apresentar atividade anti-neoplásica em linhagens de carcinoma anaplásico e papilífero da tireoide. Métodos: Foram utilizadas duas linhagens de carcinoma anaplásico (KTC2 e HTH83) e duas linhagens de carcinoma papilífero da tireoide (BCPAP e TPC1). Após o tratamento com os compostos, foram avaliadas a viabilidade celular por meio do ensaio de PrestoBlue™ , seguido do cálculo do IC50, migração celular por wound healing, morte celular por anexina V-FITC na presença de inibidores específicos, ativação de caspase 3/7 pelo ensaio CellEvent e geração de espécies reativas de oxigênio com o reagente DCF-DA. Ensaios de Western Blot foram feitos para determinar a modulação das vias de ERK/MAPK e PI3K/AKT, que foi complementado com estudo in sílico com as ferramentas PASS, SEA e GO Biologial Process. Foi utilizada a técnica de hanging drop para formar esferoides das linhagens, os quais foram submetidos ao tratamento crônico com os compostos e a viabilidade foi mensurada por PrestoBlue™. Resultados: Todos os compostos, com exceção do iodeto de sódio, reduziram a viabilidade celular em 72h. A Tricina e Salcolinas A e B tiveram um efeito anti-clonogênico, em HTH83 os três compostos induziram morte por necrose, enquanto em TPC1 a Tricina induziu apoptose. A Selênio-L-metionina reduziu a formação de colônias e induziu morte por apoptose confirmada por ativação de caspase 3/7. Ainda, a Selênio-L-Metionina também aumentou a geração de ROS em HTH83 e TPC1, que quando diminuído, levou a redução de apoptose em HTH83. O tratamento com Selênio-L-Metionina reduziu pAKT e pERK em KTC2. A Lisicamina também apresentou efeito anti-clonogênico e induziu morte por necrose nas quatro linhagens, aumentou a geração de ROS em HTH83 e TPC1, mas sua diminuição não afetou morte celular. Em KTC2, verificou-se que a inibição de RIPK1/RIPK3 diminuiu a morte celular, um indicativo de necroptose. Os esferoides das quatro linhagens foram mais resistentes ao tratamento com Selenio-L-Metionina e Lisicamina em comparação com a cultura em monocamada, sendo necessário adotar o tratamento crônico de até 14 dias e, em alguns casos, utilizar o dobro da concentração do IC50. Conclusões: Este estudo mostrou todos os bioativos estudados, exceto o iodeto de sódio, modulam a viabilidade celular, com certa seletividade, em células de câncer de tireoide, ainda, mostrou o potencial antitumoral da Se-L-Met e da Lisicamina, que podem modular vias associadas a stress oxidativo e morte celular. Porém, sua atividade foi diminuída no modelo de esferoide, destacando a importância de utilizar outros modelos além da cultura em monocamada.