O papel da dicer na diferenciação de adipócitos marrons in vivo

• Autor(a) principal: Branquinho, Jessica Lais de Oliveira [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5015440; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50537
• topic: Tecido adiposo; Diferenciação; Dicer; Células precursoras (Myf5); Termogênese; Metabolismo; Adipose tissue; Differentiation; Dicer; Precursor cells (Myf5); Thermogenesis; Metabolism

Objetivo: Gerar animais nocautes para Dicer em células mesenquimais precursoras que expressam o fator miogênico 5 (Myf5) e avaliar a resposta deste nocauteamento em adipócitos marrons em camundongos. Métodos: Além de gerar os animais nocautes para Dicer em células precursoras Myf5+ constitutivamente, geramos o modelo de nocauteamento induzível por tamoxifeno em diferentes fases do desenvolvimento do camundongo, além de realizar diversos experimentos para avaliar o perfil metabólico, distribuição dos tecidos e função termogênica do tecido adiposo marrom. Resultados: Pelo fato do nocauteamento de Dicer em células precursoras Myf5+ constitutivamente ter se mostrado letal, o modelo induzível tornou-se o melhor modelo para ser estudado. A injeção de tamoxifeno em fêmeas grávidas mostrou-se prejudicial, levando ao aborto, porém com cirurgia de cesária foi possível assegurar a vida dos embriões. Os camundongos machos que foram induzidos no período recém nascido (sete dias de vida) indicaram uma forte tendência à possuírem algum tipo de síndrome metabólica, como a resistência à insulina e aumento da massa de tecido adiposo branco do tipo subcutâneo. Em contra partida, os animais tratados com tamoxifeno no período jovem (quatro semanas de vida) não apresentaram nenhuma diferença ou tendência em todos os parâmetros analisados, independente do gênero (macho ou fêmea). Já os animais que foram nocauteados no período adulto (três meses de idade) apresentaram diferenças significativas em relação à termogênese e distribuição dos tecidos. Os machos nocautes demonstraram diminuição significativa quanto à função termogênica do tecido adiposo marrom quando expostos ao frio e as fêmeas nocautes demonstraram uma temperatura mais elevada durante a exposição ao frio crônico, além de uma diminuição no músculo gastrocnêmio após o frio. Ambos apresentaram um aumento significativo na massa do tecido adiposo marrom, fígado e rim após a exposição crônica ao frio, independente do genótipo. Além disso, foi possível verificar que o perfil histológico foi alterado nos animais nocaute, porém de maneira diferente em machos e fêmeas. Conclusões: A letalidade do modelo de nocauteamento constitutivo deve-se ao fato da Dicer e os microRNAs serem muito importantes para o desenvolvimento das células, mas ainda não se sabe ao certo os motivos que levam à inviabilidade. O modelo de nocauteamento induzível se xviii mostrou eficaz para esse estudo e pode-se ver que o efeito do nocauteamento da Dicer é diferente nas diversas fases do desenvolvimento animal, dependendo do grau de formação dos tecidos, da metodologia de ativação do tecido adiposo marrom e do gênero. Este estudo pode ajudar na compreensão do desenvolvimento e formação do tecido adiposo e dos efeitos metabólicos que a falta de Dicer em células mesenquimais precursoras que expressam Myf5 podem causar